亚甲蓝原料药的稳定性考察

1、    作者：李莉，汤磊，张敏，黄家宇，张毅 【摘要】  目的： 考察亚甲蓝原料药的稳定性。方法: 亚甲蓝原料药经强光照射（4500lx）10 d、高温存放（40 ）10 d、高湿存放25 ，RH（75±5）%10 d、加速试验（40±2），RH（75±5）%6个月、长期试验1年，考察亚甲蓝原料药经不同条件存放后的性状、含量及有关物质的变化。结果: 亚甲蓝原料药经光照试验、高湿试验、高温试验、加速试验和长期试验后，所考察指标均符合质量标准要求。结论: 亚甲蓝原料药稳定性较好，但具有吸湿性。 【关键词】&#

2、160; 亚甲蓝；药物； 稳定性；光；温度；湿度AbstractObjective: To investigate the stability of methylene blue crude materials. Methods: The raw material of methylene blue was treated respectively with highlight (4500Lx,10d) for 10 days, high temperature ( 40) for 10 days, high wet （25, RH75%±5%）for 10 days, a

3、ccelerating testing （40±2 RH75%±5%）for six months, and a longterm testing of one year, and then the changes of characters, contents of active components and related substances under different storage conditions were observed. Results: All of the tested indexes of the sample were consistent

4、 with the quality standards after the series tests. Conclusions: The tested material is stable but is hygroscopicity.Key words methylene blue；drug stability; light; temperature; humidity 亚甲蓝（Methylene blue）属吩噻嗪类药物，其注射剂临床主要用于氰化物、亚硝酸盐和苯胺类中毒的特效解毒药物1，近年来许多报道证实其非解毒的临床应用日益广泛，如止痛、肾移植及骨科手术中标识物等，且疗效显著，副作用小24

5、。目前，对亚甲蓝的研究主要在于临床应用和定量测定方面，尚未见对稳定性方面的报道。2006年5月2007年9月，对亚甲蓝原料药在温度、湿度、光线的影响下随时间变化的规律进行考察，为其生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据5。1  材料与方法1.1  仪器和试药     Agilent 1100高效液相色谱仪系统，包括二极管阵列检测器及色谱工作站；WA-A药物稳定性检查仪（天津药典标准仪器厂），电子天平(岛津AUY220)，数显鼓风干燥箱（GZX-9070MBE，上海博迅实业有限公司医疗设备厂），电子恒温水浴锅（DZK

6、W-4，上海科析试验仪器厂），HM14型毛发湿度表（天津气象海洋仪器厂）；脱甲基亚甲蓝对照品（北京百灵威化学技术有限公司），符合欧洲药典对参比物质的要求；亚甲蓝原料药（由厂家提供，批号：060604、060609、060614）、乙腈（色谱纯）；重铬酸钾（基准试剂），硫代硫酸钠，淀粉，磷酸，三乙胺，氯化钠，硝酸钾，碘化钾，硫酸等试剂均为分析纯。1.2 试验条件 1.2.1 影响因素试验（产品批号：060604）强光照射试验：将供试品平摊在培养皿里，厚度5 mm，开口置于药物稳定性检查仪中，在4 500 lx光强度下放置10 d。高温试验：将供试品平摊在培养皿里，厚度5 mm，开口置于有盖方盘内

7、，于干燥箱中40 放置10 d。高湿度试验：将供试品平摊在培养皿里，厚度5 mm，开口置于恒湿密闭干燥器中，于25、相对湿度（75±5）%条件下敞口放置10 d。各试验条件下的样品，分别于第5、10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测，考察性状、有关物质和含量的变化。1.2.2 加速试验（产品批号：060604、060609、060614） 模拟市售包装, 置于药物稳定性检查仪中，在（40±2）、相对湿度（75±5）%的条件下放置6个月，分别在第1个月、2个月、3个月、6个月末取样，按稳定性重点考察项目进行检测，考察性状、有关物质和含量的变化。1.2.3 长期试验

8、 供试品三批（产品批号：060604、060609、060614），模拟市售包装，在（25±2），相对湿度（60±10）%的条件下放置12个月，分别于0个月、3个月、6个月、9个月、12个月取样,按稳定性重点考察项目进行检测，考察性状、有关物质和含量的变化。  1.3 稳定性考察项目和方法1.3.1 性状 深绿色，有铜光的柱状结晶或结晶性粉末，无臭。1.3.2 亚甲蓝原料药有关物质测定 高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，0.34%磷酸溶液（取磷酸3.4 ml，加水溶解至1 000 ml，加三乙胺调pH至3.0）

9、-乙腈（7723）为流动相，流速为1ml/min，检测波长为246 nm；理论板数按亚甲蓝峰计算应不低于5 000，亚甲蓝与其他杂质峰的分离度应符合规定。取亚甲蓝样品，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1 ml中约含0.15 mg的溶液作为供试品溶液；取脱甲基亚甲蓝对照品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1 ml中约含对照品0.15 mg的溶液，精密量取此溶液和供试品溶液各1 ml，置10 ml量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液a；另精密量取供试品溶液1 ml置100 ml量瓶中用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液b。取对照溶液b 20 l注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使亚

10、甲蓝色谱峰的峰高为满量程的15%20%，再精密量取供试品溶液、对照溶液a和对照溶液b各20 l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。对照溶液a色谱图中脱甲基亚甲蓝与亚甲蓝峰的分离度应大于1.5。供试品溶液色谱图中如有与脱甲基亚甲蓝保留时间一致的峰，其峰面积不得大于对照溶液（b）中主峰面积的5倍（5%）；其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液b中主峰面积的0.5倍（0.5%）；除脱甲基亚甲蓝外的其它杂质峰面积之和不得大于对照溶液b中的主峰面积（1%）；杂质峰面积为对照溶液b中主峰面积0.1倍以下的忽略不记。   1.3.3 含量测定6 照中国药典（2005年版

11、）二部亚甲蓝质量标准含量测定项下方法测定。2 结果2.1 影响因素试验     样品（批号：060604）经光照、高温和高湿度试验第5、10天，与0 d比较，除高湿度试验吸湿流动性变差外，其余样品性状无明显变化。脱甲基亚甲蓝5%，其它任一杂质0.5%，除脱甲基亚甲蓝外的其它杂质总和1%，检测结果见表1。表1  亚甲蓝原料药影响因素试验结果（略）2.2 加速试验     样品（批号：060604、060609、060614）经加速试验3、6个月时样品流动性稍差，其余性状无明显变化。有关物质检查符合

12、标准要求，含量检测结果见表2。表2  亚甲蓝原料药加速试验结果（略）2.3 长期试验结果     供试品（批号：060604、060609、060614）室温放置1年，其性状无明显变化，有关物质检查符合标准要求，含量检测结果见表3。表3  亚甲蓝原料药长期试验结果（略）3 讨论     实验中，曾将亚甲蓝原料药置于60 放置5 d和10 d，含量均低于规定限度（98.5% ）,因而改在40 条件下同法进行试验，经检验各项考察指标均在规定范围之内；也曾将供试品于25 、相对湿度

13、（92.5±5）%条件下敞口放置10 d，于第5天和第10天取样，准确称量试验前后供试品的重量，样品吸湿增重分别为5.46%（5 d）和5.46%（10 d），吸湿增重大于5%，因而改在相对湿度(75±5)%条件下，经检验各项考察指标均在规定范围之内。本品经加速试验（40±2）、RH（75±5）%模拟市售包装放置6个月，在放置3个月后样品因吸湿流动性变差，其余检测指标均符合规定。亚甲蓝原料药敞口放置经光照（4 500 lx）5、10 d，长期试验考查1年，各项考察指标均符合规定。试验结果表明，亚甲蓝原料药稳定性较好，但易吸湿增重，故本品应密封贮藏于凉暗处。        中国药典（2005年版）收载的亚甲蓝原料药及其注射剂的质量标准中，没有有关物质的检查项目，本实验参考欧洲药典5.4版建立了本品的有关物质检查方法，并进行稳定的考察，使考察项目更完善，结果更可靠。【参考文献】  1陈俊.荧光分光光度法测定亚甲蓝注射液的研究J.集美大学学报(自然科学版)，2005(4)：314-317.2黄智明，张自强.亚甲蓝阻滞治疗三叉神经痛J.中华临床医学研究杂志，2006（12）：