全自动生化分析仪的校准

1、全自动生化分析仪的校准一、校准的重要性和必要性首先必须明确生化分析仪不管如何先进，它还是一个比拟器，它测试出来的标本结果是随着标准限的设置不同而变化的。所以，在卫生部临床检验中心拟定的“临床实验室定量测定室质控工作指南中明确指出“对测定标本的仪器一定要求进行校准，校准时要选 择适宜的配套的标准品/校准品；如有可能，校准品应能溯源到参考方法或/和参考物质；对不同的分析工程要根据其特性确立各自的校准频率。这说明校准仪器是室质控的重要局部，强调了校准工作的必要性和重要性，同时指出了校准的方法和要求。二、确立测定系统的概念对于一个临床检测工程，如果所用方法的测定原理、试剂、仪器、校准品中任何一个不同，

2、都可能得到不同的测定结果。因此，测定系统包括测定原理、试齐V、仪器、校准品四要素。如果我们想要得到准确可靠的测定结果，而该结果又具有与国际、国其他实验室的可比性，应该自己建立一个标准测定系统。在全自动 生化分析仪上使用配套的试剂和标准品，即日立7170使用宝灵曼的试剂和校准品c.fas ，在贝克曼 CX-7生化分析仪上使用贝 克曼的试剂和校准品等。各仪器厂家均有自己的标准测定系统。对于校准品不能乱用，如绝对不能用贝克曼的校准品校准日立生化仪，同样也不能用宝灵曼的校准品去校准贝克曼生化仪。三、校准品和质控品校准品Calibration materials含有量的欲测物， 用以校准该测定方法的数值

3、，它与该方法与试剂、仪器是相关联的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂等造成 的系统误差。因此最好为人血清基质，以减少基质效应造成的误差。质控品Control materials只用于和待测标本同时测定的，为了控制标本的测定误差，因此要求保存时间十分稳定。前者是校准其值而后者是控制误差用的。四、校准前准备1. 了解灯泡已使用多久？检查飘移是否符合要求；2. 检查比色杯的清洁与磨损情况？必要时进行更换；3. 用清洁剂泡洗管道4. 测定仪器的精密度与线性是否到达仪器性能要求？五、定值质控血清是否可以校准仪器？我们在相同条件下， 同时用五个进口产品， 每家两种不同浓度的定值如 TP、ALB UR

4、EAUA ALP、GGT CK HBDH LD AMY等，在日立7170A上进行测定用常规试剂，详见质控血清对部份常规测定工程如T、ALB UREA Cr、UA K、Na、Cl、AST ALT 结果与靶值比拟：表不同厂家定值质控对 TP、ALB、AST ALP结果与靶值比拟TPALBUREAASTALPT差%偏T差%偏T差%偏T差%偏T差%偏1汽巴康5794.329005.4.543.5-10964.22汽巴康4694.82482.0.31976-5.418.7-115260.21宝灵曼502.0.83417-5.968.50.4.358.2-112242.72宝灵曼.64882.8.7330

5、4-5.2477-6.014.3-124382.71RANDOX.75966.3.84083.8677.4.362.7-17421.1-162RANDOX3938.3.92685.9.62167-5.414.7-12439.1-17Human17284.1.74618-4.783.65.1.5335-7.8162-2.Human2.82968-2.82976-2.12508-5.115.7-117281-9.d1Bio-Re6303981.217.024.6-142522d2Bio-Re4291.7270.01844-4.120.3-1482940.8*从总蛋白结果来看 RANBO与Bio-R

6、ed相差为6.45%，而宝灵曼与 Bio-Red较为接 近；*从白蛋白结果分析，宝灵曼与Bio-Red相对相差5.75%，与总蛋白结果明显不同。Bio-Red那么与汽巴康宁比拟接近。* UREA结果中但凡高值均上不去，分析其原因很可能与我们采用试剂盒的质量有关，所以试剂盒的线性围理应成为选择试剂盒的重要依据之一。但从低值结果分析，也有5%的偏差Bio-Red 与 Human* AST与ALT测定值均低于靶值，这就涉与我们选用什么K值问题。* ALP测定中RANDOX-16.6% 与宝灵曼2.7%靶值之间竟相差 19.3%,这可能涉与试剂 盒选用缓冲液种类，PH值以与所用&值等有关。通过

7、上述结果比拟，说明不同厂家生产的定值质控血清靶值之间有的相差较大，提示 我们决不能用定值质控血清代替校准品作校准用。六、校准方法例如日立Hitachi系列您必须购置宝灵曼Boehringer的试剂与其校准的说明书设置 参数，用c.fas.校准血清进行校准，即可获得各工程的校准K值，同时观察一下各工程测定时反响进程图， 检查各工程参数设置是否在最正确位置，如不在最正确位置应予以重新设置并测定。此时得到的K值即为准确的校准 K值，然后测定待测的 10至20份新鲜血清三次取其平均值，应该说此结果是用 Hitachi-Boehringer检测系统所获的测定值。然后用此血清值校准其它测定系统。表日立71

8、70、BM试剂连续四个月每天进行校正n=81K值的变化PTLBALTASTAeaCrreaUAUGTholCluGaCCKGTGeanM017394602332742756146732543127214491744192564386032DS68.696369.7448140.256.116.917.418.416.85.11617.96V%C.82.01.12.7189.91.11.41.21.01.6961.96七、关于酶活性测定校准问题有的主不进行校准而采用固定K值，有的作者以为应该进行校准。酶活力计算公式如下：酶活力u/l = A/min x Vx 106/ £x vx 1令

9、 k=VX 106/ £x v;那么酶活力u/l = A/mi n x k常用K值有以下几种：a理论K值：根据理论摩尔消光系数 仁来计算，女口NADH为6.22 x 103b实测K值：由于仪器波长的精密与半宽度不同，而应根据实测&值来设定K值c厂家给的K值：厂家生产试剂盒说明书上提供的K值有的厂家提供 6.3 x 103d校准K值：通过校准物直接校准得到的K值在日立7170A全自动生化分析仪上，可以得到几种不同的酶K值，见下表 表 日立7170A全自动生化分析仪上用不同方法得到几种酶的K值指示物波长理论K值实测K值校准K值ALTNADH340nm24442642(8.1% )

10、3026 (23.8%)ASTNADH340nm24442642(8.1% )2775 ( 13.5%)CKNADPH340nm38783878(8.1% )3886 (8.3%)GGT4NA405mm14181539(8.5% )1612 ( 13.7%)GGT4NB405mm14751739(17.9%)ALP4NA(PH10405mm757825 (8.9% )注：1校准物为宝灵曼c.f.a.s ，试剂也用宝灵曼的配套试剂。2括号数字是该 K值与理论K值相比的变化率以上摘自克坚文章中*从上述K值中不难发现实测 K值大于理论K值，这说明生化分析仪的测光系统还存在 着一定误差，如波长、半宽度

11、与光径等偏差，使仪器达不到理论上的最正确状态；*校准K值与实测K值之间也存在一定的差距， 即使指示物和仪器相同，其差异可能由试剂与校准品造成的；*作者认为最好使用校准 K值，但必须由两个先决条件：1必须使用配套的试剂；2必须使用配套的高质量的校准品，但校准K值应有其溯源性。关于酶活标准品，欧洲标准局 BCR和美国国家标准技术研究院 NIST均发表了人 血清基质的酶活性标准物，相信不久将会有公认的标准校准品问世。八、必须拟订校准方案文件校准工作不是仅进行一次就可万事无忧一劳永逸，而必须经常化。按照“临床实验室质量控制QC的要求草案必须要求拟定校准方案，其容包括：1.建立校准方法选择适宜配套的校准品，包括校准品数目、类型和浓度；如有可能校准品应溯源到参考方法或参考物质；确定校准的频度。至少每六个月进行一次校准；如有以下情况发生时，必须进行校准*改变试剂的种类，或者批号更换了。