消滞胃宁治疗慢性萎缩性胃炎及伴发胃癌癌前期病变的药理实验研究

1、消滞胃宁治疗慢性萎缩性胃炎及伴发胃癌癌前期病变的药理实验研究        作者:苑伟，徐培元，赵建邦，马迎春，杨芳 【摘要】 目的 观察中药消滞胃宁对大鼠慢性萎缩性胃炎（cag）及胃癌前期病变（plgc）动物模型胃黏膜血流量（gmbf）及其病变逆转 治疗 作用。观察消滞胃宁的镇痛、抗炎作用和对免疫功能的 影响 。 方法 在大鼠cag及plgc动物模型中，用激光多普勒血流计测定大鼠cag和plgc的gmbf，同时对各组cag和plgc的进行了病理组织学检查；镇痛实验采用小鼠冰醋酸扭体法、热板法、恒温水浴甩尾法；抗炎

2、实验使用二甲苯所致小鼠耳肿胀、小鼠毛细血管渗透性实验；免疫实验采用小白鼠碳粒廓清实验和小鼠血清溶血素实验。结果 大鼠慢性萎缩性胃炎及胃癌前期病变动物模型实验中，经消滞胃宁50天的治疗，高剂量组大鼠便溏消失，动物体重较模型对照组增加明显，模型组较正常组gmbf明显减少，各治疗组均可降低gmbf，消滞胃宁高、中、低剂量组大鼠的胃组织病变得到了明显改善。镇痛实验表明：消滞胃宁能减少小鼠冰醋酸扭体次数；提高小鼠热板痛阈值；能延长小鼠恒温水浴甩尾时间。抗炎实验表明：消滞胃宁减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀度；抑制小鼠毛细血管渗透性的增加。免疫实验表明：消滞胃宁能明显提高单核细胞的吞噬功能；增加小鼠血清溶血素含量

3、。结论 消滞胃宁能提高gac和plgc胃黏膜血流量，改善组织病理；消滞胃宁具有明显的镇痛、抗炎作用，并能提高机体免疫力。        【关键词】 消滞胃宁；慢性萎缩性胃炎；胃癌前期病变；胃黏膜血流量；镇痛；抗炎；免疫        experimental research of effect of xiaozhi weining on chronic atrophic gastritis and precancerous lesio

4、ns of gastric cancer        【abstract】 objective to explore the effect of xiaozhi weining on gmbf in rats with atrophic gastritis and precancerous lesions of gastric cancer and to study its therapeutic effects，to explore xiaozhi weining on pharmacodynamic acti

5、on of anti-inflammation and alleviating pain，and impact on immune function.methods a complex method was used to establish the model that was stimulating the various factors to cause flow meter. the date of different groups were analyzed and compared.the mixtures pharmacodynamic action was measured b

6、y observing its effect on torsiversion malposition mice with pain induced by ice acetic.on those with pain induced by hot board，therm ostatical water bath to get rid of the tail law experimentally；resist inflammation experiment use rats ear swelling，rats capillary permeability experiment induced by

7、injecting ice acetic into mice abdominal；the immune experiment uses rats clear exp- eriment of carbon.results the experimental plgc have lower ，xiaozhi weining increased the gmbf. xiaozhi weining can modulate this state and improve the various pathological manifestations of cag and plgc.conclusion x

8、iaozhi weining had effect of anti-inflammation and alleviating pain，and can improve the organisms immune function.        【key words】 xiaozhi weining；chronic atrophic gastritis；precancerous lesions of gastric cancer；gastric mucosia blood flows；alleviating pain

9、；anti-inflammation；immune        应用 中医药防治慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis，cag）是我国医药的优势所在1。消滞胃宁是在临床应用几十年后 总结 出的的临床验方，由黄芪、丹参、枳壳、石菖蒲等多味中药组成的纯中药制剂，具有健脾益气，理气合胃，化瘀解毒之功效。主治脾虚气滞型慢性萎缩性胃炎及伴发胃癌癌前期病变。为进一步 研究 该方的疗效及机制，本文重点观察消滞胃宁对大鼠慢性萎缩性胃炎及胃癌前期病变动物模型的影响，同时对其镇痛、抗炎、免疫作用进行探讨

10、。    1 实验材料    1.1 实验动物 wistar大鼠，雄性，体重（220±20）g，由兰州医学院实验动物中心提供，均在我所动物实验室作2天适应性饲养后进入本研究；健康昆明种、balb/c小鼠由兰州大学动物中心提供，动物合格证号为：甘肃省动物管委会14-002(普)。动物实验合格证：甘肃省医学动物管委会（普）-005。        1.2 受试物 消滞胃宁浸膏粉，由甘肃省药品检验所药理室提供，临用前根据需要配制成不

11、同浓度的混悬液；阳性对照药温胃舒颗粒，合肥神鹿双鹤药业生产，批号0404005。        1.3 实验仪器 gj-8402型热板仪；751-gw分光光度计，惠普上海 分析 仪器有限公司生产；mettler ae240 电子 天平；激光多普勒血流计由南开大学电子仪器厂生产。        1.4 统计学方法 各组数据以x±s表示，组间进行t检验，p<0.05为差异有显著性，p<0.01为差异有非常显著性。

12、60;       2 实验方法与结果        2.1 对大鼠慢性萎缩性胃炎及胃癌前期病变动物模型的影响2 wistar大鼠60只，全部雄性，体重（220±20）g ，每只大鼠足底注射佐剂抗原（同种大鼠胃黏膜浆与freund佐剂以1：1配成乳剂）0.3ml/次，1次/4w，共2次，去氧胆酸自由饮水，浓度为20mmol/l。猪胆汁离心后置-20冰箱备用，使用前溶解至冰水混合物，抽取液体部分，按 12.5ml/kg给大鼠皮下注射，1次

13、/d，共90天。饥饱失常：2天喂食，1天停食，保证足量，自由饮水。60只大鼠随机分为6组，每组10只，以下4组在造模90天均连续用消滞胃宁和阳性对照药温胃舒颗粒灌胃50天，其剂量分别为：消滞胃宁低剂量5.13g/kg；消滞胃宁中剂量10.25g/kg；消滞胃宁高剂量组20.50g/kg；阳性药对照组5.16g/kg，各组在给药期间记录动物一般情况和质量变化。给药结束后，各组大鼠禁食24h，自由饮水，用10g/l戊巴比妥钠（40mg/kg）麻醉后，打开腹腔，沿胃大弯侧作一0.815cm切口，将胃 内容 物冲洗干净，将多普勒血流计光纤探头轻放于胃小弯黏膜上，保持中等压力而没有距离，多普勒血流计频移

14、范围为57khz，时间常数选1s，量程选x1，用特制的外径2.8mm，长2m的光纤探头，输出功率1mw，测定范围为半径1.5mm半球形体微区；血流量单位用多普勒信号的电压值“u”表示，试验开机预热30min，并调零后进行测定。测定后杀检各组大鼠，摘除大鼠胃，沿胃大弯剪开，生理盐水中洗净胃黏膜，肉眼观察胃黏膜大体情况后固定于10 甲醛液中，供病理组织镜检。     2.2 结果     大鼠体质量的变化 正常组在整个试验过程中，未出现便溏，模型组均出现便溏，各治疗组便溏有不同程度转好，其中高剂量组大鼠便溏消失，阳性对

15、照组大鼠的便溏也有一定的改善。模型组质量增长逐渐减慢，在给药后25天及给药50天明显低于正常对照组及治疗组（p0.050.01），给药50天后消滞胃宁治疗组体质量较阳性对照组明显重，结果见表1。表1 各组大鼠体质量变化 （g，x±s，n=10）    注：与模型对照组比较，*p0.05，*p0.01；与正常对照组比较，p0.01         胃黏膜组织病理观察 正常组：上皮细胞及腺体排列整齐，大小形状一致，细胞呈单层柱状，胞质透明或空泡状，腺上皮与腺管分界清楚，

16、固有腺及黏膜无扩张淤血，黏膜肌层无增生。模型组：胃黏膜层变薄，固有腺体数量减少；个别腺体上皮细胞增生，可见肠上皮化生，细胞体积较大、核大、深染，有大而红染的核仁，病理性核分离像可见。间质有少量淋巴细胞、嗜酸性粒细胞浸润，于黏膜上皮表面可见多量幽门螺杆菌。治疗组：消滞胃宁高、中、低组：胃黏膜层变薄，固有腺体数量减少，间质有少量淋巴、嗜酸性粒细胞浸润，无明显坏死、表现为浅表性胃炎或接近正常组织，黏膜上皮表面有极少量幽门螺杆菌。         胃黏膜血流量 模型组较正常组gmbf明显减少，各治疗组均可高降低的gmbf，

17、消滞胃宁高、中、低剂量组优于阳性对照组。结果见表2。表2 对胃黏膜血流量的影响 （u，x±s，n=10）    注：与模型对照组比较，*p0.001，*p0.01    2.3 镇痛作用3     对小鼠冰醋酸扭体法的影响 取健康昆明种小鼠50只，体重1822g，雌雄各半，随机分为5组，连续灌胃3天，于末次给药30min后，每鼠腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只，记录注射冰醋酸15min内各鼠因疼痛产生扭体的次数，结果见表3。表3 对小鼠冰醋酸扭体法的影响 （n1

18、0）    注：与正常对照组比较，*p0.001，*p0.01         对小鼠热板法痛阈值的影响 取健康雌性昆明种小鼠50只，体重1822g，分组给药剂量见表2，连续灌胃3天，于末次给药30min后，将小鼠放于50的热板仪上，以小鼠“舔”后足作为“疼痛”的反应指标，观察记录小鼠从放置到热板上到小鼠因热痛而舔后足之间的时间（为热板痛反应时间），结果见表4。表4 对小鼠热板法痛阈值的影响 （n10）    注：与正常对照组比较，*p

19、0.05，*p0.1         对小鼠甩尾次数的影响 取健康昆明种小鼠50只，体重1822g，分组给药剂量见表3，连续灌胃3天，于末次给药30min后，将小鼠放于41的恒温水浴中，以小鼠从放入水浴至甩尾作为反应指标，观察并记录小鼠自放置到水浴中至甩尾所用的时间，结果见表5。表5 对小鼠甩尾次数的影响 （n10）    注：与正常对照组比较，*p0.01，*p0.1        2.4 抗炎

20、作用4         对二甲苯所致小鼠耳肿胀的 影响 取健康雄性昆明种小鼠50只，体重2224g，随机分为5组，按表4所示剂量灌胃给药，每日1次，连续3次，于末次给药后立即将小鼠右耳涂二甲苯30l致炎，于致炎后1.5h将小鼠处死，沿耳根剪下双耳，用7mm的打孔器打孔，将耳片在万分之一的天平上称重，用两耳片的差值表示肿胀度，结果见表6。 表6 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 （n10）    注：与正常对照组比较，*p0.001，*p0.01         对小鼠毛细血管渗透性的影响 上述各组小鼠给药30min后，每鼠立即尾静脉注入1%伊文思兰溶液0.1ml/10g，立即腹腔注入0.6%的冰醋酸溶液0.15ml/10g，30min后处死，将各鼠腹腔上皮打开，向腹腔注入7ml 0.9%的氯化钠溶液，充分在腹腔内混匀，用注射器将注入的腹腔溶液吸出，过滤，放入试管中，用751-gw分光光度计于590nm处测光密值，结果见表7。表7 对小鼠毛细血管渗透性的影响 （n10）    注：与正常对照组比较，*p0.001，*p0.01