补肾益骨方延缓老年雌性骨质疏松大鼠神经内分泌衰老的研究

1、补肾益骨方延缓老年雌性骨质疏松大鼠神经内分泌衰老的研究                         作者：黄明炜 陶连方 何小波 谢辉【摘要】 目的 探讨补肾益骨方对老年雌性大鼠抗衰老的作用机制。方法 选择有骨质疏松的老年雌性大鼠作为研究对象，分别用中药补肾益骨方和尼尔雌醇灌胃16 w，观察中药补肾益骨方对骨质疏松的治疗作用及抗衰老作用。采用TUNEL法

2、检测下丘脑弓状核神经元凋亡的情况，双能X线吸收技术(DEXA)检测骨密度，放射免疫法(RIA)检测血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平。结果 老年雌性骨质疏松大鼠血清FSH、LH升高，E2下降，骨密度下降，下丘脑弓状核神经元凋亡增加，中药补肾益骨方能提高骨质疏松大鼠的骨密度，能使FSH、LH水平下降，而血清E2水平升高不明显，下丘脑弓状核神经元凋亡减少。结论 补肾益骨方在治疗老年骨质疏松可以取得与雌激素替代治疗同样的治疗效果，在延缓衰老方面比雌激素替代治疗作用更显著，综合评价治疗效果，补肾益骨方优于雌激素替代治疗。 【关键词】 骨质疏松;衰老;补肾益骨方在衰老的过程

3、中，神经内分泌系统作用的各个环节均有改变，但下丘脑垂体的衰老是导致全身内分泌器官衰老的中心环节。下丘脑弓状核是重要的促垂体区。在下丘脑垂体性腺轴调节中起重要作用。弓状核神经元的老化同生殖系统的衰老有密切关系。中药对与增龄有关的老年骨质疏松有显著疗效，但对此治疗作用的研究，多数停留在研究其靶组织变化的阶段。对神经内分泌系统上位中枢研究的报道很少，本研究从下丘脑、垂体、卵巢和靶器官4个层面来研究补肾益骨方在延缓老年雌性骨质疏松大鼠衰老方面的作用。1 材料与方法1.1 材料1.2 方法w型双能X射吸收仪进行扫描，记录骨矿含量及骨密度。2000型图像分析仪(四川大学图像图形研究所生产)进行分析。

4、60;                            1.3 统计学处理 采用SPSS11.0软件处理数据，数据以x±s表示，组间比较及治疗前后均采用配对t检验。2 结 果2.1 各组大鼠骨矿含量及骨密度变化 见表1，老年空白组与青年对照组比较腰椎、右股骨的骨矿含量及骨密度显著降低(P<0.05)。补肾益

5、骨方组和雌二醇组治疗后骨矿含量及骨密度值明显升高，与老年空白组相比差异显著(P<0.05，P<0.01)，两种治疗方法比较，差异不显著(P>0.05)。在增加骨密度方面补肾益骨方与雌激素替代疗效相同。2.2 各组大鼠血清中性激素水平变化 见表2，老年空白组与青年对照组比较E2 水平显著下降，FSH、LH水平显升高(P<0.05);用补肾益骨方治疗后，与老年空白组比较E2水平升高差异产显著(P>0.05);FSH、LH水平显著下降(P<0.05);尼尔雌醇组治疗后与老年空白组比较E2水平升高，FSH、LH水平显著下降(P<0.05);比较两种方法治疗后三

6、种激素水平差异显著(P<0.05)。提示补肾益骨方和激素替代治疗在调节内分泌方面不同，补肾益骨方并不使E2水平上升，而使FSH、LH水平更接近青年对照组。2.3 各组大鼠下丘脑弓状核神经元凋亡率变化 老年空白组(52.3±3.6)%与青年对照组(28.1±2.3)%比较，下丘脑弓状核神经元凋亡率显著上升(P<0.05)。用补肾益骨方治疗后凋亡率(42.2±2.1)%明显下降(P<0.01)。用尼尔雌醇治疗后凋亡率(48.5±3.0)%下降显著(P<0.05)，两种方法比较差异显著(P<0.05)。补肾益骨方和雌激素替代均可降

7、低下丘脑弓状核神经元的凋亡率，延缓衰老过程，补肾益骨方的作用比雌激素替代更明显。表1 各组大鼠L1椎体与右股骨骨矿含量、骨密度变化与青年对照组比较：1)P<0.05;与老年空白组比较：2)P<0.05，3)P<0.01表2 各组大鼠血清中性激素水平变化1)与青年对照组比较，2)与老年空白组比较，3)与尼尔雌醇组比较：均P<0.053 讨 论弓状核是脑内含生物活性物质最多的核团之一，含有多种神经递质(如多巴胺、乙酰胆碱、阿片肽等)和激素(如促性腺激素释放激素)，几乎涉及到垂体前叶分泌的各种激素的调节。弓状核多巴胺(DA)神经元、促性腺激素释放激素(GnRH)神经元和氨基丁

8、酸(GABA)神经元等向正中隆起投射，调节垂体激素分泌13。有研究显示正常雌性大鼠弓状核神经元的超微结构随动情周期的改变而出现周期性变化，所以弓状核在下丘脑垂体性腺轴中起重要作用4，被认为是调节促性腺激素的基础中枢，同时又是性腺激素反馈作用的直接靶器官。本研究结果显示，老年骨质疏松雌鼠下丘脑弓状核神经元发生了衰老性改变。这种改变会影响神经元内各种神经递质的合成与分泌，从而导致弓状核对垂体前叶内分泌激素调节失衡5，进而引起各种与增龄有关的疾病，所以弓状核的衰老在老年骨质疏松的发病中起着重要的作用。中医学认为因衰老而发生的骨质疏松的病因病机主要是肾虚，下丘脑垂体性腺轴发生了紊乱，性激素水平下降，进

9、而可引起成骨功能下降，使单位体积内骨组织含量减少，发生骨质疏松。而某些补肾中药可抑制或纠正下丘脑垂体性腺轴功能减退或紊乱的发生，减缓衰老过程6。可见，肾虚与骨质关系十分密切，骨质疏松由肾虚引起，中医的“肾”是一个多功能的体系，它具有生殖、遗传、生长发育、神经系统、泌尿系统、免疫系统等方面的功能7。中药补肾益骨方就是基于这一理论，由淫羊藿、熟地、枸杞、骨碎补、肉苁蓉、补骨脂、杜仲、黄芪、当归、红花等中药组成,诸药相伍共奏补肾壮骨、益精填髓、活血通络、益气养阴、调整阴阳之功。从整体出发进行调节，调动内因。使各系统趋于平衡，作用于多靶点，调节神经内分泌免疫功能，全面改善症状。正如本实验显示，中药补肾

10、益骨方在治疗骨质疏松方面可以达到雌激素替代治疗同样的疗效，在调节内分泌方面与雌激素替代不同。并不使血清雌激素水平升高，而可使FSH、LH水平降低，从而可减少雌激素对子宫及乳腺的刺激，降低子宫内膜癌和乳腺癌的发生率。并且中药补肾益骨方在延缓下丘脑弓状核衰老方面优于雌激素替代，所以用中药补肾益骨方治疗该病是一种减少激素替代并发症、有效治疗绝经后骨质疏松的好方法。                     

11、;        【参考文献】 1 Backberg M,Collin M,Ovesjo ML,et al.Chemical coding of GABA(B)receptorimmunoreactive neurones in hypothalamic regions regulating body weightJ.Neuroendocrinol,2003;15(1)：114.2 Douglas AJ,Bicknell RJ,Leng G,et al.betaendorphin cells in the arcu

12、ate nucleus：projections to the supraoptic nucleus and changes in expression during pregnancy and parturitionJ.Neuroendocrinol，2002;14(10)：76877.3 Mong JA，Nunez JL,Mc Carthy MM.GABA mediates steroidinduced astrocyte diferentiation in the neonatal rat hypothalamusJ. Neuroendocrinol，2002;14(1):4555.4 G

13、erendai I,Kocsis K,Halasz B,Supraspinal connections of theovary：structural and functional aspectsJ.Microse Res Tech,2002;59(6):47483.5 Adrienne B,Matthew J,Phyllis M.The morphometry of astrocytes in the rostral preoptic area exhibits a diurnal rhythm on proestrus：relationship to the cuteinizing hormone surge and effec