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文档简介
1、山东中医药高等专科学校中药制剂分析技术精品课程配套电子教案山东中医药高等专科学校概述概述二、高效液相色谱法基本原理二、高效液相色谱法基本原理 HPLC的基本原理和气相色谱法基本相同,但由于液体与气体在密度、粘度、扩散系数上有较大差异。因此,在HPLC分离过程中,速率理论三项动力学因素对峰扩展的影响与气相色谱有较大差别。山东中医药高等专科学校概述概述(一)涡流扩散项(一)涡流扩散项A 在HPLC中,A的含义与气相色谱法是相同的,可表示为:A2dp由于HPLC固定相是高效填料,颗粒更小,填充均匀,A值变得更小,柱效更高。为了使A减小,可从两方面采取措施:(1)采用小粒度、粒度分布均匀及球形或接近球
2、形的固定相(填料) 填料的直径(dp)越小,A越小;但dp越小,越难填匀(大)。山东中医药高等专科学校概述概述(2)采用匀浆法装柱,降低 目前HPLC填充柱柱效已达到每米10万片。(二)分子扩散项(二)分子扩散项B/u 由于液体的扩散系数仅为气体的万分之一到十万分之一。因此在HPLC中,当流动相的线流速(u)略增大时(大于0.5cms1),分子扩散所引起的色谱峰扩散就可忽略不计。山东中医药高等专科学校概述概述(三)传质阻力项(三)传质阻力项C u 传质阻力项是影响色谱峰扩散的主要原因。在液相色谱法中传质阻力系数(C)与气相色谱法不同,由三部分组成,分别为在流动相、静态流动相及固定相中传质阻力系数(Cm、Csm及Cs)。在液相色谱法中,一般采用化学键合相,固定液只是在载体表面的一层单分子层,因此,在固定液中传质阻力Cs可以忽略。因此,CCm+Csm,将此式代入式(17-1)得HA+Cm u +Csmu (17-2)山东中医药高等专科学校概述概述式(17-2)为Van Deemter方程用于液相色谱的一般表现形式。该式说明液相色谱柱的板高H主要由涡流扩散
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