鸡病化验与分析

1、鸡病化验与分析鸡病化验与分析主要内容主要内容 1 鸡病化验室化验内容鸡病化验室化验内容 2 诊断或化验结果的分析与应用诊断或化验结果的分析与应用 3 关于提高动保中心的功能关于提高动保中心的功能1鸡病化验室化验内容鸡病化验室化验内容 1.1 1.1 病理解剖及组织切片病理解剖及组织切片 1.2 1.2 病原学检查病原学检查 1.3 1.3 血清学检查血清学检查 1.4 1.4 药敏与药效试验药敏与药效试验 1.5 1.5 免疫试验或治疗性试验免疫试验或治疗性试验 1.6 1.6 复制病例复制病例 1.7 1.7 消毒剂消毒效果试验或含量检测消毒剂消毒效果试验或含量检测 1.8 1.8 如何确定

2、检查内容如何确定检查内容 1.9 1.9 检验方法的选择检验方法的选择鸡病化验室鸡病化验室病理学病理学流行病学、流行病学、临床表现临床表现病原学检查病原学检查血清学检查血清学检查相关试验或相关试验或检验检验诊断结果诊断结果控制措施控制措施 1.1 病理解剖及组织切片 病理学检查是鸡病诊断过程中最为重要的内容。病理学检查是鸡病诊断过程中最为重要的内容。 大体解剖大体解剖 采集病料做相关检验采集病料做相关检验 血样血样 病原检测用样品病原检测用样品 病理组织切片用样品病理组织切片用样品 病理组织切片病理组织切片 肿瘤病肿瘤病 一些产生包函体的病毒病（一些产生包函体的病毒病（IBH、ILT、FP）

3、其他，如曲霉菌病其他，如曲霉菌病 1.2 病原学检查1.2.1 显微镜直接检查病原显微镜直接检查病原 涂片或触片（球虫卵囊、梭菌、巴氏杆涂片或触片（球虫卵囊、梭菌、巴氏杆菌等）菌等）压片（霉菌）压片（霉菌）病理组织切片（组织滴虫，其他寄生虫）病理组织切片（组织滴虫，其他寄生虫） 1.2 1.2 病原学检查病原学检查1.2.2 病原分离鉴定病原分离鉴定 细菌分离培养与鉴定细菌分离培养与鉴定 培养基培养基 营养琼脂，选择性培养基营养琼脂，选择性培养基 鉴定鉴定 菌落特征，染色特性，生化特性，血清学反应，菌落特征，染色特性，生化特性，血清学反应，复制病例。复制病例。 病毒分离与鉴定病毒分离与鉴定（一

4、般化验室不允许）（一般化验室不允许） 培养基培养基 鸡胚鸡胚(SPF)，组织细胞，动物体，组织细胞，动物体鉴定鉴定 血清学反应，形态特征，特征性的病理变化，分血清学反应，形态特征，特征性的病理变化，分子生物学子生物学 1.2 病原学检查1.2.3 试剂盒快速检测病原试剂盒快速检测病原 胶体金胶体金（20-30分钟出结果，敏感性为分钟出结果，敏感性为10-100万万EID50） 新城疫（新城疫（ND） 禽流感（禽流感（AI），含），含A型（型（H1-H15）、）、H5亚型和亚型和H9亚型。亚型。 PCR ELISA 霉形体（霉形体（MG、MS） 白血病（白血病（ALV）胶体金 1.3 血清学检查

5、 定性检查定性检查 常用方法：常用方法： 琼脂扩散试验（琼脂扩散试验（AGP） 快速平板凝集试验（快速平板凝集试验（SPA） 酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（ELISA） 应用：应用： 免疫抗体监测免疫抗体监测 IBD-AGP、MG-AGP或或ELISA等等 了解病原感染情况或疾病诊断了解病原感染情况或疾病诊断 P/T-SPA、CAV-ELISA、IBH-AGP、REV-ELISA、 MG-SPA或或ELISA等等 注意检验结果中有假阳性或假阴性。注意检验结果中有假阳性或假阴性。 定量检查定量检查 常用方法：常用方法： 红细胞凝集抑制试验（红细胞凝集抑制试验（HI） 酶联免疫吸附试验（酶联

6、免疫吸附试验（ELISA） 应用：免疫抗体监测；疾病诊断应用：免疫抗体监测；疾病诊断 1.4 药敏与药效试验药敏与药效试验1.4.1 药敏试验药敏试验 由死、淘鸡分离到细菌后，常通过纸由死、淘鸡分离到细菌后，常通过纸片法选择敏感药物。片法选择敏感药物。1.4.2 药效试验药效试验 通常通过测定最小抑菌浓度（通常通过测定最小抑菌浓度（MIC）的方法来比较选择药物及检验药品的品质。的方法来比较选择药物及检验药品的品质。 1.5 免疫试验或治疗性试验选择疫苗选择疫苗营养性疾病营养性疾病细菌性疾病细菌性疾病 1.6 复制病例 初步确定疾病是否是具有传染性；初步确定疾病是否是具有传染性； 确认某些疾病确

7、认某些疾病 中毒中毒 营养性疾病营养性疾病 某些传染病某些传染病 1.7 消毒剂消毒效果检测或含量检测 消毒剂消毒剂MIC测定测定 模拟现场消毒试验模拟现场消毒试验 含量测定含量测定 火碱，福尔马林，氯制剂等。火碱，福尔马林，氯制剂等。1.8 如何确定检查内容 根据发病日龄、发病时间，临床表现，流行病学、大根据发病日龄、发病时间，临床表现，流行病学、大体病理变化初步诊断结果，采集合适的病料，选择检体病理变化初步诊断结果，采集合适的病料，选择检查内容。例如：查内容。例如： ND、AI 育雏期发病或发病初期检测病原，育成、育雏期发病或发病初期检测病原，育成、产蛋期或发病后产蛋期或发病后1-2周采血

8、检测抗体周采血检测抗体 球虫球虫 直接镜检（直接涂片或虫卵计数）直接镜检（直接涂片或虫卵计数） 细菌感染细菌感染 直接做细菌培养直接做细菌培养 肿瘤病肿瘤病 病理组织切片接合病理组织切片接合ELISA检测抗体或病原检测抗体或病原 尽可能采用最快速、经济、简便易行的方法进行检验。尽可能采用最快速、经济、简便易行的方法进行检验。 最常见的错误做法是发病初期采血化验。最常见的错误做法是发病初期采血化验。 1.9 检验方法的选择 优先选择国际或国家标准方法；优先选择国际或国家标准方法； 水样检验，按饮用水国标方法水样检验，按饮用水国标方法 ND-HI、AI-HI，OIE或国标方法或国标方法 饲料（沙门

9、氏菌、霉菌）国标方法饲料（沙门氏菌、霉菌）国标方法 检测试剂（盒）有规定方法的，按规定方法检验；检测试剂（盒）有规定方法的，按规定方法检验； 其他情况，参考有关标准制定检验规程其他情况，参考有关标准制定检验规程 病、死鸡的各种细菌分离病、死鸡的各种细菌分离 药敏试验或药效检验药敏试验或药效检验2 2 诊断或化验结果的分析与应用诊断或化验结果的分析与应用 2.1 2.1 环境监测环境监测 2.2 2.2 病料细菌检测病料细菌检测 2.3 2.3 药敏试验结果药敏试验结果 2.4 2.4 药效试验结果药效试验结果 2.5 2.5 病毒检测结果病毒检测结果 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清

10、或卵黄抗体检测结果2.1 环境检测 根据下面的标准判定是否合格。样品名称样品名称检验项目检验项目标准标准样品名称样品名称检验项目检验项目标准标准水样水样细菌总数细菌总数100100个个/ml/ml空气样品空气样品细菌总数细菌总数=30=30个个/ /平皿平皿总大肠菌群总大肠菌群MPN2MPN2霉菌霉菌=2=2个个/ /平皿平皿PHPH值值6.5-8.56.5-8.5大肠杆菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌不得检出不得检出饲料饲料/ /原料原料沙门氏菌沙门氏菌不得检出不得检出表面试子表面试子细菌总数细菌总数=30=30个个/ /平方平方厘米厘米霉菌霉菌饲料饲料,45000,45000个个/g

11、/g霉菌霉菌=2=2个个/ /平方平方厘米厘米细菌总数细菌总数鱼粉鱼粉,2,210106 6个个/g/g大肠杆菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌不得检出不得检出新垫料新垫料霉菌霉菌4500020mm，极敏，极敏 ！注意：监床口服！注意：监床口服给药，除了考虑细菌对给药，除了考虑细菌对药品的敏感性，还须考药品的敏感性，还须考虑药物是否经肠道吸收虑药物是否经肠道吸收及药品吸收后的分布、及药品吸收后的分布、代谢情况。代谢情况。2.4 2.4 药效试验结果药效试验结果 抗菌药物，抗菌药物，MIC值越小，值越小，药效越好；药效越好； 中药，除少数药品外中药，除少数药品外（如杨树花），应无抑（如杨树花

12、），应无抑菌活性或只有较低的体菌活性或只有较低的体外抑菌活性（如黄芩外抑菌活性（如黄芩苷）；苷）； 同一药品，如不同批次同一药品，如不同批次的药品的药品MIC有明显差异，有明显差异，说明其配方有改变。说明其配方有改变。 现场应使用现场应使用MIC100010001000100016 16 10001000 2.5 病毒检测结果 2.5.1 NDV 检测方法检测方法检测结果检测结果结果分析结果分析鸡胚分离鸡胚分离分离到弱毒分离到弱毒（MDT60h） 如弱毒苗免疫后两周内分离到弱毒，常为疫苗毒；如弱毒苗免疫后两周内分离到弱毒，常为疫苗毒；ND弱毒不是引起发病的主因。弱毒不是引起发病的主因。分离到强

13、毒分离到强毒（MDT60h 提示鸡群有提示鸡群有ND强毒感染，是否引起发病要考虑强毒感染，是否引起发病要考虑鸡群的鸡群的ND免疫水平及临床表现：免疫水平及临床表现： 1）育雏期死亡增加或产蛋期产蛋下降但死淘正）育雏期死亡增加或产蛋期产蛋下降但死淘正常，可能主要由常，可能主要由ND引起。引起。 2）免疫良好的育成期鸡群即使感染）免疫良好的育成期鸡群即使感染ND强毒也不强毒也不会引起严重的疾病。会引起严重的疾病。未分离到病毒未分离到病毒 抗体水平较高的育成鸡或产蛋鸡群，感染抗体水平较高的育成鸡或产蛋鸡群，感染ND强强毒后，排毒量少，排毒时间短，不易分离到病毒，毒后，排毒量少，排毒时间短，不易分离到

14、病毒，需要后续的血清抗体检测做进一步判定。需要后续的血清抗体检测做进一步判定。PCR方法方法阳性或阴性阳性或阴性 有典型临床表现时的阳性结果有一定诊断意义。有典型临床表现时的阳性结果有一定诊断意义。胶体金方胶体金方法法阳性或阴性阳性或阴性 雏鸡急性发病时检测结果阳性可诊断为雏鸡急性发病时检测结果阳性可诊断为ND。 2.5 病毒检测结果 2.5.2 H9亚型AIV检测方法检测方法检测结果检测结果结果分析结果分析鸡胚分离鸡胚分离阳性阳性 提示鸡群有提示鸡群有H9亚型亚型AIV感染，是否引起发病要考虑感染，是否引起发病要考虑鸡群的鸡群的H9亚型亚型AI免疫水平及临床表现：免疫水平及临床表现： 1）育

15、雏期死亡增加，同时有典型的）育雏期死亡增加，同时有典型的H9亚型亚型AI病变病变（气管出血，支气管栓塞，肺瘀血），主要由该病原（气管出血，支气管栓塞，肺瘀血），主要由该病原引起。引起。 2）无）无H9亚型亚型AI抗体的产蛋鸡群产蛋严重下降，可抗体的产蛋鸡群产蛋严重下降，可主要由该病原引起（须排除主要由该病原引起（须排除ND）。）。阴性阴性 抗体水平较高的鸡群，感染病毒后，排毒量少，排抗体水平较高的鸡群，感染病毒后，排毒量少，排毒时间短，不易分离到病毒，需要后续的血清抗体检毒时间短，不易分离到病毒，需要后续的血清抗体检测做进一步判定。测做进一步判定。PCR方法方法阳性或阴阳性或阴性性 有典型临床

16、表现时的阳性结果有一定诊断意义。有典型临床表现时的阳性结果有一定诊断意义。胶体金方胶体金方法法阳性或阴阳性或阴性性 雏鸡急性发病时检测结果阳性可诊断为雏鸡急性发病时检测结果阳性可诊断为AI H9，同，同时时ND和和AI H5结果阴性时可诊断为结果阴性时可诊断为AI H9。 2.5 病毒检测结果 2.5.3 H5亚型AIV检测方法检测方法检测结果检测结果结果分析结果分析鸡胚分离鸡胚分离阳性阳性 不同毒株病毒的毒力和抗原性差异很大，但任何不同毒株病毒的毒力和抗原性差异很大，但任何有临床发病的鸡群，病毒分离阳性都应首先考虑该有临床发病的鸡群，病毒分离阳性都应首先考虑该病。病。阴性阴性 抗体水平较高的

17、鸡群，感染病毒后，排毒量少，抗体水平较高的鸡群，感染病毒后，排毒量少，排毒时间短，不易分离到病毒，需要后续的血清抗排毒时间短，不易分离到病毒，需要后续的血清抗体检测做进一步判定。体检测做进一步判定。PCR方法方法阳性或阴阳性或阴性性 可疑病例阳性具有诊断意义。可疑病例阳性具有诊断意义。胶体金方法胶体金方法阳性或阴阳性或阴性性 可疑病例阳性具有诊断意义。可疑病例阳性具有诊断意义。2.5 病毒检测结果病毒检测结果 2.5.4 IBV 传染性支气管炎（传染性支气管炎（IB）的）的病毒分离鉴定工作较为复杂，病毒分离鉴定工作较为复杂，通常需要做下面一系列工作：通常需要做下面一系列工作： 鸡胚接种鸡胚接种

18、出现典型的出现典型的“侏儒胚侏儒胚”提示存在提示存在IBV 病例复制病例复制能复制出病能复制出病例证明分离物为主要病原例证明分离物为主要病原 疫苗免疫攻毒疫苗免疫攻毒某毒株某毒株的疫苗能提供保护除了可的疫苗能提供保护除了可证实分离物为证实分离物为IBV，同时，同时为现场选择最有效的疫苗为现场选择最有效的疫苗提供依据。提供依据。 2.5 病毒检测结果病毒检测结果2.5.4 IBV 不同毒株疫苗的免疫保护试验不同毒株疫苗的免疫保护试验 将将108只只1日龄的蛋雏鸡分成日龄的蛋雏鸡分成5组，每组组，每组21-22只，除只，除对照组外，其余对照组外，其余4组组3d时分别用时分别用H120+28/86、

19、肾型、肾型IB 2#（本室编号）、（本室编号）、Ma5及及IB 4-91疫苗点眼免疫，疫苗点眼免疫，免疫后免疫后5天天（8d）用）用分离毒分离毒经滴鼻点眼攻毒，剂量约经滴鼻点眼攻毒，剂量约105EID50/只只（感染尿囊液（感染尿囊液10倍稀释后，倍稀释后，0.1ml/只），攻毒后每天观察只），攻毒后每天观察并记录鸡只发病和死亡情况，共观察并记录鸡只发病和死亡情况，共观察14天，天，死亡死亡如下：如下： 2.5 2.5 病毒检测结果病毒检测结果 2.5.5 IBDV 通过采集有病变的法氏囊，处理后与通过采集有病变的法氏囊，处理后与IBD标准阳性标准阳性血清做琼指扩散试验，阳性说明法氏囊组织中含

20、大量病血清做琼指扩散试验，阳性说明法氏囊组织中含大量病毒，具有一定诊断意义。毒，具有一定诊断意义。 但需注意的是中等毒力或中等偏强毒力疫苗免疫后，但需注意的是中等毒力或中等偏强毒力疫苗免疫后，此法也可检出阳性。此法也可检出阳性。 2.5.6 MDV 该病很少通过病毒分离鉴定方法进行诊断，但取毛该病很少通过病毒分离鉴定方法进行诊断，但取毛囊浸出液与囊浸出液与MD标准阳性血清做琼指扩散试验，阳性结果标准阳性血清做琼指扩散试验，阳性结果具有诊断意义。具有诊断意义。 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.1 ND-HI抗体抗体 ND母源抗体下降基本规律（如图所示）母源抗

21、体下降基本规律（如图所示）1)一周约下降一周约下降2个滴度（蛋鸡个滴度（蛋鸡4-5天下降天下降1个滴度）个滴度）2）下降速度与以下因素有关：）下降速度与以下因素有关：-卵黄吸收情况卵黄吸收情况-生长速度生长速度-免疫或自然感染免疫或自然感染 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.1 ND-HI抗体抗体 雏鸡早期接种雏鸡早期接种ND疫苗后的抗体变化情况疫苗后的抗体变化情况 -接种疫苗越早，母源抗体对免疫应答的影响越大；接种疫苗越早，母源抗体对免疫应答的影响越大； -用灭活苗用灭活苗+弱毒活苗于弱毒活苗于7d或或7d后免疫，鸡群可获得后免疫，鸡群可获得较高的抗体水平。较高的

22、抗体水平。0123456716d20d24d28d33d37d3d,DN&IO;7d,DN&IO+NDK3d,DN&IO;9d,DN&IO+NDK3d,DN&IO;11d,DN&IO+NDK3d,DN&IO;13d,DN&IO+NDK3d,NDK;9d,DN&IO+NDK3d,NDK无2.6 血清或卵黄抗体检测结血清或卵黄抗体检测结果果 2.6.1 ND-HI抗体抗体 正常种鸡鸡群抗体变正常种鸡鸡群抗体变化情况化情况 8WNDK二免后，二免后，抗体水平上升至较高抗体水平上升至较高水平；水平； 具有较高抗体水平具有较高抗体水

23、平的鸡群，接种弱毒活的鸡群，接种弱毒活苗对抗体水平影响不苗对抗体水平影响不大，接种灭活苗后抗大，接种灭活苗后抗体可上升体可上升1-2个滴度；个滴度； 进入产蛋期后，鸡进入产蛋期后，鸡群抗体水平会下降群抗体水平会下降3个个滴度左右。滴度左右。 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.1 ND-HI抗体抗体 商品肉鸡抗体水平分析（商品肉鸡抗体水平分析（1）舍号舍号日龄日龄样品数样品数抗体分布抗体分布GMTGMT%CV0 01 12 23 34 45 56 67 78 81#34d2020 1 110103 36 6 3.703.7026%26%2#34d2020 2

24、2 4 412122 2 4.604.6023%23%3#34d1818 1 14 45 53 35 5 4.394.3929%29%4#34d2020 2 22 25 56 64 41 1 4.554.5530%30%免疫情况：免疫情况：1dAvinew+H1208dlasota+H1209dND+H914dIBD19d新支妥新支妥 分析：该鸡群总体抗体分析：该鸡群总体抗体水平尚可，但部分样品抗体水水平尚可，但部分样品抗体水平偏低，如感染野外强毒，可平偏低，如感染野外强毒，可引起引起10%10%左右的死亡率。左右的死亡率。2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.

25、1 ND-HI抗体抗体 商品肉鸡抗体水平分析（商品肉鸡抗体水平分析（2）舍舍号号日日龄龄项目项目抗体水平分布抗体水平分布数数量量0 01 12 23 34 45 56 67 78 89 910101111GMT 1#1#29d29dND-HIND-HI1919 3 33 37 72 24 45.055.052#2#29d29dND-HIND-HI2020 3 39 96 62 23.353.353#3#29d29dND-HIND-HI1919 3 36 64 44 42 23.793.794#4#29d29dND-HIND-HI1919 11112 26 65.165.165#5#29d29d

26、ND-HIND-HI2020 4 44 45 56 61 16.256.256#6#29d29dND-HIND-HI2020 3 33 36 61 12 24 41 14.904.901#1#34d34dND-HIND-HI1818 1 14 46 64 42 21 13.283.282#2#34d34dND-HIND-HI1919 1 12 27 72 22 25 55.165.163#3#34d34dND-HIND-HI2020 2 21 14 45 58 83.803.804#4#34d34dND-HIND-HI2020 4 42 22 26 62 23 31 13.453.455#5#

27、34d34dND-HIND-HI2020 5 59 95 51 15.105.106#6#34d34dND-HIND-HI2020 2 23 37 74 41 13 33.603.60 问题：以上是同一鸡群问题：以上是同一鸡群2929和和3434日龄的抗体检测结果，该鸡群是否有日龄的抗体检测结果，该鸡群是否有NDND野外野外强毒感染？强毒感染？ 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.1 ND-HI抗体抗体 商品肉鸡抗体水平分析（商品肉鸡抗体水平分析（3）舍号舍号TestTest抗体水平分布抗体水平分布GMTGMT%CV%CV日龄日龄NrNr0 0 1 1 2 2

28、3 34 45 56 67 78 89 91010111112121#1#30d30dND-HIND-HI1919 1 15 54 42 24 43 39.69.618%18%2#2#30d30dND-HIND-HI1919 2 23 37 72 21 12 21 11 15.75.739%39%3#3#30d30dND-HIND-HI2020 7 79 91 11 12 24.14.131%31%4#4#30d30dND-HIND-HI2020 1 12 21 19 91 16 610.510.514%14%发生发生ND的典型抗体水平：的典型抗体水平： 1）先感染的鸡舍抗体水平整体异升高；）

29、先感染的鸡舍抗体水平整体异升高； 2）感染中期的鸡舍抗体离散度大，部分鸡只抗体已异常升高；）感染中期的鸡舍抗体离散度大，部分鸡只抗体已异常升高； 3）采样时尚有鸡舍抗体水平正常。）采样时尚有鸡舍抗体水平正常。 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.1 ND-HI抗体抗体 育成期发生育成期发生ND的典型抗体水平的典型抗体水平抗体水平分布抗体水平分布舍号舍号周龄周龄TestTestNrNr- -4 45 56 67 78 89 910101111121213131414GMTGMTH1H18W8WND-HIND-HI23232 28 811112 212.5712.

30、57H2H28W8WND-HIND-HI24243 317173 31 112.0812.08H3H38W8WND-HIND-HI24241 13 313133 34 4 7.257.25H4H48W8WND-HIND-HI24241 13 37 78 84 41 1 7.547.54H5H58W8WND-HIND-HI24242 26 65 58 83 3 7.177.17H6H68W8WND-HIND-HI15151 15 57 71 11 1 6.736.73H7H78W8WND-HIND-HI24242 27 76 65 53 31 1 7.137.13H8H88W8WND-HIND-

31、HI23233 31 114144 41 1 6.966.96 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.1 ND-HI抗体抗体 产蛋期发生非典型产蛋期发生非典型ND的抗体水平的抗体水平抗体水平分布抗体水平分布舍号舍号周龄周龄TestTestNrNr-9 91010111112121313141415151616GMTGMTH1H130W30WND-HIND-HI24241 15 55 511112 211.3311.33H2H230W30WND-HIND-HI27274 410109 94 411.4811.48H3H330W30WND-HIND-HI24241

32、12 214146 61 111.1711.17H4H430W30WND-HIND-HI24243 311118 82 211.3811.38H5H530W30WND-HIND-HI24242 29 97 72 21 13 313.0013.00H6H630W30WND-HIND-HI24243 32 213136 611.9211.92H7H730W30WND-HIND-HI24248 86 66 63 31 111.2911.29H8H830W30WND-HIND-HI24242 29 910103 311.5811.58 尽管鸡群已有很高的抗体水平，感染野外强毒后抗体水平仍然明尽管鸡群已

33、有很高的抗体水平，感染野外强毒后抗体水平仍然明显上升（鸡群同时有产蛋下降）。显上升（鸡群同时有产蛋下降）。2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.1 ND-HI抗体抗体 鸡群感染鸡群感染ND野外强毒后抗体水平变化特点：野外强毒后抗体水平变化特点： 1）感染后）感染后10-14天抗体水平异常升高，抗体上升的天抗体水平异常升高，抗体上升的幅度与感染前的抗体水平幅度与感染前的抗体水平“成反比成反比”； 2）感染后初期抗体水平离散度较大，但很快整体）感染后初期抗体水平离散度较大，但很快整体上升至较高水平；上升至较高水平； 3）有多个鸡舍的鸡场，感染往往先由）有多个鸡舍的鸡

34、场，感染往往先由1-2个鸡舍开个鸡舍开始，逐渐传播到其他鸡舍。始，逐渐传播到其他鸡舍。 注意：抗体水平较低的鸡群，免疫灭活疫苗后，注意：抗体水平较低的鸡群，免疫灭活疫苗后，在抗体上升期（在抗体上升期（10-20天），抗体水平离散度往往天），抗体水平离散度往往较大，易误判为野毒感染。较大，易误判为野毒感染。2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.2 AI H9-HI抗体抗体 AI H9-HI抗体变化规律与抗体变化规律与ND抗体变化相似，包括：抗体变化相似，包括： 1）首免受母源抗体干扰，首免后抗体水平往往上升）首免受母源抗体干扰，首免后抗体水平往往上升不理想，抗体离散度大；

35、二免、甚至三免后鸡群方可获得不理想，抗体离散度大；二免、甚至三免后鸡群方可获得理想的抗体水平。理想的抗体水平。 2）感染野毒后，鸡群抗体水平会异常升高。）感染野毒后，鸡群抗体水平会异常升高。 同时同时AI H9-HI抗体与抗体与ND抗体变化也有不同，包括：抗体变化也有不同，包括： 1）AI H9只有灭活苗可用，首免后抗体离散度更大；只有灭活苗可用，首免后抗体离散度更大； 2）不同毒株）不同毒株H9亚型亚型AI的抗原性有较大差异，当使用与的抗原性有较大差异，当使用与疫苗抗原性差异较大的毒株检测抗体时，检测到的抗体水疫苗抗原性差异较大的毒株检测抗体时，检测到的抗体水平往往较低。平往往较低。 3）与

36、）与ND强毒相比，强毒相比，AI H9病毒毒力相对较弱，免疫鸡病毒毒力相对较弱，免疫鸡群自然感染野毒后，抗体水平上升幅度相对较小。群自然感染野毒后，抗体水平上升幅度相对较小。2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.2 AI H9-HI抗体抗体 不同抗原检测抗体的差异不同抗原检测抗体的差异 样品编号样品编号1 12 23 34 45 56 67 78 8GMTGMT抗原抗原1 110107 79 99910999.0 9.0 抗原抗原2 211119 912121111101012121111121211.0 11.0 相同的样品，用不同的抗原检测，抗体水平相差相同的样品，

37、用不同的抗原检测，抗体水平相差2个滴度。因此：个滴度。因此： 1）化验室监测免疫抗体时，要使用与疫苗毒株相匹配的抗原，才）化验室监测免疫抗体时，要使用与疫苗毒株相匹配的抗原，才能真实反映出免疫效果，也可使用与当地流行毒株相近抗原，这样更能能真实反映出免疫效果，也可使用与当地流行毒株相近抗原，这样更能代表疫苗免疫后的保护力；代表疫苗免疫后的保护力； 2）当使用不同厂家或不同批次的抗原时，需要与原来的抗原比对）当使用不同厂家或不同批次的抗原时，需要与原来的抗原比对试验，并将比对试验结果附于报告中。试验，并将比对试验结果附于报告中。2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.2 A

38、I H9-HI抗体抗体 种鸡群抗体走势种鸡群抗体走势AI H9 免疫：免疫： 10d ND+IB+H9 8W ND+IB+H9 17W ND+IB+H9 23W H9 32W ND+IB+H9首免后抗体水平很低。首免后抗体水平很低。 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.3 AI H5-HI抗体抗体 鸡群做鸡群做AI H5灭活苗免疫后，灭活苗免疫后，HI抗体变化规律与抗体变化规律与AI H9基本相基本相同，但抗体水平相对较低，解读同，但抗体水平相对较低，解读AI H5抗体水平要注意以下抗体水平要注意以下几点：几点： 抗原与疫苗相匹配，即抗原与疫苗相匹配，即AI

39、H5 Re-4疫苗免疫后用疫苗免疫后用AI H5 Re-4株抗原检测；株抗原检测； AI H5 Re-5疫苗免疫后用疫苗免疫后用AI H5 Re-5抗原检测。抗原检测。 由于由于H5亚型亚型AI毒株变异很快，不同地区、不同时间，甚毒株变异很快，不同地区、不同时间，甚至同一地区同一时期流行的毒株都会有差异，当流行毒至同一地区同一时期流行的毒株都会有差异，当流行毒株抗原性变异较大时，免疫鸡群即使感染野毒，用现有株抗原性变异较大时，免疫鸡群即使感染野毒，用现有抗原也可能检测不到抗体的变化，或者抗体变化不明显，抗原也可能检测不到抗体的变化，或者抗体变化不明显，此时，要接合临床表现做相应的病原学检测，方

40、可准确此时，要接合临床表现做相应的病原学检测，方可准确诊断疾病。诊断疾病。 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.3 AI H5-HI抗体抗体 种鸡禽种鸡禽H5 RE-4抗体走势抗体走势 AI H5 Re-4+Re-5免疫时间：免疫时间：15-16d； 6W 13W； 21W 25W； 32W首免后抗体水平很低。首免后抗体水平很低。 2.6 血清或卵黄抗体检测结果 2.6.3 AI H5-HI抗体抗体 种鸡禽种鸡禽H5 RE-5抗体走势抗体走势 AI H5 Re-4+Re-5免疫时间：免疫时间：15-16d； 6W 13W； 21W 25W； 32W首免后抗体水

41、平很低。首免后抗体水平很低。 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.4 IB-ELISA抗体抗体 ELISA抗体检测结果解读，主要参考试剂盒厂抗体检测结果解读，主要参考试剂盒厂/商商提供的数据，同时化验室要根据本地鸡群的免疫、提供的数据，同时化验室要根据本地鸡群的免疫、感染情况积累一些基础数据。感染情况积累一些基础数据。IDEXX的的IB ELISA主要参数如下：主要参数如下：IB活苗免疫后活苗免疫后3-5W，抗体效价为，抗体效价为1000-4000;IB灭活苗免疫后灭活苗免疫后5-8W，抗体效价为，抗体效价为5000-16000。 如抗体效价高于此范围，则说明

42、有与疫苗如抗体效价高于此范围，则说明有与疫苗毒抗原性差异较大的野毒感染。毒抗原性差异较大的野毒感染。SYB-XG Z-6# - IBVCountTiter G roups0123450123456789 10 11 12 13 14 15 16 17 18 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.4 IB-ELISA抗体抗体 商品肉鸡发生商品肉鸡发生IB后的抗体水平后的抗体水平2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.5 MG SPA或或ELISA抗体抗体 MG 快速平板凝集试验（快速平板凝集试验（SPA） 简单易行；简单易行； 检测结

43、果受抗原质量的影响很大检测结果受抗原质量的影响很大检测抗原不同，检测抗原不同，结果就不同；结果就不同； 多种因素可导致出现假阳性；多种因素可导致出现假阳性； 现在公认可用的抗原为原英特威公司的现在公认可用的抗原为原英特威公司的MG平板凝集抗平板凝集抗原。原。 MG ELISA抗体，主要参考试验盒厂商提供的数据进行解抗体，主要参考试验盒厂商提供的数据进行解读。读。IDEXX的试剂盒判读如下：的试剂盒判读如下：弱毒苗免疫后的弱毒苗免疫后的3-63-6周，滴度多数在周，滴度多数在group1group1。如果阳转。如果阳转率高于率高于80%80%，则免疫是相对成功的；如果阳转率在，则免疫是相对成功的

44、；如果阳转率在30-30-40%40%，则推荐加强免疫。如果抗体的滴度在，则推荐加强免疫。如果抗体的滴度在group2-3group2-3，则预示着此免疫鸡群已存在野毒的感染。则预示着此免疫鸡群已存在野毒的感染。两次灭活苗免疫后两次灭活苗免疫后3-43-4周检测，抗体滴度在周检测，抗体滴度在group2-3group2-3（from 2,0004,000 titerfrom 2,0004,000 titer）左右。）左右。FlockChek Mycoplasma gallisepticum Antibody Test Kit 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6

45、.5 MG SPA或或ELISA抗体抗体 免疫非感染鸡群的免疫非感染鸡群的MG-ELISA抗体水平抗体水平FlockChek Mycoplasma gallisepticum Antibody Test KitFlockChek Mycoplasma gallisepticum Antibody Test Kit histogram in chronic infected population 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.5 MG SPA或或ELISA抗体抗体 持续感染鸡群的持续感染鸡群的MG-ELISA抗体水平抗体水平 2.6 2.6 血清或卵黄抗体

46、检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.8 P/T-SPA（鸡白痢（鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌快速平鸡伤寒沙门氏菌快速平板凝集）抗体板凝集）抗体可出现假阳性的情况：可出现假阳性的情况： -油苗免疫后；油苗免疫后； -血清有污染；血清有污染； -冻存过或贮存时间过长的血清；冻存过或贮存时间过长的血清； -其他细菌感染等。其他细菌感染等。注意：其他注意：其他D群沙门氏菌（如肠炎群沙门氏菌（如肠炎沙门氏菌、都柏林沙门氏菌感染后，沙门氏菌、都柏林沙门氏菌感染后，因其有相同的菌体抗原，也会出现因其有相同的菌体抗原，也会出现阳性反应。阳性反应。 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2

47、.6.6 CAV-ELISA抗体抗体 种鸡通常在种鸡通常在12-14区期做区期做CAV-ELISA抗体检抗体检测，一般会出现以三种结果：测，一般会出现以三种结果： 全部阴性全部阴性鸡群无野毒感染，需要在鸡群无野毒感染，需要在18W之前做免疫之前做免疫或人工感染；或人工感染； 部分阳性部分阳性鸡群正处于感染期，鸡群无须免疫；鸡群正处于感染期，鸡群无须免疫； 全部阳性全部阳性鸡群已全部感染野毒，鸡群无须免疫。鸡群已全部感染野毒，鸡群无须免疫。PS4-F11-16W -3B - C A V100CountTi ter G roups012345601234PS4-F11-16W -2A - C A

48、V100CountTi ter G roups01234501234 2.6 血清或卵黄抗体检血清或卵黄抗体检测结果测结果 2.6.7 IBH-AGP抗体抗体 通常用琼脂扩散试通常用琼脂扩散试验于验于12-14W检测检测鸡包函体肝炎鸡包函体肝炎（IBH）的抗体阳）的抗体阳转率。转率。 部分抗体阳性，鸡群部分抗体阳性，鸡群已感染；已感染； 全部阴性，建议人工全部阴性，建议人工感染野毒（可采集抗感染野毒（可采集抗体阳性鸡群的垫料放体阳性鸡群的垫料放鸡群中）。鸡群中）。 2.6 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.8 IBD-AGP或或ELISA抗体抗体 通常采用定量较为准确的通常采用定量较为准确的ELISA方法方法检测雏鸡的母源抗体来确定检测雏鸡的母源抗体来确定IBD首免首免时间。时间。 如果鸡苗来源不同，建议采集如果鸡苗来源不同，建议采集7d 雏鸡的血样进行检测，雏鸡的血样进行检测，以避免卵黄吸收差异较大带来的误差；以避免卵黄吸收差异较大带来的误差； 根据疫苗可突破的母源抗体水平，以根据疫苗可突破的母源抗体水平，以3.5天为半衰期（蛋天为半衰期（蛋鸡鸡4-5天）计算出首免日龄。天）计算出首免日龄。 2.6 血清或卵黄抗体检测结果血清或卵黄抗体检测结果 2.6.7 IBH-AGP或或