饲料厂化验室检测手册_百度文库

1、饲料厂化验室操作手册饲料中的水分测定1.原理:试样在 1052烘箱内, 在常压下烘干, 直至恒重, 逸失的重量为总 水分。2.测定步骤:洁净的称样皿,在 1052烘箱中烘 1h ,取出,在干燥器中冷却 30min ,称准至 0.0002g ,再烘干 30 min,同样冷却,称重,直至两次的重 量之差小于 0.0005g 为恒重。用已恒重的称样皿称取 2份平行试样,每份 2-5g (含水量 0.1g 以上, 样品厚度 4mm 一下 。准确至 0.0002g ,不盖称样皿盖,在 1052烘箱 中烘 3h (以温度达到 105开始计时 ,取出,盖好称样皿盖,在干燥器中 冷却 30min ,称重。在同

2、样烘干 1h ,冷却,称重,直至两次称重的重量差小于 0.002g. 烘干前的质量-烘干后的质量水分 = 100烘干前的质量粗蛋白的测定1. 原理:凯氏定氮法测定试样中的含氮量,即在催化剂的作用下用硫酸破坏 有机物,使含氮物转化成硫酸铵,加入强碱进行蒸馏,用硼酸吸收后, 再用盐酸滴定,测出含氮量,将结果乘以换算系数 6.25,算出粗蛋白的 含量。2. 测定步骤: . 消煮 :称取样品 0.5g , 准确放入凯氏烧瓶中, 加入 6.4g 催化剂, 15ml 硫酸,将凯氏烧瓶置于电炉上加热,开始小火,待样品焦化,泡沫消失后, 再加强火力 (360-410 , 直至呈透明的蓝绿色, 然后再继续加热,

3、 至少 2h. . 定容 :消煮后冷却,加 20ml 水至凯氏烧瓶中,摇匀,待消煮试样完 全冷却后转移至 100ml 容量瓶中,用蒸馏水冲洗数次,并一起转入到容量瓶 中,至刻度,摇匀,做为试样分解液。 . 蒸馏 : . 准备 :将蒸馏装置准备妥当以后, 先用蒸馏水洗涤, 移取分解液 10ml , 氢氧化钠(40% 10ml ,加入少量水,塞好入口玻璃塞,且在入口处加水密 封,防止露气,用蒸馏水冲洗冷凝管末端,在将装有 20ml 硼酸和 2滴甲基 红指示剂的锥形瓶放在冷凝管的末端。 . 滴定 :将蒸馏后的吸收液立即用盐酸标准溶液滴定,溶液由蓝绿色 变成灰红色为终点。(体积空白浓度0.0146.2

4、5粗蛋白 = 100试样质量0.014 与 1.00ml 盐酸标准溶液【 c(Hcl=1.000/ molL -1】相当的以 克表示的氮的质量6.25氮换算成蛋白质的平均系数3. 试剂配制:1. 混合催化剂:4g 硫酸铜 +60g无水硫酸钠2. 氢氧化钠:40g 氢氧化钠 +100ml水3. 硼酸: 1g硼酸 +50ml水4. 混合指示剂:甲基红 0.1%乙醇溶液,溴甲酚绿 0.5%乙醇溶液,两溶液等体积混合,在阴凉处保存 3个月5. 盐酸标准溶液配制:c(Hcl/ molL -1盐酸(ml 1 900.5 450.1 9_ 4. 盐酸标定方法:取在 270 300温度下干燥至恒重的基准无水碳

5、酸钠约 0.015g , 精 密称重,加水 50ml 使溶解,加甲基红溴甲酚绿混合指示剂 2滴,用盐酸 滴定至溶液由绿色转变为灰红色,在煮沸 2分钟,冷却至室温,继续滴 定至溶液变为灰红色。空白测定 :称蔗糖 0.5g ,代替试样,进行空白滴定,消耗 0.1 mol L -1盐酸标准溶 液的体积不得超过 0.2ml ,消耗 0.02 molL -1盐酸标准溶体积不得超过 0.3ml.无水硫酸钠的质量浓度 = (体积 -空白 0.052995. 蒸馏步骤检测:精确称取硫酸铵 0.2g , 代替试样进行消化蒸馏, 测得硫酸铵含量 21.19%0.2%,可知消煮过程和试剂配制是否正常。饲料中纯蛋白测

6、定1. 原理:硫酸铜在碱性溶液中,可将蛋白质沉淀,且不溶于热水,过滤和洗涤 后, 可将纯蛋白质含氮物分离, 再用凯氏定氮法测定沉淀中的蛋白质含量。 2. 试剂:(1硫酸铜溶液:10g 硫酸铜溶于 100ml 水中。(2氢氧化钠溶液:将 2.5g 氢氧化钠溶于 100ml 水中。(3氯化钡溶液:1g 氯化钡溶于 100ml 水中。(4 2 molL -1盐酸溶液。3. 测定步骤:准确称取 1g 左右试样,置于 200ml 烧杯中,加 50ml 水,加热至沸, 加入 20ml 硫酸铜溶液, 20ml 氢氧化钠溶液,用玻璃棒充分搅拌,放置 1h 以上,用倾斜过滤(定性滤纸 ,然后用 60-80热水洗

7、衣涤沉淀 5-6次, 用氯化钡溶液 5滴和盐酸溶液 1滴检查滤液, 直至不生成白色硫酸钡沉淀 为止。将沉淀和滤纸放在 65烘箱干燥 2h ,然后全部转移到凯氏烧瓶中。 消化后进行定氮测定。4. 结果计算同粗蛋白测定一样。快速测盐分(饲料级1. 盐分含量测定原理:溶液澄清,在酸性条件下,加入过量硝酸银溶液使样品溶液中的氯化物 形成氯化银沉淀,除去沉淀后,用硫氰酸铵回滴过量硝酸银,根据消耗硫酸 氰铵的量,计算出氯化物的含量。2. 试剂配制:Ango 3:称取硝酸银 3.4g ,用少量水溶解,定容至 1L ,储于棕色瓶中 3. 标定:称取在 550下恒温 1h 的基准氯化钠 0.02g , 加 50

8、ml 水, 加 5%铬酸钾指 示剂 1ml ,用待标定的硝酸银标准溶液滴定至砖红色为终点。200.02C = 体积4. 测定步骤:称取样品 2g 左右, 加 200ml 蒸馏水搅拌, 静止 20min , 吸取上清液 20ml 放入锥形瓶,加 50ml 蒸馏水,加 1ml 铬酸钾(10% ,用 Ango 3滴定成桔红 色。浓度体积2000.05845CL = 100样品质量20测食盐中 CL 的含量称 0.02g 样品,放入锥形瓶中,加 50ml 蒸馏水,加 1ml 铬酸钾(10% ,用 Ango 3滴定成桔红色。浓度体积0.05845CL = 100样品质量粗灰分、钙、磷连续测定(饲料级1.

9、 原理:试样在 550灼烧后所得残渣, 用质量百分率表示。 残渣只要是氧化物、 盐类等矿物质,也包括混入饲料中的沙石、土等,故称粗灰分。2. 步骤:将干净的坩埚方入高温炉,在 55020下灼烧 30min 。取出,在空气 中冷却约 1min ,放入干燥器冷却 30min ,称其重量,在已恒重的坩埚中 称取 2-5g 试料,准确至 0.0002g 。在电炉上小心碳化至无烟,在放入高 温炉,于 55020下灼烧 3h 。取出,在空气中冷却约 1min ,放入干燥 器中冷却 30min ,称取重量。灰化后的质量粗灰分 = 100%灰化前的质量钙 :在盛有灰分的坩埚中加入 10ml (1:3盐酸 ,

10、加 3滴硝酸,小心煮沸, 随即滤入 100ml 的容量瓶中,用蒸馏水洗涤坩埚和漏斗上的滤纸,定容至 100ml ,摇匀,取 10ml 分解液放入锥形瓶,加入 50ml 水, 1%煮沸冷却后的 淀粉溶液 10ml, 乙二胺 1ml ,三乙醇胺 2 ml,孔雀石绿 1滴, 20%氢氧化钠 10 ml,盐酸羟胺少许,钙指示剂少许,然后用 EDTA 滴定至蓝色。EDTA体积浓度Ca= 100样品质量试剂配制 :盐酸:1:3 1ml 盐酸溶于 3ml 蒸馏水中氢氧化钠:20% 20g 的氢氧化钠溶于 100ml 的蒸馏水中三乙醇胺: 1:1 1ml 三乙醇胺溶于 1ml 蒸馏水中乙二胺: 1:1 1ml

11、 乙二胺溶于 1ml 蒸馏水中孔雀石绿:0.001g 孔雀石绿溶于 1ml 蒸馏水中,既 0.1g 孔雀石绿溶于 100g 蒸馏水中钙黄指示剂:0.1g 钙黄绿素, 0.13g 甲基百里香酚蓝, 5g 氯化钾研细混 匀,储于磨砂口瓶中备用。 (钙红指示剂:1g 钙羟酸指示剂与 99g 氯化钠EDTA :0.02 molL -1称取 8g 乙二胺四乙酸二钠,放入烧杯中,加 200ml 蒸馏水,加热溶解,冷却后转入 1000ml 容量瓶中,用蒸馏水稀稀释至刻度。 标定 :钙标准溶液 0.001g molL -1准确称取在 105 110下烘干 3h ,干燥至恒重的基准碳酸钙 2.497g ,溶 于

12、 40ml (1:3盐酸中(沿烧杯壁慢慢加入 ,加热除去 Co 2, 冷却,转移到 1000ml 容量瓶中,稀释到刻度,标定方法同测定方法同样。0.0120(分解液吸取值EDTA 浓度 = EDTA的体积磷:取上述分解液 1ml , 放入 50ml 的容量瓶中, 加 10ml 钒钼酸铵显色剂, 定容至 50ml ,摇匀,放至 20分钟。用 10毫米比色池,在 420nm 波长下, 用分光光度计测定试样分解液的吸光度波长所对应得含磷量磷含量 = 质量100分解液移取量试剂配制:钒钼酸铵显色剂:称取偏钒酸铵 1.25g , 先加入量水, 使其差不多溶解,加硝酸 250ml ,另取钼酸铵 25g 加

13、蒸馏水 400ml 溶解,冷却后将此溶液倒入 上述溶液中,加水定容至 1000ml 。避光保存,入生成沉淀则不能使用。 磷标准溶液 :将磷酸二氢钾在 105烘箱中干燥 1小时,在干燥器中冷 却后称取 0.2195g ,定量转入 1000ml 容量瓶中,加硝酸 3ml ,用水稀释至刻 度,摇匀,即 50微克 /毫升的磷标准溶液。标准曲线绘制:饲料中粗脂肪的测定1. 原理:用装有乙醚的索氏脂肪提取器,提取试样中的脂肪,称脂肪包的重量, 提取的脂肪中除脂肪外还有有机酸,磷脂,脂溶性维生素,叶绿素等,因而 测定结果称为粗脂肪或乙醚提取物。2. 测定步骤:称试样 1-5g (准确至 0.0002g ,

14、于滤纸筒中, 或用滤纸包好, 放入 105 烘箱中, 烘干 120min , 滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度, 滤纸包长度应以 可全部浸泡于乙醚中为准,将滤纸筒或包放入抽提管,在抽提瓶中加无水乙 醚 60-100ml ,在 60-75的水浴上加热,使乙醚回流,控制乙醚回流次数约 每小时 10次,共回流约 50次(油脂高的约 70次或检查抽提管流出的乙 醚挥发后不留下油迹为抽提终点。 (约 3个小时取出试样,仍用原提取器回收乙醚,直至抽提瓶全部回收完,取下抽提 瓶,将回收的乙醚倒入乙醚瓶中保存。取出滤纸包,仍放回原称样皿,开盖在 1052烘箱中烘干 2h , (刚 放烘箱时将烘箱门打开,使滤纸包

15、中的乙醚挥发完以后在合上门,否者会有 危险 ,取出,放入干燥器中冷却,称重,在烘干 30min ,冷却称重,直至两 次误差小于 0.001g 为止。烘干后试样的重量-提取脂肪后试样的重量粗脂肪 = 100烘干前试样的重量大豆脲酶活性的测定(滴定法1. 选用范围:本法适用于大豆制品品及其副产品中脲酶活性的测定, 可确认大豆的温 热处理程度和抗胰蛋白酶等抗营养因子的水平。2. 定义:尿素酶活性指:在 300.5和 pH7的条件下,每分钟每克大豆制品分 解尿素所释放的氨态氮的毫克数。3. 原理:将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合,在 30保持 30min ,尿酶 催化尿素水解产生氨的反应。用过里

16、盐酸中和产生的氨,再用氢氧化钠标准 溶液回滴。4. 试剂 : 尿素缓冲溶液:准确称取 3.4g 经 110烘干的磷酸二氢钾和 4.45g磷酸氢二钠,用蒸馏水溶解后定容至 1000ml ,再将 30g 尿素溶解 在此缓冲液中,可保持一个月。 0.1 molL -1盐酸溶液:用量筒量取 8.4ml 浓盐酸(GB 622 ,注入 1000ml 容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度。 0.1mol L -1氢氧化钠(GB 629标准溶液 :按 GB 601的规定配制。 (5ml NaOH饱和溶液定容至 1L 5. 测定步骤:准确称取已粉碎的试样约 0.2g (精确至 0.0001g ,置于刻管中(如活 性很高

17、,只称 0.05g 。加入 10ml 尿素缓冲溶液,立即盖好试管并剧烈摇 动,马上置于(300.5恒温水浴中,准确计时保持 30min 。取下后立 即加入 10ml 0.1molL -1盐酸溶液 , 并迅速冷却至 20,将试管中内容物 无损地移入 50ml 烧杯中, 用 5ml 蒸馏水冲洗试管 2次, 立即用 0.1mol L -1的氢氧化钠标准溶液滴定至 pH 4.7,记录氢氧化钠标准溶液的消耗量。同 时做空白试验。尿素苯酚磺试剂法(脲酶活性1. 原理:在尿素苯酚磺指示剂存在的条件下, 以尿素转变成氨的多少及显色度 检测大豆饼中的脲酶的活性。2. 试剂与溶液: 0.2molL -1氢氧化钠溶

18、液:量取澄清的饱和氢氧化钠溶液 11.2ml ,置 于 1000ml 容量瓶中,用新沸过的冷水稀释至刻度,混匀即可。 0.1 mol L -1硫酸溶液:量取 5.6ml 浓硫酸,注入已加了少量蒸馏水的1000ml 容量瓶中,冷却稀释至刻度。 尿素苯酚磺指示剂:取 1.2g 苯酚红溶于 30ml 0.2 mol L -1氢氧化钠 溶液中, 用蒸馏水稀释至 300ml , 加入 90g 尿素, 溶解后再用水稀释至 2000ml , 加 70ml 0.1 molL -1硫酸溶液,稀释至 3000ml 。配好的溶液应呈琥珀色, 若溶液转变呈桔红色时,用再适量滴加 0.1 mol L -1硫酸溶液,调成

19、琥珀色。 试剂最好现配现用。3. 测定步骤:取粉碎的大豆粕少许,在表面皿上均匀的铺成薄层,用吸管吸取尿素 苯酚磺指示剂,浸湿表面皿上平铺的大豆粕,放置 5min ,观察显色结果。 4. 结果判定:无任何红点出现时,再放置 25min ,若仍无红点出现时,说明被检大豆 粕没有脲酶活性,是过熟的大豆粕。有少数红点,或表面有 25%-50%红点出现,表示含有微量脲酶,大豆粕 可以使用。若大豆粕表面 75%-100%被红点覆盖, 说明脲酶活性很强, 粕过生, 不能 直接使用。挥发性盐基氮(VBN 测定方法1、原理:利用弱碱性试剂氧化镁使试样中碱性含氮物质游离而被蒸馏出来, 用硼 酸吸收,再用标准酸滴定

20、,计算出含氮量。2、 试剂:1、 0.lmol /L 盐酸标准溶液(无水碳酸钠标定 :吸取分析纯盐酸 8.3mL ,用蒸馏水定容至 1000mL 。2、 0.01mol/L盐酸标准溶液:用 0.1mol/L盐酸标准溶液稀释获得。3、 2%硼酸溶液:分析纯硼酸 2g 溶于 100mL 水配成 2%溶液。4、混合指示剂:甲基红 0.1%乙醇溶液,溴甲酚绿 0.5%乙醇溶液,两溶液 等体积混合,阴凉处保存期三个月以内。5、 1%氧化镁溶液:化学纯氧化镁 1.0g 溶于 100mL 蒸馏水振接成混悬液。 3、测定:1、称取 15g 试样 (精确到 0.001g 于 250mL 具塞锥形瓶中,加蒸馏水1

21、00mL ,振荡摇匀 30min 后静置,上清液为样液。2、取 20mL2%的硼酸溶液于 150mL 锥形瓶中,加混合指示剂 2滴,使半 微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入此溶液。3、蒸馏装置的蒸汽发生器的水中应加甲基红指示剂数滴,硫酸数滴, 且保持此溶液为橙红色,否则补加硫酸。4、准确移取 10mL 样液注入蒸馏装置的反应室中,再加入 10mL 1%的氧 化镁溶液,用少量蒸馏水冲洗进样入口,将玻璃塞塞好,且在入口处加水 封好, 防止漏气, 蒸馏 10min , 使冷凝管末端离开吸收液面, 再蒸馏 1min , 用蒸馏水洗冷凝管末端,洗液均流入吸收液。5、吸收氨后的吸收液立即用 0.01mol/L盐

22、酸标准液滴定,溶液由蓝绿 色变为灰红色为终点,同时进行试剂空白测定。4、测定结果计算:(盐酸体积-空白浓度14挥发性盐基氮的含量=100 (质量分解液体液分解液总体积2、重复性:每个试样取两个平行样进行测定,以其算术平均值为结果。允许相对偏差为 5%油脂酸价测定取干燥的锥形瓶(带手套取 。称重记录,加入测样 2-3g ,称重记录,取 烧杯加入 50ml 醇醚, 5滴酚酞指示剂, Naoh 滴定空白体积变成粉紫色,把 滴定的醇醚倒入盛有测样的锥形瓶中, 摇匀, 再滴 5滴酚酞指示剂, 用 Naoh 滴定成粉红色,半分钟之内不变色。计算公式:浓度(体积空白56.11酸价 = 样品质量试剂配制:Na

23、oh 标准溶液 0.05mol/L配制方法 1:取 2g 氢氧化钠放入 1000ml 容量瓶中, 用新沸过的冷水定 容至 1000ml ,摇匀。方法 2:取饱和溶液 2.8ml ,用新沸过的冷水定容至 1000ml 标定:取在 105-110干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约 0.2g ,精密称重, 加新沸过的冷水 50ml ,摇匀,使其溶解,加酚酞指示剂 2滴,用本液滴定至 粉红色。邻苯二甲酸氢钾质量浓度 = -Naoh体积0.2042中性醇醚:2:1(2ml 乙醇 +1ml乙醚1%酚酞乙醇指示剂:1g 酚酞 +100ml乙醇油脂 TBA 值的测定方法1. 原理:油脂受到光、热、空气中氧等的作

24、用,发生酸败。分解出醛、酮之类的 化合物。丙二醛就是分解产物的一种,它能与 TBA (硫代巴比妥酸作用生 成粉红色化合物,在 532nm 波长处有吸收高峰,利用此性质即能测出丙二醛 含量,从而推导出油脂酸败的程度。2. 操作步骤:1、标准曲线的绘制准确吸取上述标准溶液 0.0、 0.1、 0.2、 0.3、 0.4、 0.5、 0.6ml 置于纳 氏比色管中,加水至总体积为 5ml ,加入 5ml TBA溶液,然后按样品测定步 骤进行,测得吸光度并绘制标准曲线。2、样品制备与检测准确称取均匀的豆油 15g ,置于 100ml 具塞三角瓶内,准确加入 25ml 三氯乙酸混合液,振摇半小时(保持油

25、脂融溶状态 ,用四层滤纸过滤,除 去油脂。准确移取上述滤液 10ml 置于 25ml 比色管内,准确加入 TBA 溶液 10ml , 混匀,加塞,置于 90水浴内保温 40min ,取出,冷却 1h ,移入小试管内, 离心 5min ,上清液倾入 25ml 纳氏比色管中,加入 5ml 氯仿,摇匀,静置, 分层, 吸出上清液于 532nm 波长处, 用 1-5cm 比色皿比色 (同时作空白试验 。 3. 试剂配制:1、 0.02mol/L TBA 水溶液:称取 TBA 0.288g 加热溶于水中, 并稀释至 100ml ;2、三氯乙酸混合液:称取三氯乙酸 7.5g 及 0.1gEDTA ,用水溶

26、解,稀释至100ml； 3、氯仿（分析纯） ； 4、丙二醛标准溶液：称取 0.315g 1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀释 至 1000ml，此溶液每 ml 相当于丙二醛 100 g，置于冰箱内保存。准确吸取 10ml，稀释至 100ml，此溶液每 ml 相当于丙二醛 10 g，备用。 丙二醛浓度混合液体积(滤液体积TBA 水溶液体积 丙二醛 = 油脂质量TBA 水溶液体积 油脂过氧化值测定方法 1.原理: 油脂氧化过程中产生过氧化物，与碘化钾作用，生成游离碘，以硫代 硫酸钠溶液滴定，计算过氧化值。 2.试剂和溶液: 1、饱和碘化钾溶液：称取 14g 碘化钾，加 10ml 水溶解，必要时

27、微热 使其溶解，冷却后贮于棕色瓶中； 2、三氯甲烷冰乙酸混合液：量取 40ml 三氯甲烷，加 60ml 冰乙酸， 混匀； 3、1%淀粉试剂：将淀粉 0.5g 用少许冷水调成糊状，倒入 50ml 沸水中 调匀，煮沸，临时用现配； 4、0.01mol/L 硫代硫酸钠标准溶液； （26g 硫代硫酸钠/16 无水硫代硫酸 钠溶于 1000ml 水中）0.1 molL -1 配制： 称取 2.6g 硫代硫酸钠/1.6 无水硫代硫酸钠于 1000ml 容量瓶中， 用适量新沸（煮沸 10 分钟）过的水溶解并稀释至 1000ml，摇匀，放置 2 周 以后备用。 硫代硫酸钠标定方法： 取适量基准重铬酸钾在 120烘箱中烘至恒重(3h，然后称取 0.15g， 精确至 0.0001g，置于碘量瓶中，溶于 25ml 煮沸并冷却的蒸馏水中，加 2g 碘化钾及 20%硫酸溶液 20ml，摇匀，于暗处放置 10min。加 15