生化反应培养基制备（课堂PPT）

1、1实验七实验七 生化反应培养基制备生化反应培养基制备2一、目的一、目的v1 1、掌握各类培养基的名称和成分；、掌握各类培养基的名称和成分；v2 2、掌握各类生化反应原理和结果；、掌握各类生化反应原理和结果；v3 3、掌握各类培养基制备程序及注意事项。、掌握各类培养基制备程序及注意事项。3二、内容二、内容v1 1、糖发酵培养基、糖发酵培养基 300ml300ml1 1组；组；v2 2、双糖铁培养基、双糖铁培养基 150ml150ml2 2组组+7+7组；组；v3 3、蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基150ml150ml3 3组；组；v4 4、葡萄糖蛋白胨水培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基150ml15

2、0ml4 4组、组、5 5组；组；v5 5、枸橼酸盐培养基、枸橼酸盐培养基 150ml150ml6 6组。组。4三、操作三、操作v1 1、称量、称量 一定要先注一层水在烧瓶底层，然一定要先注一层水在烧瓶底层，然后倒入粉剂药粉；后倒入粉剂药粉；v2 2、溶化、溶化 反复溶化到肉眼见不到较大颗粒为反复溶化到肉眼见不到较大颗粒为止；溶化前需标注水线，供溶化后补水；溶止；溶化前需标注水线，供溶化后补水；溶化时需要玻棒搅拌，注意不要使培养基溢出；化时需要玻棒搅拌，注意不要使培养基溢出；5v3 3、调节、调节pH pH 到到7.47.4，蛋白胨水，蛋白胨水pHpH调至调至7.27.2；v4 4、分装、分装

3、 每组每组2525支试管分装；糖发酵培养基支试管分装；糖发酵培养基和双糖铁培养基分装和双糖铁培养基分装2/52/5高度，其他的（葡萄高度，其他的（葡萄糖蛋白胨水、蛋白胨水、枸橼酸盐培养基）糖蛋白胨水、蛋白胨水、枸橼酸盐培养基）1/31/3高度；糖发酵管中小倒管一定要排空其中高度；糖发酵管中小倒管一定要排空其中气体；气体；6v5 5、高压灭菌、高压灭菌 含糖培养基（糖发酵、双含糖培养基（糖发酵、双糖铁、葡萄糖蛋白胨水培养基）糖铁、葡萄糖蛋白胨水培养基）10 10磅压磅压力灭菌，其他的（蛋白胨水、枸橼酸盐力灭菌，其他的（蛋白胨水、枸橼酸盐培养基）培养基）15 15磅压力灭菌；磅压力灭菌；v6 6、

4、摆斜面、冷却、放置冰箱保存、摆斜面、冷却、放置冰箱保存7四、结果记录四、结果记录v记录颜色、斜面、高层斜面、分析各生化实记录颜色、斜面、高层斜面、分析各生化实验选用什么培养基。验选用什么培养基。8五、课后小结五、课后小结v本次实验称量和灭菌温度非常重要，希望大本次实验称量和灭菌温度非常重要，希望大家多加注意。家多加注意。9附注：附注：v1 1、双糖铁培养基、双糖铁培养基 成分：蛋白胨成分：蛋白胨1g 1g、牛肉膏、牛肉膏3g3g、NaCl 5gNaCl 5g、乳糖、乳糖10g10g、葡萄糖、葡萄糖1g 1g、硫代硫酸钠、硫代硫酸钠0.2g0.2g、硫酸亚铁硫酸亚铁0.2g0.2g、琼脂、琼脂1

5、6g16g、蒸馏水、蒸馏水1000ml1000ml、0.40.4酚红酚红4 46d6d。v2 2、糖发酵培养基、糖发酵培养基 成分：蛋白胨水或肉膏汤成分：蛋白胨水或肉膏汤（pH7.4pH7.47.67.6）1000ml1000ml、所需糖、醇或苷类物、所需糖、醇或苷类物质质5 510g10g、1.61.6溴甲酚紫乙醇溶液溴甲酚紫乙醇溶液1ml1ml。10v3 3、蛋白胨水、蛋白胨水 成分：蛋白胨成分：蛋白胨20g20g、NaCl 5gNaCl 5g、蒸、蒸馏水馏水1000ml1000ml。v4 4、葡萄糖蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水 成分：蛋白胨成分：蛋白胨5g5g、葡萄糖、葡萄糖5g5g、K2HPO4 5gK2HPO4 5g、蒸馏水、蒸馏水1000ml1000ml。v5 5、枸橼酸盐培养基、枸橼酸盐培养基 成分：成分：NaCl 5gNaCl 5g、硫酸镁、硫酸镁0.2g0.2g、磷酸二氢胺、磷酸二氢胺1g 1g、枸橼酸钠、枸橼酸钠5g5