排石胶囊对肾结石模型大鼠的防治作用

1、排石胶囊对肾结石模型大鼠的防治作用                 作者：石磊 叶其正 罗宇慧 沈明勤 王志刚 丁永芳 彭蕴茹  【摘要】  目的观察排石胶囊对肾结石模型大鼠的防治作用，初步探讨其作用机制。方法采用乙二醇加氯化铵法制作大鼠肾结石模型，观察排石胶囊同步给药后对大鼠24 h排尿量、肾脏器系数、肾组织病理学、血清尿素氮、肌酐、钙含量及肾组织钙含量、24 h尿钙分泌量影响。结果排石胶囊可显着增加24 h排尿量

2、、降低大鼠的肾组织肿胀（P0.050.01），明显减少肾组织内草酸钙结晶、肾小管扩张程度、坏死及炎性渗出等（P0.010.001），显着降低血清尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)水平（P0.050.001），显着降低肾组织钙含量和24 h尿钙分泌量（P0.05）。结论 排石胶囊可增加排尿量、促进肾和血液中Ca2+排泄和代谢，减轻大鼠肾组织因结石引起的损伤和病变，减少肾内草酸钙结晶，从而防治肾结石。 【关键词】  排石胶囊 肾结石 动物疾病模型Abstract：ObjectiveTo observe the preventive effects of  Paishi Caps

3、ule on experimental renal calculus in rats, and explore its mechanism. MethodsThe rat model of renal calcium oxalate stones was induced by administrating ethylene glycol and ammonia chloride.The 24 h urinary output, coefficient and histopathological status of kidneys, the serum creatinnine and blood

4、 urea nitrogen levels, renal tissue calcium content and 24 h urinary calcium were detected.ResultsPaishi Capsule could markedly increase the 24 h urinary output and decrease the degrees of the kidneys swelled in rats（P0.050.01）, decrease the calcium oxalate deposits in the kidneys and the pathologic

5、al change degrees of the kidneys（P0.010.001）.The serum creatinnine and blood urea nitrogen levels were decreased significantly（P0.050.001）, and the renal tissue calcium content and 24 h urinary calcium were decreased significantly（P0.05）. ConclusionPaishi Capsule can increase the urinary output, imp

6、rove the elimination and metabolism of  Ca2+ in the blood and kidneys, decrease the damage caused by the renal stone, obviously inhibit the formation of the kidney calcium oxalate stone in rats.Key words：Paishi Capsule；  Renal Stone；  Animal disease model排石胶囊（金钱草、石韦、徐长卿、车前子、木通、甘草）为清热利

7、湿、通淋排石的临床经验方，主治结石。本实验主要观察排石胶囊对肾结石模型大鼠的防治作用，并初步探讨其作用机制。1  器材1  动物 SD大鼠，清洁级，体重180220 g ，雄性，健康，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，合格证号：SCXK(沪)2002-0010。2  药物 排石胶囊(深棕色清膏)，含35 g生药/ml，批号20050509, 江苏省中医药研究院药物分析室提供； 排石颗粒（无糖型），含11 g生药/g，批号050401，南京同仁堂药业有限责任公司生产。3  试剂 肌酐试剂盒、尿素氮试剂盒、钙测定试剂盒、蛋白测

8、定试剂盒，批号20050811，南京建成生物工程研究所提供。4  仪器 752s型紫外可见分光光度计，上海棱光技术有限公司生产；脱水机，Hypercentre XP型，包埋机Histocentre 2型，英国Shandon公司生产；切片机，HM340E型，德国Zeiss公司生产；显微镜，BX41型，日本Olympus公司生产；病理图文分析系统，HPIAS-1000型，华海公司。         2  方法132.1 造模、给药及指标检测大鼠60只，于清洁级环境中适应性饲养1周后随机均分

9、为6组，每组10只，分别为正常对照组、模型对照组、阳性药（排石颗粒，原剂型）对照组、排石胶囊大、中、小剂量组。除正常对照组每天灌胃给予蒸馏水10 ml/kg外，其余5组大鼠造模（每天均用含1%乙二醇的冷开水作为饮用水，另用2%氯化铵按2 ml/只灌胃），同时阳性药对照组、排石胶囊大、中、小剂量组分别按56，56，28，14 g生药/kg的剂量灌胃给药，模型对照组灌胃给予蒸馏水，各组动物给药容量均为10 ml/kg。连续造模且灌胃给药4周。实验结束前1 d用代谢笼分别收集各大鼠24h空腹尿液，测定24 h排尿量及24 h尿钙（Ca2+）分泌量(甲基百里香酚蓝比色法测定)。末次给药1h后，大鼠采血

10、，离心取上层血清用于生化测定：二乙酰-肟比色法测血清尿素氮(BUN) 水平、除蛋白法测肌酐(Crea)水平。大鼠处死后取两侧肾称重，计算肾脏的脏器系数。每只大鼠取右肾10%甲醛溶液固定，用于肾组织病理学检查；左肾超低温(-65)保存，用于测定肾组织总钙（Ca2+）含量。2.2 肾组织病理组织学检查观察肾皮、髓质分界是否清晰，肾小球、肾小管等有无异常改变，肾间质内有无炎细胞浸润及变性、出血等症状，重点观测肾小管内的草酸钙结晶形成情况，以及周围组织的病变、坏死等。观测指标为肾组织内草酸钙结晶情况、炎性渗出及坏死物的出现、肾小管的扩张情况，按-、+、+、+、+分级。统计处理及评分方法: -、+、+、

11、+、+分别记为1，2，3，4，5分。各给药组实验结果与模型对照组进行组间t检验统计处理。3  结果3.1  排石胶囊对结石大鼠肾组织病理学影响结果见表1。模型组可见肾组织内大量急、慢性炎细胞浸润，大量肾小管高度扩张，管内充满块状半透明的草酸钙结晶，肾小管周围肾小球被挤压，面积减小，肾皮、髓质内可见多处肾小管内有炎性渗出物及坏死，与正常对照组比较，上述3个指标均有统计学差异(P0.01)。与模型对照组比较，除排石胶囊小剂量外的各给药组大鼠肾结石情况有不同程度的显着减少，且肾小管内坏死及炎性渗出物显着轻(P0.010.001)；各给药组大鼠肾小管扩张程度显着减小（P0.050.

12、001）。3.2   排石胶囊对结石大鼠肾脏重量、24h排尿量的影响结果见表2。与模型对照组比较，大剂量组大鼠肾脏重量、肾脏系数显着减轻，24 h排尿量显着增加(P0.050.01)。表1  排石胶囊防治给药对结石大鼠肾组织病理学影响(略)表2  排石胶囊防治给药对结石大鼠肾脏重量、24h排尿量的影响(略)3.3  排石胶囊对结石大鼠血清尿素氮、肌酐、钙含量及肾组织钙含量、24 h尿钙分泌量的影响结果见表3。与模型对照组比较，肾结石模型组大鼠血清尿素氮、肌酐、肾组织钙含量及24 h尿钙分泌量显着增加（P0.001）；排石胶囊大剂量组大鼠血清尿素

13、氮和肌酐水平明显降低、肾组织钙含量和24 h尿钙分泌量显着减少（P0.050.001），中剂量组大鼠肾组织钙含量也明显降低（P0.05）。各给药组大鼠血清钙含量着降低（P0.010.001）。表3   排石胶囊防治给药对结石大鼠血清尿素氮、肌酐、钙含量及肾组织钙含量、24 h尿钙分泌量的影响（略）4  讨论泌尿系统结石属于中医学“淋证”“石淋”范畴，而草酸钙结石约占尿石症的80%，大鼠肾草酸钙结石模型为尿石症实验研究的重要方法。其中，乙二醇加氯化铵法诱导大鼠肾草酸钙结石形成效果显着、简便、稳定2。肾结石模型大鼠同步灌服一定剂量排石胶囊后，能抑制因结石引起的组织水肿和肾脏重量增加，增加排尿量，促进肾脏组织和血液中Ca2+的排泄和代谢，减少肾组织中结石的形成，减缓大鼠肾组织因结石引起的损伤和病变，从而保护肾组织