符合GLP原则的家兔实验

1、符合GLP原则的家兔实验405第一节家兔的兽医学管理接收和检疫 一、家兔的购买与接收程序 (一)目的 为了保证实验动物家兔的质量，规范家兔购买与验收的操作规程。 (二)程序 1原则 (1)收集商业供货方的资料和信息，选择声誉好的供货方，声誉好的供货方通常会提供高质量的健康动物，确定的供货方必须经该机构IACUC批准，供货方应该提供国家科委颁发的动物生产许可证、动物合格证，最好能够提供购买种群动物近半年或1年来健康监测的数据以及该种群的正常值背景数据。此外，为保护正在进行的实验项目，有必要采取一切尽可能的防范措施，阻止不必要的病原菌在动物房间的传播。 (2)应当在实验前6周订购动物，一项研究用的

2、所有动物应来自一个供应商。 (3)动物技术员接到订货后，必须观察所有动物的异常行为和或疾病，如有发现问题通知区域管理者。 (4)SPF兔的商业供货方的选择，必须建立在其动物持续良好的健康状况和他们运输与服务的可靠性的基础之上。 2家兔到达时验收程序 (1)当动物到达的时候，要求由专门负责兔子的技术员或代理人来完成接收：对于短期、急性毒性试验研究的兔子，不要接受过多的预实验。用于长期研究的家兔按以下所述程序进行预实验，在实验设计中应该有详细的说明。 (2)观察兔的疾病临床体征：对每一只兔子都必须仔细检查各种损伤、疾病或畸形的迹象，动物表现出不健康时不能接收。应在将兔从运输时载用容器转移到兔笼的过

3、程中进行检查，检查验收应包括从头到尾的全面检查，包括如下：眼睛、耳朵、鼻子、嘴(牙齿、舌头、喉)、皮毛、足、爪、表面、损伤、重量、肛门。检查时，应注意兔常见疾病的任何迹象，比如鼻塞、耳朵溃疡、腹泻等。如果可能，被发现有疾病或畸形动物立即与其他动物隔离。隔离后，在采取进一步的措施之前，必须征求项目负责人的意见，如有必要，还要咨询兽医。如果发现患有严重疾病，应该处死动物。如果动物仅患有轻度疾病，可以常规处理治愈，处理措施应该由兽医来完成。最终决定接受还是拒绝某些动物，由项目负责人决定。项目负责人必须将决定意见写在动物接受记录单上。在记录单必须签名并注明日期，并在动物到达48h内拷贝一份交给站点服务

4、经理或其代理人。签名并注明日期的记录单原件应该作为项目原始数据归档。 (3)检查耳标并和供货方健康证明清单比较，以证实正确动物的接收。 (4)兔应做耳标，并单独饲养在提供新鲜水源和食物供其自由采食的卫生处理过的笼具内。 (5)每只兔的临床记录必须收集在一起。记录包括每只动物的到达日期，项目负责人姓名，动物身份识别号、性别、体重、描述和性情。 (6)每只兔的笼具卡号要系在笼具上。每个笼具卡片应包括到达日期，项目负责人姓名，动物身份识别号、来源、性别和描述。 (7)兔至少应保留48h(不包括交货日期)以使其适应设施环境。 (8)用于不存活手术操作的兔，可以免除48h环境适应期。 二、家兔的检疫程序

5、 (一)目的 叙述所有家兔的检疫和饲养程序。 (二)范围 该程序适用于所有使用家兔的设施动物技术人员和主要研究人员。 (三)程序 (1)家兔来自被IACUC批准并获得许可的供应商。 (2)兽医或兽医技术人员应该对所有新到达的动物称重、检查，并对动物的不严重问题和非感染性的问题进行治疗。动物到达时应该进行以下内容的体格检查(需要的物品有温度计、酒精、黑色的永久性记号笔)：测量体温(温度计应用于不同的动物前，应该使用酒精擦拭)。检查耳部是否有螨虫或损伤。检查耳部到后背的区域是否有螨虫、损伤、疤、头皮屑等。检查眼部是否有排泄物、是否清澈等。检查鼻子的排泄物，注意颜色、黏稠度等状况；由于鼻子潮湿还需要

6、检查手掌和手腕的湿度。触诊腹部，感受腹部是否有肿块，出现疼痛或有触痛等。用标记笔把动物的编号写在耳部。完成以上检查后，将动物的体温和体格检查结果记录在动物记录表上，在记录表的结尾处签名。 (3)不健康的动物将被退回，兽医将对发现的患病动物进行评价并决定立即对该动物进行治疗或处以安乐死。 (4)确定动物的标识编号。 (5)每日观察所有的家兔，对发现的所有异常情况进行评估。任何出现感染体征的家兔应该被实施安乐死，并由供应商提供相应的动物替代。 (6)用于急性研究的家兔应该进行3天的检疫；而用于慢性研究的家兔则应该进行7天的检疫。任何家兔如果在检疫期内出现疾病体征，应该被实施安乐死或退回供应商。 (

7、7)家兔只有在检疫期结束后才可以被用于试验。 (8)检疫期结束后，兽医人员将批准转运家兔到指定的饲养房间。 (9)如果一组家兔中的个别动物在检疫期内出现疾病体征，则根据兽医的判断，该组的全部动物可能需要进行一个额外的检疫期。 。 (10)使用过量的麻醉剂对动物进行安乐死(如戊巴比妥钠)。 (11)应该记录所有的操作程序。 (12)如果从未获批准的供应商或其他研究机构购入动物，则应该在订购动物前获得兽医服务部门主管人员的授权批准：来自未获批准的供应商或其他渠道的动物，可能需要特殊的检疫，隔离或被处以安乐死；与此相关的所有费用应该由研究者支付。 (13)设施和所有的周边动物设施内的家兔，将用目前正

8、在使用的球形饲料饲养，饲料的用量为每天100125g；这是标准化的饲养方法，不应该允许家兔自由摄食。所有家兔在送达时和检疫期内，将被给予精选的块状干草饲料。来自供应商的刚送到的家兔将经历以下的饲养程序，每天给予精选的块状干草饲料；最初的24h不给予球形的家兔饲料；第一天给25g；第二天给50g；第35天给100125g；哺乳期母兔给150175g；饲养人员应该每天清空剩余饲料后再添加新鲜饲料；注意：未咨询兽医之前，不应该添加额外量的饲料。 三、兔子的检疫及饲养相关程序 (一)目的 叙述确保家兔质量的程序。 (二)程序 1动物检疫程序 (1)检疫指将新到动物与现有饲养动物暂时隔离饲养，直至新进动

9、物的健康情形及微生物状况被确实评价而且合格为止。 (2)检疫需要根据不同品种动物、不同批次动物、不同来源动物、不同微生物层次动物，分开检疫，以避免相互交叉感染的机会。 (3)检疫期的长短，根据是否会对工作人员或现有饲养动物有潜在的危险性等，根据国内外参考数据及本室SOP决定。 (4)如果供货商能够提供最近的家兔健康报告，而且在运送途中没有感染病原菌的可能，则应该对该批动物去掉部分检疫程序，但是，还是需要隔离适应。 (5)对于所有需要进行检疫的大动物，必须在一周前与中心联系，并填写申请单及相关资料。 2实验家兔检疫项目 (1)分类标准。 A级实验兔：纯品系新西兰白色家兔，来自国内合格的动物中心及

10、实验室，没有球虫、巴斯德氏菌肺炎、耳疥虫或皮肤病等问题，适合进行慢性长期实验及分子免疫学等研究。此级别兔子可以直接进入饲养区独立房间饲养。B级实验兔：私人繁殖场繁殖的实验兔，饲养情况不明确，可能带有球虫、巴斯德氏菌肺炎、耳疥癣、严重咬合不良或皮肤病等问题。此类实验家兔必须经24周检疫处理，才可以用于慢性实验。 (2)检疫过程和方法。 如果动物由动物贩卖商送来，则尽量在商人尚未离开前的第一时间初步筛选动物，情况严重者，例如母兔怀孕、严重咬合不良和下痢等，直接退货。所有不同来源的实验兔，制作不同的疾病谱系，用来评价各单位动物中心以及养殖场的质量和等级。第一天，实验家兔到达，由研究人员或动物室工作人

11、员核对并签收，由兽医师及工作人员一同进行检查和纪录：a动物编号、称重、性别。确定接收家兔子需要在右耳加标识号码；b检查耳朵、眼睛、鼻子、口腔、皮毛、趾间；c剪指甲，检查粪便内寄生虫；d制作基本病历。A级家兔可直接进入动物饲养区饲养及适应。B级家兔，需要经过中心24周的检疫期，进行相关检验及观察，评价能否用于中长期实验。 四、家兔实验前程序分组及标识程序 (一)目的 叙述家兔试验前随机分组及标识的程序。 (二)程序 1随机分组 (1)动物到达后，将兔单独关在带有临时实验前编号的标签的笼内。 (2)如果动物到达时没有称重，实验前接受测试及进入研究后，要对所有的兔称重，并且计算全部家兔的平均体重。

12、(3)将兔按实验设计的分组方法随机分配到相应的剂量组。通常情况下，使各剂量组之间具有的动物平均体重非常接近。当用于分组的动物总数很小时，应该改变随机分组的形式。 (4)具体的分组方法，在实验设计中应有详细说明，分组后进行记录，任何改动完成后，也应该在实验日志中记录下来。 2动物的个体标识 (1)用于标记单个动物笼子的卡片-笼卡，根据剂量组不同用不同颜色编码。 (2)用于短期毒性研究的家兔，通常不进行个体标识。用实验前初始分组的被打印在彩色笼卡上编号来识别。 (3)对于长期研究，耳朵标识系统应该用于动物的个体识别的标记。耳朵标识的理想数字是动物的项目数。如果不可能，比如因为动物在送来之前，其耳朵

13、就已经编过号，必须记录标识上的数字与动物项目数字的关系。 3测试的初始剂量的基线 研究中，开始定量给药前，有必要建立几个参数的正常值。这些参数应该在实验设计中有详细的说明。这些参数取决于试验供试品应有的效应。收集尿液、粪便或血样用于标准临床化学检测是必要的。这些应该根据相关操作程序进行。定量给药开始前，基线观察也是必需的。这在己设定的实验设计中有详细说明。 4基线数据回顾 当进行基线试验或观察后，项目负责人必须对所有的数据进行回顾分析。如果某一动物的数据在正常范围之外，必须换一只动物，比如由于酶水平的持续异常。所有被新换来的动物，必须按换取它们的动物一样经过接受试验。在动物取代接受后，可能的检

14、疫期适应期的长度、基线试验、与或实际观察的测试要依据研究的时间计划而定。 五、临时放置和处死家兔用的动物房的操作程序 (一)目的 叙述处死家兔的操作程序。 (二)程序 1要求 (1)预定处死的动物必须从动物房内移出，在动物被处死时，现场没有其他活动物。 (2)短期研究用的兔，通常由动物房职员在与存放动物的房间隔离区域处死。尸检家兔则在邻近解剖室处死。 (3)后一种情况，后续程序必须联合解剖室成员来执行。通常是负责项目的领导或指定的代理人联络解剖室值班人员。 2操作程序 (1)在处死前一天，项目负责人主要研究人或代理人，必须填写与处死动物相关的动物派送单：要具体说明处死动物的编号、处死顺序，以及

15、与申请单相关的说明：填写人必须签上姓名与注明特别说明；如果没有特别说明，也必须有所提示；申请单必须签名与注明日期。 (2)项目负责人、主要研究人、或代理人，必须为每一只将被处死动物填写病历报告单。 (3)每一只动物被送到解剖室前，必须对他们进行称重，如实记录食物消耗，并在记录单与病理报告单上准确记录。 (4)在移入第一只动物前，项目负责人或指定代理人与解剖室负责人必须确定解剖室全体职员做好接收的准备工作。 (5)在己知情况下，技术员应该完成动物派送单上所列的第一只动物的相关临床体征单。该单上均应注明预定处死的动物，包括处死日期。 (6)在动物剖检前，技术员必须在负责动物派送单上的相关栏内填写动

16、物剖检的时间。项目负责人必须核查与病理报告单相关部分及签名。 (7)技术员可以安排关在运输笼内的兔及随附的病理报告单送往解剖室。 (8)必须在项目日志中记录家兔送到解剖室的时间。 (9)专门负责的技术员必须签名并注明动物派送单的日期，且归入项目日志作为原始数据存档。 (10)在解剖室，死后动物必须再次被称重，第二次重量记录在病理报告单中。 六、濒死的或已死亡家兔的处理程序 (一)目的 叙述濒死或已死亡家兔的操作程序。 (二)程序 1简介 (1)濒死动物的处死，首先要仁慈，其次要符合管理要求，第三，应保证在组织自溶前的组织学完整性。 (2)濒死或已死亡家兔通常被动物房的技术员在常规观察过程中首先

17、发现。 (3)如果动物濒死，其具体操作程序在下面的第二部分描述；对于死亡动物，其具体操作程序在下面的第三部分描述。 2濒死动物处理程序 (1)咨询相关项目负责人、主要研究人或代理人，确定动物是否是濒死状态。当持续观察时，动物不可能存活或动物持续处于痛苦之中、而且可能继续下去，在这些状况下，可以认为动物处于濒死状态，具体濒死判断标准参见相关SOP。 (2)如果动物不被认为处于濒死状态，应该在适当的临床记录单上记载观察日期、观察时间、研究的周数、剂量水平、组别、动物编号、性别以及动物临床体征的全部细节。 (3)如果动物被认为处于濒死状态，技术员必须为这濒死动物完成观察单、体重单以及项目日志。必须包

18、含如下信息：动物编号、性别、组别、动物的初始状态(被杀死的、濒死状态)、动物的处死时间与日期，送出动物房时动物的重量。 (4)任何人填写在记录单上的信息，必须经第二个人核对并签名。 (5)项目负责人、主要研究人或其代理人，应当填写病理报告单的相关部分并附在动物笼上。 (6)动物处死前，项目负责人、主要研究人或其代理人，必须通过接触相关的服务分支机构，核查实验设计中的研究计划是否可行。如果这种计划是可行的，项目负责人或其他人就可安排处死动物。所有对濒死动物进行的研究计划，或该计划证明为不能进行，都必须在实验日志中记录下来。 (7)在咨询了项目负责人或其他人后，参与该操作的高级动物技术员在解剖室值

19、班时，应该与病理技术员联系，并安排将动物与病理报告单送到解剖室。 3死亡动物的处理程序 (1)从笼中移出死亡动物，并核对所有个体识别信息，并把笼上的标签去掉，然后把兔与笼子标签装入一个聚乙烯袋内。 (2)技术员必须完成与动物相关的信息：观察单、体重单、实验日志。这些信息必须包括：动物编号、性别与分组；动物的初始状态(发现死于笼内)；发现死亡的日期与具体时间：从动物房舍运出时动物的重量。 (3)任何人填写在记录单上的信息，必须经第二个人核对并签名。 (4)项目负责人、主要研究人或其代理人，检查动物之后，应当填写病理报告单的相关部分。 (5)去掉笼子的标签，并把袋子密封。笼子的标签与病理报告单必须

20、用小纸条夹住附在袋子上。 (6)在咨询了项目负责人或其他人后，参与该操作的高级动物技术员在解剖室值班时，应该与病理技术员联系，并安排动物送到解剖室。 七、家兔安乐死的方法一戊巴比妥钠过量法 (一)目的 概述对试验动物进行安乐死的方法，介绍戊巴比妥使用过量的方法。对于通常使用的动物品系，将分别介绍各自适合的方法。 (二)政策 在试验中，通常对试验动物采用安乐死的方法。由于需要最大限度的考虑试验动物的福利，所以对于受试动物采用人道的方法进行安乐死极为重要。 (三)职责 只有事先获得兽医或研究者的同意，才能对动物进行安乐死。如果未能与研究者取得联系，兽医可以选出任何处于患病状态的动物进行安乐死。在这

21、样的情况下，按照研究者留下的说明，应对安乐死的动物进行取样，并适当保存或固定；如果没有说明，则应等到兽医的判断后再作处置。安乐死仅能由兽医或由兽医授权的专业人员进行。 (四)程序 (1)操作前固定动物肢体(由另一技师操作或使用毛巾)，推荐使用镇静剂。 (2)家兔的耳静脉内注射戊巴比妥120mgkg(戊巴比妥浓度为240mgkg，给药容积为23mL45kg)，如果需要也可以给予补充剂量。记录所有使用的药物。 (3)另外也可采用对麻醉动物进行心脏内注射戊巴比妥钠(2"3mL45kg)的方法。 八、兔类健康监控程序 (一)目的 本规程指定用于监测屏障系统的效能，以保护病原体不被引入兔群，本

22、标准操作规程旨在说明在兔群中亚临床病原体的监测程序。本SOP经动物管理和使用委员会(IACUC)和动物资源与培训的批准。 (二)材料 注射器和针头；采血管；排泄物采集容器。 (三)规程 1选择监测兔群 监测饲养在设施内46周以上的兔群。 2选择冢兔供采样 (1)在监测下的兔群中随机选择两只家兔。 (2)确保供采样的兔在8周龄以上，并且与样本群体共同饲养在46周以上。 (3)从所有病兔、实施安乐死的家兔或发现死亡的家兔中采集样本，这要在兽医人员指导下进行。 3选择方面 (1)每6个月提交每份样品和群体的全面的选择项目。 (2)说明：一份全面的选择项目包括以下测试：TY2、ECVN和TREP血清学

23、检测；粪便样本的寄生虫学检测。 4样品采集和提交 (1)对于综合全面，采集15mL的血液，分离血清并冷冻；通过干冰将冷冻血清样本送往试验室。至少采集5个粪球。将粪便样品送往诊断实验室。 (2)患病或死亡动物，如果可能，采集血液；将血清送往诊断室。提交组织和器官给病理学实验室。与兽医商议进一步指导关于患病和死亡家兔的样本提交。 (5)检测结果报告 (1)通过电子邮件及时向项目负责人和经理报告阳性结果和可疑结果。 (2)将结果报告给设施负责人。 (6)文件至少在文件中保持历史资料12个月。第二节家兔的饲养和管理程序 一、家兔饲养管理标准操作规程实例一 (一)目的 叙述家兔的饲养管理规程。 (二)程

24、序 1笼具要求 体重为54kg的兔饲养在地面空间至少为1524cm2，高度至少为356cm的笼具中。2笼具和饲养架更换饲养架必须每两周清洁一次：周末或假期必须使用笼具膳食；底盘必须每周轮换：底盘必须每天用清水冲洗；每天检查自动饮水系统阀门。 3饲料和饮水 必须供给兔标准实验室兔类饲料，除非管理人员或设施兽医人员有其他指示；平均每只兔饲喂180g饲料，青年兔可以让其自由采食，而老年的、肥胖的兔要根据兽医人员的指示供给少量；供给水源让其自由饮水。4环境优化干净的铝质饮料罐，PVC管和玩具必须每周在兔笼间轮换；玩具在被破坏时，必须移出并更换；没有破坏的玩具，在更换时随着笼具在笼具清洗机下清洗；每周供

25、给紫花苜蓿 5兔术后护理 (1)研究者必须提供一份手术记录和每只兔的手术操作详细描述。 (2)每份完整的手术记录必须放置在动物室中的动物卡片中。 (3)得到许可的兽医技术员必须检查术后兔，并执行术后日常护理或及时向兽医报告任何问题。 (4)得到许可的兽医技术员必须每天观察所有术后兔两次。 (5)得到许可的兽医技术员必须在兔笼上放置一个绿色术后标识。 (6)绿色术后标识上，必须在顶部注明手术日期，接着注明技术员进行术后检查的连续三天日期。 (7)三天后，将绿色标识翻转过来，注明术后护理活动的结论。 (8)标识作为一个标志留在笼具上，以便研究人员快速认出手术动物。 (9)动物管理技术员，每天必须按

26、照以下六条术后并发症的临床标志观察所有兔：兔不进食：兔不饮水；兔不排尿：兔不排便；兔出血；兔伤口开裂。 (10)动物管理技术员必须立即向管理者和或兽医技术员报告任何紧急状况。紧急状况包括：兔大量出血：兔倒卧在笼中；兔嘶叫。 (11)如果动物管理技术员怀疑情况紧急，应向管理人员提交报告，由管理人员确定。 二、家兔的管理标准操作规程实例二 (一)目的 (1)该程序确保动物健康状况良好，并排除自发性疾病的发展，这些自发性疾病可能影响研究的完整性以及研究结果。 (2)确保处理家兔的人员在操作过程中遵循了所有现行的管理法规、规定和指导原则。 (二)责任 (1)项目的所有人员协助兽医监督动物健康的各个方面

27、。 (2)设施负责人确保所有操作程序的实施。 (三)程序 1接收 (1)为每只动物准备一份独立的笼旁卡，包括以下信息：研究者姓名；队CUc批准号码：动物品系；性别，动物到达时的年龄；体重；到达日期；来源；动物编号。 (2)为每只动物准备一份独立的医疗记录，包括以下信息：动物接收单；动物发育记录表。 (3)检查包装箱是否出现损坏，以及运送内容是否正确。 (4)如果发现任何包装箱和运送内容的损坏，技术人员将通知设施负责人。 (5)设施负责人将通告项目助手有关包装箱的损坏情况，或者拒绝接收该货物，或拒绝与订购内容不符合的部分(比如要求的体重、年龄和数量等)。 (6)立即通知临床兽医有关动物转运过程中

28、出现的健康问题或死亡等情况。 (7)新到动物记录在房间日志本的饲料单上。 2体格检查 (1)接收动物后24h内，由兽医人员或动物管理人员对动物进行体格检查全面的健康评价。 (2)从饲养笼具中取出动物并进行检查，在动物接收单上记录检查结果，观察以下参数并记录：动物编号和或说明；体重；体温；心率或脉搏频率；呼吸频率；毛细血管充盈时间；指甲；牙齿；耳朵；眼睛；皮肤毛发状况；对大体状况的印象：实施过的治疗内容。 (3)每份动物发育记录表上都有体格检查各个项目的符号。 3抓取与固定 (1)从饲养笼具中取出动物：一只手用力抓住家兔的后颈部；另一只手则托住家兔的后腿和臀部。注意：如果不能正确托住家兔的后腿和

29、臀部可能引起操作者和家兔受伤。 (2)转运家兔：将家兔的头部放在手臂下区域；另一只手托住家兔的后腿和臀部并限制家兔的活动。 (3)把家兔放置在固定装置上，以利于操作或采集样本：转运过程中固定家兔；一只手用力抓住家兔的后颈部，以支撑家兔的上部：提起家兔时另一只手则托住家兔的后腿和臀部；将家兔的后腿和臀部轻放在固定装置上；将家兔的头部放入固定装置的保护位置。 (4)把家兔从固定装置上取下的操作程序与固定时相反。 (5)家兔放回饲养笼具的操作方法与取出时相同，但是程序相反(先将家兔的后腿和臀部放入笼具) 4饲料与饮水 (1)参见饲养与垫料SOP部分，注意：以下操作程序不适用于对饲料和饮水有特殊要求的

30、动物。特殊要求的饲料内容应该在队CuC实验方案中说明，并获得批准(比如饲料的类型、数量和形式等)。 (2)动物接收时的饲养 给所有家兔喂养干草或干草块状饲料和水5天，逐渐增加高纤维球状家兔饲料的喂养量，说明如下：第l天接收动物不给予高纤维饲料(仅给予干草和水)；第2天给高纤维饲料占饲料总量的14；第3天给高纤维饲料占饲料总量的l2；第4天给高纤维饲料占饲料总量的34；第5天给全部给予高纤维饲料：如果家兔咀嚼干草，则可以补充其他饲料，以尽量避免动物的体重下降。 (3)家兔适应期后的饲养：每天给予体重不到35k的家兔150g饲料；每天给予体重超过35蚝的家兔125g饲料；每周23次给予鸡足草、猫尾

31、草和青草等，这些草类不含有或仅含有少量苜蓿；获得主要研究者批准后，可以补充其他成分以强化营养；饲养人员应该每周清洁笼具一次。 (4)饮水：通过饮水瓶的方式给予家兔饮水；每日早晨倒掉饮水瓶中剩余的水，并加满新鲜的水，然后放回各自的笼具上；每日下午检查饮水瓶中的水量是否充足；每周清洁饮水瓶、吸管和瓶塞一次。 5健康监督 (1)每个饲养房间都有指定的动物管理人员。动物管理人员将在房间日志本中的房间状况表上记录每日的观察情况。 (2)监督频率：每个工作日，每天监督2次，分别在上午9：30前和下午时进行；周末和假期时，仍然每天监督2次，分别在动物管理人员到达时和完成值班工作时进行。 (3)观察结果和其他

32、信息等应该记录在房间状况表以及设施主管人员的动物健康和环境关系表上。 (4)执行日常观察与全面的健康监督，观察每只动物笼具以评价以下内容：饲料和饮水的消耗量。大小便的排泄情况。确保饮水的供应充足和吸管通畅。总体情况，如身体损伤、毛发状况和脾气等，注意：任何时候出现紧急情况时，都应该立即通知临床兽医。每周在动物发育记录上说明动物的总体情况。注意：欢快、机警、反应灵敏是合格的体征。兽医或动物管理人员每月对动物进行一次健康评价并将结果记录在月度健康评价，该表位于动物医疗记录中的动物发育记录。至少每6个月Fh兽医管理人员对动物进行一次体格检查，并将结果记录在体格检查中，该表位于动物医疗记录中的动物发育

33、记录里。动物健康与环境监督部分中报告与记录健康状况的特殊程序内容。 6更换笼具 (1)每周一、周三和周五更换底盘和衬垫。衬垫如果污染严重，应该每天更换。在房间状况表上记录更换底盘的操作。 (2)每周更换笼架和笼具，并在房间状况表上记录操作内容。更换笼架后，动物应保持原来的相对位置。 (3)每次操作只移动一只动物和动物的笼旁卡。 7房间值日 (1)完成更换笼具、饲料和饮水以及日常的健康监督工作后，应该进行以下内容的操作：最少应该进行以下的操作，额外的操作和操作频率则取决于设施主管人员的决定，在房间状况表上记录以下内容：房间的最高温度和最低温度以及湿度等；超过正常范围的测量值记录在房间状况表的健康

34、与环境关系一栏中，并将健康与环境关系表报告给设施的主管人员；饲料与饮水供应正常；已经执行笼具和设备的更换等；已经完成房间的清洁工作；重要的健康或环境关系；观察的时间与技术人员的签名。 在完成日常管理工作后：确定研究者的物品和垃圾没有遗留在房间里：核对并补充需要的物品，例如肥皂和纸巾等；使用戊二醛擦拭台面水槽；确定每只新接收的动物都在每日情况表上做了记录。 (2)每周一、周三、周五以及地面过多污迹时清扫与拖地板。 (3)每周进行一次房间清洁，包括以下内容：清洗拖布头；清洁强化营养的物品；使用戊二醛擦拭门和门框；计数房间内的动物数目。 (4)每2周进行一次的房间清洁，包括以下内容：清洗所有的房间清

35、洁设备，例如拖布、拖布桶、扫帚、饲料盘和簸箕等；检查清洁HVAC通风孔，必要时更换空气滤膜。 (5)每月进行一次的房间清洁，包括以下内容：确认动物房间中灯光定时器运行正常，并检查相关记录；必要时使用戊二醛清洗墙壁。 8实验兔护理及兔房管理 (1)每天观察动物健康状况并做记录，当有状况时，立即向兽医师反映。 (2)每周两次(星期一、四或星期二、五)：换底盘垫料、清洗饲料槽、清洗兔子自动给水系统、洗刷地板及拖干地面。 (3)每周两次：消毒药水洗刷地面、水槽、水沟等。 (4)每周一次：清洗出回风I：1，笼子内底网过脏时，在房间内直接换洗。 (5)每两周换脏笼子，每2"-4周换脏笼架。 (6

36、)动物进入动物房时，需要告知动物来源，同一来源的兔子集中在同一房间或同一笼架饲养。 9每日实验兔管理程序 (1)饮水：必须24h充分供应水，除非研究人员要求控制饮水：水瓶供水：每2-3天清洗水瓶并换干净的水。水瓶放到笼子上后，应该用手指测试管口有无堵塞，是否会漏水，则注意沉淀物及水瓶是否有阻塞，而且必须每日换洗水瓶。自动饮水系统：每次换垫料、底盘时，确证自动饮水头是否出水?是否漏水?必须观察兔子粪便、尿量是否减少?或有无驼背、毛发粗糙等现象，这是表示兔子喝不到水而产生脱水现象。如果饮水系统出现问题，应该立即向兽医师报告。 (2)饲料：除非特别注明，每只成年兔喂饲150180g兔饲料；饲料盒每周

37、清洗两次，不要使食物残渣堆积过久，以免造成动物疾病。有些兔子会使尿及大便混入饲料盒内，请注意每日观察。 (3)动物观察：如果有任何异常状况，请记录在临床检查表上。需要特别注意：无精打采、角膜炎、咳嗽、打喷嚏、下痢、血便、脱毛、牙齿过长、身体是否有脓疡、指甲过长、任何身体不适的临床体征等。 (4)确定每动物栏上的卡片记录完整而且清楚。 10动物房间的每日维持及其他注意事项 (1)每日的检查：确定房间所有系统及设备是安全且适当运转：灯光的控制，设定12明12暗，白天自早上6点到晚上6点，温度，设定在1822。 (2)每日保持所有地面干净和干燥，包括：墙面、定时器、任何突出部分、门和水槽等。 (3)

38、每日清除垃圾、补足房内常用物品，例如饲料、手套和抹布等。 (4)保持地面及排水管内无污物堆积。 (5)每次加饲料时，需要注意饲料是否潮湿或发霉。 (6)记录每包干饲料开封的日期，如果过期则全部丢弃。每次吃完饲料、开封新饲料前，需先清洗消毒饲料桶。 三、家兔实验前的管理程序 (一)目的 叙述家兔实验前的管理规程。 (二)程序 (1)家兔根据项目用途分为两类：短期、急性毒性试验的动物、长期研究用的动物，包括畸形学实验。 (2)在到达试验室后的48h内，所有的动物必须经过实验前接收测试，确定它们是否适合用于研究。这种测试范围根据提供的动物的研究类型来定。 (3)家兔接收后，所有兔在实验前必须完成检疫

39、期适应期。消除动物转运引起的应激反应，并可以使潜在的疾病表现出来。检疫期的长短取决于项目时间的长短。对于长期研究与畸形学实验，强制执行检疫最少7天，理想的是延长到两周的适应期。如果是短期研究，检疫期可以减少到4天。 (4)在检疫期，实验设计中详细说明的任何实验前检验也必须完成。 (5)这段时间的动物管理取决于如下三个因素：项目类型：接受测试的实验前结果；实验设计中关于实验前程序的要求。 (6)下面的管理细节并不随这三个因素而变化。 每批新动物必须放在隔离的检疫区，经过初始测试接收后，兔应该分别放在检疫笼内。笼子标签：a分组之前，将兔分配成临时实验前编号。编号按顺序分配，分配到一组编号时，先分雄

40、性，后分雌性；b被分配的兔的编号必须写于笼子的卡片上，卡片应放在位于食物槽前的固定器内；c在接收用于研究前，并没有对兔个别进行身份鉴定，所以笼子的标签可以用于其身份鉴定。 如果为一个特定项目，很多动物同时被提供，在实验开始前，总的分组可通过单个标签鉴别开来，这些标签固定在动物房或动物架的墙壁上。 (3)饮食，每只家兔应该被随意提供标准的颗粒饮食，食物槽必须每天检查，按需要加满。 (4)应当用自动供水系统供应水。 四、兔的常规饲养程序 (一)目的 叙述家兔的常规饲养管理程序。 ， (二)程序 1饲料要求 (1)除非给予的饲料在实验设计中有特别说明，否则，研究中所有家兔应该被随意提供标准的颗粒饲料

41、。 (2)食物必须放置在兔笼食槽内。如果需要，应该加满。 2饲养程序 (1)研究中，在每周的开始就该准备好一周的食物，保证所有动物都有充足的食物。每批食物的具体情况应该记入家兔房舍日志中，每批食物的标签应当注明日期并在实验日志中存档。 (2)开始时，每个食槽均应加满。 (3)应每天检查食槽中食物的水平。 (4)如果不需要测量食物的消耗水平，食槽应按要求加满。当动物进入研究末期或食槽积累了大量灰尘时，剩余物应该丢弃。 (5)如果需要测量食物的消耗水平，在加入新食物前，每天应称量剩余物的重量。 (6)当所有的食槽装满食物时，食物容器应当送至指定地点，盖好盖子。 (7)饲养人应该在家兔房舍日志上记录

42、添食时间、日期并签名，说明饲养完成。 五、兔的常规喂水程序 (一)目的 叙述家兔的常规喂水程序。 (二)程序 1要求 (1)除非给水的实验设计有特别说明，应该由设施供水系统给所有家兔随意供水。 (2)通常用自动给水系统通过每一笼的阀门供水。 (3)当实验设计中要求记录每只家兔的水消耗量时，自动供水系统则是无能为力。这种情况下，关掉自动供水系统，改用水瓶供水系统。 2自动供水系统(1)使用的供水系统，从控制水供给的蓄水池及与之连接的可任意调节的单向阀门输送管，直到每一只兔笼，可以自动供水。 (2)整个系统必须每天检查，确保蓄水池内水是满的、水管不漏、阀门没有损坏。阀门一旦损坏，按要求更换。 (3

43、)这个供水系统应按如下进度表每两月维修一次：关掉主要供水龙头：清空蓄水池内所有的水；用l(10n也消毒剂配lL水)被认可的温水配置的消毒剂冲洗蓄水池；拆开连接水管，浸泡于1消毒剂。这个阶段，如发现任何输水管道破损或污染严重，应当更换：在洁净水中冲洗蓄水池与水管至少23min；重装供水系统，并给蓄水池添水：给每一只兔笼放水，确保每只兔笼的阀门可以正常工作；进行每月维修的工作人员必须在实验日志记录维修情况，注明日期并签名。 六、清洁家兔笼具笼架的程序 (一)目的 叙述清洁家兔笼具笼架的程序。 (二)程序 (1)家兔笼的脏托盘最少每周清扫两次(如果有必要，还可增加清扫次数)，比如周一与周四，或周二与

44、周五。遇到法定假日时，这种值班表需要修改。 (2)每一个家兔笼有一个脏托盘，约在笼子底下76cm处，这个托盘用来接碎屑，比如草垫材料。 (3)在进行清扫操作时，下面的条目是必需的：一个空的手推车或相似的带轮子的容器、两把短柄铁铲，一些干碎屑。 (4)清扫时，把托盘从笼架跑步器上完全移开，把它的一端靠在手推车的边缘。用一手支撑托盘的另一端，用另一只手拿着短柄铁铲把托盘刮擦干净，污染物倒入手推车。 (5)用另一把铲子将干碎屑盖住空托盘，使之均匀散开整个托盘表面至1cm厚。如果托盘中污染物太多，必须换一个干净的托盘。新换上碎屑的托盘，可以放置于适当的笼子下。一次清扫架子，直到整个房间清扫干净。 (6

45、)带轮的容器装满污染的草垫物后，将它推出动物房，倒掉污物。 (7)笼体应当每月更换，如果有必要，可以换得更勤些。格子与托盘应2周更换一次，确保污物与潜在的感染源不能积累。 (8)笼顶与架子每两周应用1Teg0溶液或相似的消毒剂清洗一次。家兔有脱毛的习惯，因此毛皮与软毛在动物房干燥的环境中聚集。 (9)动物房的地板应该每天打扫，并用有高压软水管冲洗。按常规，应该每天当用1消毒剂清洁剂清洗，天花板与墙壁用相似的液体每周清洗一次。 (10)清扫房子与更换笼子的情况必须记录在动物房日志(日记本)上。第三节家兔的操作程序 一、家兔的操作程序 (一)目的 该操作程序用于描述家兔从它的笼内转移到另一地点，无

46、论什么时候，只能打开一只兔笼，而且只能放一只家兔出来，在第二只笼子打开之前，这只家兔必须返回其原来所在笼子，并关上门，避免混乱。 (二)处理程序 (1)检查兔笼的门是否关闭。 (2)用笼子上的个体识别卡，找出所需动物所在的笼子。 (3)打开兔笼门至足够宽度，以便容易抓到兔。 (4)抓住动物的颈背，举起一只手来，横过动物双肩，拇指与其余四指相对，牢牢抓住兔颈部松弛的皮肤。 (5)提起背抓住颈部的动物，在兔的下方滑动另一只手，用前臂支撑兔的体重，抓住后肢膝关节以上的部分。这样就可以把动物提出笼外。 (6)一旦兔离开了笼子，把它从握住颈部的状态，改为藏在相对的胳膊下。 (7)当动物被搬到执行手术操作

47、的任何桌面或板凳的过程中，动物颈背皮肤也许是轻度松弛的。 (8)把兔置于自由滑动的表面，例如软木或橡皮，保持着抓住齐颈背皮肤的状态。 (9)核对动物个体识别标记，看是否与兔笼卡片一致。 (10)完成手术操作后，要把兔送回原来的笼子，应与上述抓出动物的顺序调到过来，后退及臀部应最先放回笼内。 (11)关好笼门，进入下一只兔的操作。 二、家兔的给药方法程序 (一)目的 叙述家兔的给药程序。 、 (二)程序 1原则 (1)这个程序的供试品的给药需要有资质和经验丰富的技术员，必须经培训获得认可。 (2)给药时段内，应在每一天的同一时间定量给药，最好是上午。 (3)在开始定量给药前，必须检查时间计划与实

48、验设计，以确定每一剂量组家兔的编号方式，以及与定量给药任何非常规程序，比如尿液分析与血液取样。 (4)每一次给药时，定量给药组的顺序应该一致，除非试验记录中有特别的说明，一般应逐渐增加剂量的顺序给药，雄性先于雌性。也就是，雄性对照组、雌性对照组、雄性低剂量组、雌性低剂量组、雄性中剂量组等。 (5)如果动物将被称重与给药联合操作，在定量给药前应该先称重，应该准确记录体重于体重记录单中。 (6)一次只能从笼内取出一只家兔。给药后，应该将它送回原来的笼中，并关好门后，再打开第二笼。 2供试品 (1)所有的测试悬液或溶液必须每天配制，除非实验设计中有特别说明。 (2)配置液在准备好后，应尽快应用。有些

49、悬液在给药前，需要即刻重悬。这需要动物技术员与供试品配方设计师协作，以确保每一剂量组实验悬液是单独供给的。在一个剂量组给药完成与下一剂量组给药前的间隙，应提供下一剂量组所需悬液。可选择的是，溶液可以同时供给，然后用磁力搅拌器按需要重悬。 (3)在供试品收据上，容器标签必须完全核实。如果有任何不足，这一批供试品就应禁用，并与项目负责者与主要研究人协商。 (4)在剂量水平与要给的药物方面，标签也必须核实其与要给药动物笼子的标签、实验设计与时间计划的相关性。 (5)供试品必须按照相关SOP所述程序处理。 3口服给药程序 (1)兔的口服给药，常用灌胃法，即用一根导管把供试品溶液或悬液灌入胃内。 (2)

50、用于给药导管可以应用儿童喂饲管或导尿管。 (3)可获得的导管与套管有不同的规格，根据给药的动物大小选择。 (4)选择一个合适规格的导管，把它连在某一规格可处理的注射器上。 (5)吸入一定体积的试样到注射器，以便给第一只给药的家兔给药。握住注射器，活塞向下，排尽里面的空气，并轻打注射器针筒，这样注射器尖端空气聚集。排出空气及任何多余的进入供试品容器的溶液。 (6)右手抓住要给药的兔的颈背，左手抓住膝部，将它的躯体塞在右臂下，限制其活动，以便另一个人插胃管。 (7)左手围绕兔头，用右手食指卷曲兔唇，暴露上下牙齿之间的间隙。 (8)把导管的尖端插入兔的嘴里，从舌头上方或旁边插入均可。 (9)握住导管

51、的把手，进一步往里插。随时认真观察家兔的任何与呼吸窘迫相关的体征。一旦这些体征出现或感觉到导管通道阻塞，应立即拔出并重新插入。 (10)当导管插入食道约30cm时，慢慢用力推动注射器活塞，把内容物排入食道。 (11)轻柔地拔出导管，将已给药的兔送回笼内，进入下一只动物的操作。 (12)在每一组给药结束时，必须扔掉已使用过的注射器，换一只洁净的注射器，导管必须用蒸馏水冲洗干净。 (13)给药完毕后，必须对所有的兔做常规观察，对口服定量给药的兔，必须特别注意观察呼吸窘迫的体征。 (14)所有动物给药完毕，参与这一程序的所有技术员必须签名并注明日期。 4肠外给药程序 (1)除非在实验记录中特别说明或

52、实验操作程序的需要，肠胃外给药的所有路径，将使用合适规格可处理的而且配有最小的可操作的针头的注射器。 (2)在不同的给药组之间，必须更换洁净的注射器。 (3)一个针头不应用于超过5个以上的动物。如果有任何动物出现过分痛苦体征症状，这个数目还要减小。 (4)用过的针头与注射器必须扔在适当的废物容器中，确保得到安全处理。 (5)兔给药时，给药溶液或悬浊液应该足够，而且应一次吸入注射器。在再吸入给药以前，必须将注射器内空气排尽。 5皮下给药程序 (1)除非试验记录特别要求，所有的皮下注射应选择肩胛间的背部区域。通常吸入5mL液体，注射在该区域。 (2)注射液可以由一个人或两个人完成。 (3)当有两个

53、操作者时，一个人应该牢固又轻柔的抓住兔，同时用食指与拇指提起背侧皮肤形成折叠。另一个操作者应该于提起的皮肤处垂直地插入针头，插入的深度应该是针尖位于折叠的两侧相对皮肤之间。 (4)如果这项操作由一个人来完成，他必须一只手抓住兔的颈背来限制兔的活动，另一只手将针头插入抓住大鼠颈背时形成的折叠的皮肤。 (5)排出注射器内容物前，应该先将活塞往回拉，确保针头没有进入血管。如果回抽时有血出现，说明插入血管，这时应该拔除针头重新插入。 (6)如果注射器内没有血液，应该轻柔而有力地把内容物推出。 (7)拔出针头后，应当用棉签压住进针处，直到出血停止，才能把兔送回笼内。 (8)注射的位置应该明确记入项目日志，随后的注射应该避免注射同一部位。 6皮内给药程序 (1)除非实验设计有特别要求，所有的皮内注射应选择肩胛间的背部区域。通常吸入05mL液体注