2014年选修一、三知识点归纳

1、选修一生物技术实践一、传统发酵技术的应用.,1果酒制作原理： 酵母菌是兼性厌氧微生物。在缺氧、呈酸性发酵液中，酵母菌可以生长 繁殖，而绝大多数其他微生物生长受抑制。酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵：C6H12O6 T2C2H5OH 2CQ+少量能量2、果醋制作原理：当氧气、糖源都充足时， 醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖 源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。3、 腐乳制作原理：多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种 丝状真菌。代谢类型是异养需氧型。 毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。在多

2、种微生物的协同作用下， 普通的豆腐转变成风味独特的腐乳。4、泡菜制作原理： 制作泡菜所用微生物是 乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型。在无氧条 件下，将葡萄糖分解为乳酸。二、微生物的培养和应用（一）微生物的培养与利用1微生物的培养和分离技术1）微生物生长需要一般都含有 水、碳源、氮源、无机盐2） 培养基的制作合格与否通过未接种的培养基表面是否有菌落生长来验证3） 常用的无菌技术有 1、对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。2、将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。3、为避免周围环境中的微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。4、实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具

3、与周围物品相接触。考点细化： 灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物, 包括芽抱和抱子。消毒是指用较为 温和的理化方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,不包括芽抱、抱子。 灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 ，灼烧灭菌用于接种用的金属工具；干热灭菌用于能耐高温的，需要保持干燥的玻璃器皿等；高压蒸汽灭菌用于培养基等 消毒的方法有煮沸消毒法，用于液体消毒；巴氏消毒法，用于不耐高温的液体；化学药剂或紫外线消毒，用于物体表面的消毒。4）微生物的纯培养指的是防止外来杂菌入侵。5） 配制固体培养基的步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板6）微生物接种的方法最常用的是 平板划

4、线法和稀释涂布平板法。平板划线法用于细菌的纯化培养，是通过接种环在琼脂固体 9培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步 稀释分散到培养基的表面。 在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见 的子细胞群体，这就是纯化的菌落。稀释涂布平板法用于细菌的计数，是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。考点细化： 平板冷凝后，要是有水滴滴到培养基上，会导致菌蔓延，这样就不能计数，分离了。为防止冷凝水滴到培养基上，所以培养时平板一定要倒置。 接种操作每次划线之前都要灼烧接种环，是因为每次操作都要及时灭菌

5、，以防污染杂菌。 操作结束时，仍然需要灼烧接种环的原因是防止杂菌污染环境。2. 特定微生物的数量的测定6）测定微生物数量的方法有显微镜直接计数、统计菌落数目 。3. 培养基对微生物的选择作用7）在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。例如：在选择培养基的配方中，将尿素作为培养基中唯一的氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。考点细化： 选择培养基配置的原理是增加或减去某种成分，使要选择的微生物能生长，其它微生物不能生长。 培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌 培养基中不加氮源可以分离出固氮微生物三、多聚酶链式反应扩增 DN

6、A片段1. PCR :多聚酶链式反应的简称，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。2. 扩增方向： 总是 从子链的 5' 端向 3' 端延伸。3. 需要引物的原因：DNA聚合酶不能从头合成 DNA，而只能从引物3 '端延伸DNA链， 因此DNA复制需要引物。4原理：热变性原理，5. 条件：DNA 模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，脱氧核苷酸，耐热的 Taq DNA聚合酶，同时控制 温度。6. 过程：变性（高温94C）、复性（低温55C）、延伸（中温72C）7结果：DNA聚合酶只能特异地复制处于两引物之

7、间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。四、血红蛋白的分离1、 实验原理：利用蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、 所带电荷的性质和多少、 溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力，分离不同种类的蛋白质。2、凝胶色谱法原理： 根据相对分子质量的大小 分离蛋白质的有效方法。相对分子质量小的分子要穿过多孔凝胶颗粒的内部通道， 路程长，流动慢；相对分子质量大的分子直接通过 凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快。因此，最先流出的是相对分子质量大的蛋白质。选修三现代生物科技一、基因工程1. 基因工程的诞生1） 基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术, 从而创造出

8、更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。2）基因工程诞生的理论基础是在生物化学、分子生物学和微生物学科的基础上发展起来，技术支持有基因转移载体的发现、工具酶的发现，DNA合成和测序仪技术的发明等。2. 基因工程的原理及技术3）基因工程操作中用到了 限制酶、DNA连接酶、运载体考点细化：限制酶主要从原核生物生物中分离纯化出来，这种酶在原核生物中的作用是识另IDNA分子的特定核苷酸序列，并且使每条链中 特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键断 开 限制酶的特性是识别特定核苷酸序列，切割特定切点。限制酶产生的末端有两种：粘性末端和平末端。 DNA连接酶与DNA聚合酶的作用部位是 磷酸二酯键，二者在作

9、用上的区别为前者是恢 复被限制性内切酶切开的两个片段末端核苷酸之间的磷酸二酯键，后者单个的核苷酸 连接到DN分子上。 作为基因工程的载体应该具备 标记基因、多个限制性内切酶切点、能够在宿主细 胞内复制和稳定存在 等特点。 常见的载体种类有质粒、动植物病毒、噬菌体4） 基因工程四步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受 体纟田胞、目的基因的检测和表达 。考点细化： 目的基因的获取方法为根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在载体上的位置、基因的转录产物、以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。 基因文库、基因组文库、cDNA文库的区别：含有某种生物不同基因的许多 DNA片

10、段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌体分别含有这种生物的不同基因，称之为基因文库。如果含有一种生物所有基因，叫做 基因组文库。只包含一种生物的一部分基因，这种基因文库叫做 部分基因文库，如cDNA文库。 基因重组操作中构建基因表达载体的目的是将目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗 传给下一代，同时目的基因能够表达和发挥作用。 一个完整的基因表达载体包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点。 将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞的常用方法分别是农杆菌转化法、显微注射法、cf处理法。 基因工程的受体细胞选择，植物可以采用体细胞，动物不能用体细胞，一般采用受精卵细胞。因为受精卵具

11、有全能性。 当受体细胞是大肠杆菌时常用 Ca2+处理细胞，这样做的目的是使细胞处于一种能够吸收周 围环境中的DNA分子的感受态细胞。 目的基因的检测：在分子水平上，利用放射性同位素等标记的含目的基因的DNAt段作为探针,检测转基因生物的 DNA是否插入了目的基因 （DN分子杂交技术）;同样用标记的 目的基因作 探针是否转录岀了 mRNA（分子杂交技术）;目的基因是否翻译成蛋白质（ 抗 原-抗体杂交）；个体生物学水平鉴定（接种实验）。 目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因的检测和表达一般需要碱基互补配对。将目的基因导入受体细胞 不需要碱基互补配对3. 基因工程的应用5）在农业生产上：主要

12、用于提高农作物的抗逆能力（如：抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱 和抗盐碱等），以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。6） 基因治疗不是对患病基因的修复，基因检测所用的 DNA分子只有处理为单链才能与被检 测的样品，按碱基配对原则进行杂交。二、克隆技术1. 植物的组织培养细胞全能性：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。考点细化： 都具有该生物全部遗传信息，因此从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性 细胞在生物体内没有表现出全能性的原因是基因选择性表达。 植物细胞的全能性得以实现的条件是 离体，合适的营养和激素，无菌操作 。 在生物的所有的细胞中，

13、受精卵细胞的全能性最高。3）植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。考点细化： 已分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程叫脱分化。 再分化是愈伤组织继续进行培养，重新分化出根或芽等器官。 愈伤组织细胞排列疏松而无规则，高度液泡化的呈不定型状态的薄壁细胞。 植物组织培养时培养基的成分有矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加物，与 动物细胞培养相比需要蔗糖、植物激素，不需要动物血清 。 在植物组织培养脱分化过程中，需要 植物激素。 植物组织培养

14、全过程中都需要 无菌，愈伤组织之前不需要光照4）植物组织培养技术的用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产 物的工厂化生产。考点细化： 用植物体的 茎尖、根尖来获得无病毒植物 人工种子中人工胚乳相当于大豆种子的子叶，人工种子与正常种子相比发芽率高。 转基因植物的培育需要植物组织培养5）将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物 体叫做植物体细胞杂交。考点细化： 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁获得原生质体 物理方法：电刺激、振荡、离心；化学方法:聚乙二醇（PEG 植物体细胞杂交完成的标志是 新细胞壁的形成 融合后的杂种细胞通过植物组织培养才能发育

15、成完整的植物体6） 植物体细胞杂交这一育种方法的最大优点是克服远缘杂交不亲和障碍2. 动物的细胞培养与体细胞克隆7）动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、 生产单克隆抗体、胚胎移植等8）动物细胞培养经过原代培养和传代培养考点细化： 动物细胞培养液的成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等 动物细胞培养用液体培养基，植物细胞培养用固体培养基，培养的动物细胞通常取自胚 胎、幼龄动物的组织器官动物细胞培养时的气体环境是 95%的空气+5%T氧化碳的混合气体，CQ起到调节 PH值作用 使用胰蛋白酶处理使动物组织分散成单个细胞 动物组织处理使细胞分散后的初次培养

16、称为原代培养 贴满瓶壁的细胞会出现 接触抑制现象，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。3. 细胞融合与单克隆抗体9）动物细胞融合与植物原生质体融合的区别：操作步骤不同：植物原生质体融合需要先去除细胞壁，动物细胞无细胞壁；诱导方法不同：动物细胞融合可以用物理、化学和生物（灭活的病毒）三种方法，植物原生质体融合只能用物理、化学方法；最终目的不同：植物原 生质体融合最终是为了获得杂种植株，动物细胞融合最主要目的是获得单克隆抗体。10）单克隆抗体与血清抗体相比 特异性强、灵敏度高 并可大量制备11）熟悉单克隆抗体制备过程。考点细化 生产杂交瘤细

17、胞要用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 注射相应抗原后，从小鼠脾脏中提取出 B淋巴细胞 杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生专一抗体 。 制备单克隆抗体过程中需要两次筛选 体外条件下做大规模培养杂交瘤细胞或者注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或者小鼠腹水内就可以提取出大量的 单克隆抗体。联想拓展： 杂交瘤细胞融合时的 B淋巴细胞为经相应抗原免疫过的 B淋巴细胞 一种B细胞只能产生一种抗体 A和B两种细胞融合， 只考虑两两融合，融合方式有 AA、BB AB融合三种 制备单克隆抗体过程中需要经过两次筛选？第一次：特定的选择性培养基。第二次：抗体检测13） 单克隆抗体在多种人类疾病及动植物病害的诊断和病原鉴定

18、中发挥重要作用。主要用于 癌症治疗，也有少量用于其它疾病治疗。拓展：生物导弹中，单抗的作用是导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。既不损伤正常细胞，又减少了用药量。14）体细胞核移植技术中的 去核卵母细胞 能够激发核的全能性, 选用的卵母细胞应该是培 养到减数第二次分裂中期的卵母细胞15） 核移植技术获得的动物因为有细胞质基因的影响、生活环境的差异、可能发生基因突变 造成核移植动物与供核动物性状不完全相同。三、胚胎工程1.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础动物胚胎发育的基本过程：受精卵t 2细胞t 4细胞t 8细胞f桑葚胚f囊胚f原肠胚胚胎工程的理论基础：哺乳动物

19、受精和早期胚胎发育规律1）精子和卵子的产生过程中精子变形，卵子没有。卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出 生前完成的。考点细化： 精细胞产生后要经过顶体形成、尾部发育、细胞质浓缩最终精子形成 卵子的发生在胎儿时期就完成了卵泡的形成和在卵巢内的储备，排卵前后进行了减数第一次分裂，减U分裂在精子和卵细胞结合过程中完成 。2）精、卵细胞结合前各自要发生哪些生理过程？（提示：在受精前精子要在雌性动物生殖 道内获能；排出的卵子要在输卵管中进一步 成熟到减U中期 才具备受精能力）。透明带反应3）受精过程：精子获能t卵子准备阶段t受精。卵子防止多精入卵的屏障：和卵黄膜封闭作用拓展： 桑椹胚一般指32个左右的细

20、胞数目的胚胎。 胚胎分割选用的胚胎最好处于桑椹胚或者囊胚时期，因为全能性较高6） 胚胎工程包含的技术：体外受精技术、胚胎早期培养技术、胚胎干细胞培养、 胚胎分割技术、胚胎移植技术7）获得精子必须经获能处理后才能进行体外受精8）采集卵子前一般要对雌体进行 促性腺激素处理，从较大体型动物卵巢中采集卵母细胞 都要经过体外人工培养成熟后，才能与获能精子受精。9） 胚胎的早期培养培养液还需要添加激素和血清10）获得的早期胚胎有向受体移植、冷冻保存两种去向2. 胚胎干细胞的移植11）早期胚胎或原始性腺 中分离出来的一类细胞可以称为胚胎干细胞12）胚胎干细胞在形态上：体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性。另外在体外培养的条件下，胚胎干细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可进行遗传改造13） 干细胞按分化潜能可分为全能干细胞（如胚胎干细胞可以分化形成所有的成体组织细胞， 甚至发