医院生化室标准操作程序医院检验科管理文件P

1、1宁波市第九医院检验科管理文件分析项目 SOP 文件编号：LJ-FXXMSOP-02版本：2010-A/0生效日期：20101001生化室标准操作程序（SOP） 2008 年 12 月2宁波市第九医院检验科管理文件分析项目 SOP 文件编号：LJ-FXXMSOP-02版本：2010-A/0生效日期：20101001文件首页文件类别：分析项目 SOP 文件文件编号：LJ-XM/YQSOP-02文件版本：2010 年第一版，未修改。启用日期：2010 年 10 月 01 日有效时间：至 2012 年 09 月 30 日发出文件数：2 份。分别由科主任和生化室存放与使用。文件编写者：王旭晓文件签发者

2、：刘 波文件有效期内的修改：修改日期修改内容修改方式负责人签名科主任签名本 SOP 变动程序：任何一位使用本 SOP 的工作人员如提出对本 SOP 改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本 SOP 作出改动，但必须先报经专业主管和科主任批准。文件复审日期： 年 月 日。复审后自动延长有效期两年。复审通过审批者： 3宁波市第九医院检验科管理文件生化项目 sop 目录序号序号文件名称文件名称文件编号文件编号备注备注一一 HITACHIHITACHI 76007600 分析项目分析项目1 1血清总蛋白测定SH-XMSOP-012 2血清白蛋白测定SH-XMSOP-023 3血清总胆红

3、素测定 SH-XMSOP-034 4血清结合胆红素测定SH-XMSOP-045 5血清总胆汁酸测定SH-XMSOP-056 6血清丙氨酸氨基转移酶测定SH-XMSOP-067 7血清天门冬氨酸氨基转移酶测定SH-XMSOP-078 8血清碱性磷酸酶测定SH-XMSOP-089 9血清-谷氨酰转移酶测定SH-XMSOP-091010血清胆碱酯酶测定SH-XMSOP-101111乳酸脱氢酶测定SH-XMSOP-111212血清肌酸激酶测定SH-XMSOP-121313血清肌酸激酶同工酶测定SH-XMSOP-131414淀粉酶测定SH-XMSOP-141515葡萄糖测定SH-XMSOP-151616

4、尿素测定SH-XMSOP-161717肌酐测定SH-XMSOP-171818尿酸测定SH-XMSOP-181919血清总胆固醇测定SH-XMSOP-192020血清甘油三酯测定SH-XMSOP-202121血清高密度脂蛋白胆固醇测定SH-XMSOP-212222血清低密度脂蛋白胆固醇测定SH-XMSOP-222323血清载脂蛋白 A1 测定SH-XMSOP-232424血清载脂蛋白 B 测定SH-XMSOP-242525钾、钠、氯离子测定SH-XMSOP-252626钙测定SH-XMSOP-262727血清无机磷测定SH-XMSOP-272828血清镁测定SH-XMSOP-282929腺苷脱氨

5、酶测定SH-XMSOP-293030血清 C-反应蛋白测定SH-XMSOP-303131血清免疫球蛋白 IgM 定量测定SH-XMSOP-313232血清免疫球蛋白 IgG 定量测定SH-XMSOP-323333血清免疫球蛋白 IgA 定量测定SH-XMSOP-333434血清补体 C3 测定SH-XMSOP-343535血清补体 C4 测定SH-XMSOP-353636血清类风湿因子测定SH-XMSOP-363737血清抗链球菌溶血素“O”测定SH-XMSOP-374宁波市第九医院检验科管理文件项目 SOP 文件编号：SH-FXXM02-01版本：2010-A/0生效日期：20101001一

6、一 血清总蛋白测定共 4 页第 1 页1 检验申请 单独检验项目申请：血清总蛋白测定(缩写 TP)；组合项目申请：肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.12.1 标本采集2.1.12.1.1 常规静脉采血约 2ml，不抗凝，置普通试管中或采用含分离胶的真空采血管。2.1.22.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.32.1.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如急诊标本，加上急查标识。2.1.42.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.52.1.

7、5 下列标本为不合格标本2.1.5.12.1.5.1 标本量不足：少于 0.3ml 的全血标本，或少于 0.1ml 的血清或血浆。2.1.5.22.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.32.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.22.2 标本保存2.2.12.2.1 接收标本后在 30min 内将标本离心分离出血清。2.2.22.2.2 标本保存时间：室温（1525）下可稳定一周，普通冰箱中（28）稳定一个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d 的标本均加塞密闭或

8、覆盖湿巾。2.2.32.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置 28冰箱内保存 7d。2.32.3 标本采集的注意事项2.3.12.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.22.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3 方法原理双缩脲法。碱性溶液中的铜离子和蛋白质或多肽分子中的肽键反应，生成紫红色络合物，络合物在波长540nm处的吸光度和蛋白质的浓度成正比。4 试剂及其他用品4.14.1 试剂：双缩脲法测定总蛋白试剂盒，由宁波美康生物科技有限公司出品。54.24.2 试剂盒保存：保存于 2-8，避光保存可稳定 12 个月。开盖后放于仪器的试剂

9、仓冰箱中至少稳定 30 天。4.34.3 试剂盒准备：液态试剂型，即开即用，无特殊准备。4.44.4 试剂盒主要成分4.4.14.4.1 R1：氢氧化钠 400mmol/L，酒石酸钾钠 89 mmol/L4.4.24.4.2 R2：硫酸铜 24.3 mmol/L，碘化钾 61 mmol/L，氢氧化钠 400mmol/L，酒石酸钾钠 89 mmol/L。5 校准品与校准模式5.15.1 校准品：由罗氏公司提供的多项目校准液 C.f.a.s.1552115.25.2 校准类型和校准点数目：线性模式，2个校准点。5.35.3 校准周期：校准间隔时间 7 天，批内校准时间 90 天。但在：更换试剂批号

10、或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。5.45.4 校准液重建方法：用3.00ml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。6 质控品与室内质控规则6.16.1 质控品采用由 BIO-RAD 公司提供的定值质控血清，产品号为 616/1UN6.26.2 质控液重建方法：用 5.00ml 蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min 后即可使用。6.36.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.46.4 质控规则：采用 Westgard 多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.56.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的

11、纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测7 适用仪器适用 Hitachi 7600 型全自动生化分析仪。8 标本检测步骤装载试剂 进行校准 进行质控 输入标本检测项目 加载标本 标本测定 结果复核 报告。 9主要分析参数化学原理：双缩脲法；测定原理:比色法；测定方法：一点终点法；反应方向：正反应；单位：g/L；校准模式：线性；校准周期：14 天；校准点：2 个；波长: 主波长 540nm，辅助波长 700 nm；样本量：3.0l；试剂：R1 150l；测定时间：4.0-7.7sec；分析范围：10-120g/L。10 结果计算总蛋白浓度（g/L）(A标本/A标准) 校准液蛋白

12、浓度 (g/L) A：AA546nm A660nm； 仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。11 检验结果的报告及范围11.111.1 结果的报告11.1.111.1.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。611.1.211.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.311.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.211.2 报告范围：2150g/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.112.1 精密度

13、：血清/血浆：批内CV 0.47%0.70%，批间 CV 0.95%1.22%。12.212.2 线性范围：2150g/L。12.312.3 方法的有限性及干扰因素：甘油三酯达 11.3mmol/L 时影响小于 2%，血红蛋白达 5g/L 时影响小于 9%，胆红素达 547umol/L 时影响小于 10%。13 参考范围及医学决定水平参考范围：6080 g/L。14 临床意义14.114.1 血浆总蛋白包括血浆中所有的蛋白质，其中主要有白蛋白和球蛋白两大类。血浆蛋白主要的生理功能是维持血浆胶体渗透压和 pH 值、运送多种物质的载体、参与凝血和抗凝血、免疫作用和营养作用等。14.214.2 TP

14、ALB球蛋白（含量），并可由此得出 A/G 比值。14.3 血清 TP 增高 （1）多数反映高免疫球蛋白血症。 1）各种单克隆性免疫球蛋白病，如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、冷沉淀球蛋白血症等。 2）自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、硬皮病、风湿病、类风湿性关节炎。（2）多种原因引起的明显脱水使血浆浓缩，致 TP 相对增高。这种情况 A/G 比值变化不大，为假性蛋白增多血症。14.4 血清 TP 降低：多反映白蛋白合成减少或蛋白质丢失。（1）肝脏合成减少：各种慢性肝病，吸收不良综合症，蛋白质营养缺乏等。（2）蛋白质尤其是白蛋白丢失：肾病综合症、急性肾炎和慢性肾炎从肾脏丢失；严重烧伤从创面丢失；溃

15、疡性结肠炎等胃肠疾病从胃肠道丢失；大量失血和浆膜腔渗液也可使蛋白丢失。15 结果审核以及分析与相关项目的联系15.115.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.215.2 认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.315.3 相关项目：审核与白蛋白、血清蛋白电泳、丙氨酸氨基转移酶等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。716威胁生命的“紧急值”及报告规定（此项不作规定）17 有关引用程序与文件17.117.1 Hitachi 7600 型自动生化分析仪仪器标准操作规程。 。17.217.2生化检验室内质控标准操作

16、程序。17.317.3检验结果审核程序。17.417.4标本送检和接收程序。18 参考文献18.118.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004.18.218.2 北京利德曼生化技术有限公司双缩脲法测定总蛋白试剂盒说明书。18.318.3 Kaplan，L.A.and Pesce，A.J.(Des)，Clinical Chemistry Theory，Analysis and Correlation，2nd Edition，C.V. Mosby Co.，1989.18.418.4 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南

17、大学出版社，2006. 19 本 SOP 变动程序任何一位使用本 SOP 的工作人员如提出对本 SOP 改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本 SOP 作出改动，但必须先报经专业主管和科主任批准。20 本 SOP 涉及的记录与表单20.120.1 试剂装载记录表20.220.2 试剂质量记录表20.320.3 质控记录20.420.4 失控及失控处理记录20.520.5 检验结果审核记8宁波市第九医院检验科管理文件项目 SOP 文件编号：SH-FXXM02-02版本：版本：2010-A/02010-A/0生效日期：20101001二二 血清白蛋白测定第 1 页共 4 页1 检

18、验申请 单独检验项目申请：血清白蛋白测定(缩写 ALB)；组合项目申请：肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.12.1 标本采集2.1.12.1.1 常规静脉采血约 2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子 SST 真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子 PST 试管。2.1.22.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.32.1.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.1.42.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以

19、拒收。2.1.52.1.5 下列标本为不合格标本2.1.5.12.1.5.1 标本量不足：少于 0.3ml 的全血标本，或少于 0.1ml 的血清或血浆。2.1.5.22.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.32.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.22.2 标本保存2.2.12.2.1 接收标本后在 30min 内将标本离心分离出血清。2.2.22.2.2 标本保存时间：室温（1525）下可稳定一周，普通冰箱中（28）稳定一个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过

20、 1 天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.32.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置 28冰箱内保存 7 天。2.32.3 标本采集的注意事项2.3.12.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.22.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3 方法原理溴甲酚绿法。在 pH 4.0 的溶液中，溴甲酚绿与白蛋白立即反应形成绿色复合物，此复合物在波长 600nm 处的吸光度与白蛋白的浓度成正比。4 试剂及其他用品4.14.1 试剂：溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒，由宁波美康生物科技有限公司出品。4.24.2 试剂盒保存：保存于 225，不开盖情况下

21、至标签的失效期。开盖后放于仪器的冰箱中至少稳定 30 天。开盖后避免污染。变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。4.34.3 试剂盒准备：液态单试剂型，即开即用，无特殊准备。4.44.4 试剂盒主要成分：琥珀酸盐缓冲液（pH 4.2）100mmol/L，溴甲酚绿0.2mmol/L，含有稳定剂与保护剂。95 校准品与校准模式5.15.1 校准品：由罗氏公司提供的多项目校准液 C.f.a.s.（Cat.No.155211） ，其白蛋白浓度值可溯源至国际标准参考物质（CRM）470。5.25.2 校准类型和校准点数目：线性模式，2个校准点。5.35.3 校准周期：校准间隔时间 1

22、天。但在：更换试剂批号或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。5.45.4 校准液重建方法：用3.00ml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。6 质控品与室内质控规则6.16.1 质控品采用由 BIO-RAD 公司提供的定值质控血清，产品号为 616/1UN6.26.2 质控液重建方法：用 5.00ml 蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min 后即可使用。6.36.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.46.4 质控规则：采用 Westgard 多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。7 适用仪器适用 Hitachi 7600

23、型全自动生化分析仪。8 标本检测步骤装载试剂 进行校准 进行质控 输入标本检测项目 加载标本 标本测定 结果复核 报告。 9 主要分析参数Assay Code：1 Point End；Reaction Time：5；Assay Point：7；Wave Length Sec：700；Wave Length Prim：600；Sample N：2.0，D：254.075，I：4.0；R1：200；Abs. Limit：32000 Increase；Calibration Type：LogitLog 4P；Point：4；Span 3；Time Out：Full 20；SD Limit：0.1；D

24、uplicate Limit：32000；Sensitivity Limit：0；S1 ABS Limit：44300 44400；Unit：g/L；Technical Limit：10 60。10 结果计算计算公式：白蛋白浓度（g/L）（A标本A空白）/（A标准A空白） 校准液白蛋白浓度（g/L）注：根据双波长测定，A A340nmA700nm仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。11 检验结果的报告及范围11.111.1 结果的报告11.1.111.1.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。11.1.211.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名

25、，并有与申请单相同的医学信息。11.1.311.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.211.2 报告范围：1960g/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.112.1 精密度：批内CV为 0.8%，总CV 1.3%1.8%。12.212.2 线性范围：1070g/L。12.312.3 方法的有限性及干扰因素：甘油三酯达 11.3mmol/L 时影响小于 10%，血10红蛋白达 4.5g/L 时影响小于 10%，胆红素达 684mol/L 时影响小于 2%。13 参考范围及医学决

26、定水平13.113.1参考范围：3557g/L。13.213.2医学决定水平13.2.113.2.120 g/L：低于此值，肝病患者提示严重预后不良。还应测定尿蛋白，以查明有无过多的蛋白丢失。13.2.213.2.2 35g/L：此亦为参考范围下限，凡低于此值时，各种引起白蛋白降低的因素均应列入考虑范围，如肾病、肝功不全、严重的营养不良、急、慢性炎症、恶性肿瘤等。13.2.313.2.3 57g/L：在此值以上的，应考虑脱水的可能性，并进行红细胞比积测定，以检查其是否增高。14 临床意义14.114.1血浆白蛋白的生理功能很多，包括营养、维持渗透压、是血管内多种物质的运输载体等。白蛋白在肝脏中

27、合成，是监测肝脏疾病的一个重要指标。14.214.2肝脏疾病使白蛋白的合成减少表现为血清白蛋白浓度降低，并与肝脏病变的严重程度成比例，白蛋白是对肝功能作分级的评价指标之一。14.314.3血清白蛋白降低还见于严重的吸收不良、肠梗阻、风湿热、恶病质、以及多种全身性疾病。14.414.4当有蛋白质丢失过多的情况，如大面积烧伤、肾病综合征、慢性肾炎、糖尿病、慢性肠炎、肿瘤、充血性心力衰竭等，血清白蛋白也常降低。14.514.5血清白蛋白增高的情况较少见，高白蛋白血症偶见于脱水所致的血液浓缩。 15 结果审核以及分析与相关项目的联系15.115.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.215.2

28、审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.315.3 相关项目：审核与总蛋白、血清蛋白电泳、丙氨酸氨基转移酶等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16威胁生命的“紧急值”及报告规定（本项不作规定）17 有关引用程序与文件17.117.1 Hitachi 7600 型自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.217.2生化检验室内质控标准操作程序。17.317.3检验结果审核程序。17.417.4标本送检和接收程序。18 参考文献18.118.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004.1

29、8.218.2 北京利德曼生化技术有限公司白蛋白测定试剂盒说明书。18.318.3 Kaplan，L.A.and Pesce，A.J.(Des)，Clinical Chemistry Theory，Analysis and Correlation，2nd Edition，C.V. Mosby Co.，1989. 18.418.4 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006. 19 本 SOP 变动程序11任何一位使用本 SOP 的工作人员如提出对本 SOP 改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本 SOP 作出改动，但必须先报经专

30、业主管和科主任批准。20 本 SOP 涉及的记录与表单20.120.1 试剂装载记录表20.220.2 试剂质量记录表20.320.3 质控记录20.420.4 失控及失控处理记录20.520.5 检验结果审核记录12宁波市第九医院检验科管理文件项目 SOP 文件编号：SH-FXXM02-03版本：版本：2010-A/02010-A/0生效日期：20101001三三 血清总胆红素测定第 1 页共 4 页1 检验申请 单独检验项目申请：血清总胆红素测定(缩写 TBIL)；组合项目申请：肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.12.1 标本采集2.1.12.1.1 常规静脉

31、采血约 2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子 SST 真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子 PST 试管。2.1.22.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.32.1.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.1.42.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.52.1.5 下列标本为不合格标本2.1.5.12.1.5.1 标本量不足：少于 0.3ml 的全血标本，或少于 0.1ml 的血清或血浆。2.1.5.22.1.5.2 对反应吸

32、光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.32.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.22.2 标本保存2.2.12.2.1 接收标本后在 30min 内将标本离心分离出血清。2.2.22.2.2 标本保存时间：血液胆红素见光易分解，标本注意避光保存。室温（1525）下可稳定 2h，普通冰箱中（28）稳定 12h。-15-25度可以稳定 3 个月4 个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1 天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.32.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置 28冰箱内保

33、存 7 天。2.32.3 标本采集的注意事项2.3.12.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.22.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3 方法原理为矾酸氧化法。在表面活性剂存在下，胆红素被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，在一定波长处测定吸光度的减少，与胆红素的浓度成正比。4 试剂及其他用品4.14.1 试剂：矾酸氧化法测定总胆红素试剂盒，由日本和光公司出品。4.24.2 试剂盒保存：保存于 28，试剂未启封情况下可稳定至标签的失效期。启封试剂在仪器的试剂仓冰箱中至少稳定 30 天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀，或空白吸光

34、度0.5 时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.34.3 试剂盒准备：即开即用，无特殊准备。4.44.4试剂盒主要成分：Tris-HCl 缓冲液（pH 8.2） 50 mmol/L，化学氧化剂 1380 mmol/L。含有表面活性剂和保护剂。5 校准品与校准模式5.15.1 校准品：由罗氏公司提供的校准液（Cat.No. C.f.a.s.） ，其胆红素浓度值可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料（SRM）470。5.25.2 校准类型和校准点数目：线性模式，3个校准点。5.35.3 校准周期：校准间隔时间:Full，7 天；Blank，1 天。但在：更换试剂批号或出现质控漂移时

35、；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。5.45.4 校准液重建方法：用3.00ml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。6 质控品与室内质控规则6.16.1 质控品采用由 BIO-RAD 公司提供的一个定值质控血清，产品号为6.26.2 质控液重建方法：用 5.00ml 蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min 后即可使用。6.36.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.46.4 质控规则：采用 Westgard 多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.56.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重

36、新回复到控制状态后开始标本检测。7 适用仪器适用 Hitachi 7600 型全自动生化分析仪。8 标本检测步骤装载试剂 进行校准 进行质控 输入标本检测项目 加载标本 标本测定 结果复核 报告。 9主要分析参数Assay Code：2 Point End；Reaction Time：10；Assay Point：1634；Wave Length Sec：660；Wave Length Prim：405；Sample N：4.6，D：6.04.694，I：9.0；R1：117 ；R3：39；Abs. Limit：32000 ；Increase；Calibration Type：Linear；P

37、oint：6；Span :3；TimeOut：Full 160， Blank 20；SD Limit：0.1；Duplicate Limit：32000；Sensitivity Limit：0；S1ABS Limit：0 100；Unit：mol/L；Technical Limit：1 520。10 结果计算计算公式：总胆红素浓度（mol/L）mol/L)Anm660520nm660520校准液总胆红素浓度（校准液标本）（）（A仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果11 检验结果的报告及范围11.111.1 结果的报告11.1.111.1.1 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2

38、11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.311.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.211.2 报告范围：1.71026 mol/L。超过此范围的结果报告时必须附有证明14该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.112.1 精密度：总CV 0.8%3.6%。12.212.2 准确度：回收率 98.7101.5。12.312.3 线性范围：1.71026 mol/L。12.412.4 方法的有限性及干扰因素：甘油三酯达 10.2mmo

39、l/L 时影响小于 6%，血红蛋白达 250mg/L 时影响小于 10%。13 参考范围及医学决定水平参考范围：322 mol/L 14 临床意义14.114.1 血清总胆红素和结合胆红素多用于黄疸的诊断和鉴别诊断。由于胆红素和肝脏功能密切相关，总胆红素是重要的常规肝功能指标。14.214.2 各种原因引起的黄疸都有血清总胆红素增高，如胆汁性肝硬化、胆道梗阻、阻塞性胆红素、肝细胞性胆红素，如肝炎、肝硬化，溶血性黄疸、新生儿胆红素或输血错误。14.314.3 血清总胆红素可作为暴发型肝衰竭（FHF）和自体免疫性肝炎（AIH）预后死亡的独立危险因子，TBIL255mol/L 预测 FHF 预后死亡

40、的敏感性为77.5%，特异性为 46.8%。15 结果审核以及分析与相关项目的联系15.115.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.215.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.315.3 相关项目：审核与直接胆红素（DBil） 、丙氨酸氨基转移酶（ALT） 、碱性磷酸酶（ALP） 、谷胺酰转移酶的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16 威胁生命的“紧急值”及报告规定16.116.1 255mol/L 为应引起临床重视的紧急值，可能有较严重的肝细胞坏死或暴发型肝衰竭的情况。16.216.2 处理程序16.2.

41、116.2.1 检测人员立即报告审核者。16.2.216.2.2 审核者首先根据审核程序，分析质控、定标、试剂的情况是否正常，当天其他已做标本本项目的总体情况有无异常，确认实验有关的基础是在正常状态中。 16.2.316.2.3 出现紧急值的标本有无异常，该标本其他相关项目有无异常，尤其是该患者其他肝功能的情况。16.2.416.2.4 对该标本进行一次重复测定，确认紧急值是否重现。16.2.516.2.5 报告技术质量主管及科主任，立即与临床联系，了解临床相关情况。16.2.616.2.6 确认此紧急值是可报告的，由技术主管或科主任立即电话向主管临床医生报告，并作好电话报告记录，包括电话报告

42、时间和对方接听人员的标识。16.2.716.2.7 及时签发正式检验结果报告。17 有关引用程序与文件17.117.1Hitachi 7600 型自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.217.2生化检验室内质控标准操作程序。17.317.3检验结果审核程序。1517.417.4标本送检和接收程序。18、参考文献18.118.1 Tietz，N.W.(Ed)，Fndamentals of Clinical Chemistry，3rd Edition，W.B.Sanders，1987.18.218.2 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004. 18.318

43、.3 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006. 19 本 SOP 变动程序任何一位使用本 SOP 的工作人员如提出对本 SOP 改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本 SOP 作出改动，但必须先报经专业主管和科主任批准。20 本 SOP 涉及的记录与表单20.120.1 试剂装载记录表20.220.2 试剂质量记录表20.320.3 质控记录20.420.4 失控及失控处理记录20.520.5 检验结果审核记录16宁波市第九医院检验科管理文件项目 SOP 文件编号：SH-FXXM02-04版本：版本：2010-A/02010

44、-A/0生效日期：20101001四四 血清结合胆红素测定第 1 页共 4 页1 检验申请 单独检验项目申请：血清结合胆红素测定(缩写 DBIL)；组合项目申请：肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.12.1 标本采集2.1.12.1.1 常规静脉采血约 2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子 SST 真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子 PST 试管。2.1.22.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.32.1.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.1.42.1.4 标本采集后与检

45、验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.52.1.5 下列标本为不合格标本2.1.5.12.1.5.1 标本量不足：少于 0.3ml 的全血标本，或少于 0.1ml 的血清或血浆。2.1.5.22.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.32.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.22.2 标本保存2.2.12.2.1 接收标本后在 30min 内将标本离心分离出血清。2.2.22.2.2 标本保存时间：血液胆红素见光易分解，标

46、本注意避光保存。室温（1525）下可稳定 2h，普通冰箱中（28）稳定 12h。-15-25度可以稳定 3 个月4 个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1 天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.32.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置 28冰箱内保存 7 天。2.32.3 标本采集的注意事项2.3.12.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.22.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3 方法原理矾酸法测定结合红素。结合(直接)胆红素在间接胆红素抑制剂和表面活性剂的存在下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，在一定波长处测定吸

47、光度的减少与结合胆红素的浓度成正比。 。4 试剂及其他用品4.14.1 试剂：矾酸法测定结合红素试剂盒，由日本和光公司出品。4.24.2 试剂盒保存：保存于 28，试剂未启封情况下可以稳定至失效期。启封试剂在仪器的试剂仓冰箱中至少稳定 30 天。4.34.3 试剂盒准备：即开即用，无特殊准备。4.44.4 试剂盒主要成分：酒石酸缓冲液(pH 3.0) 200 mmol/L，化学氧化剂 4.0 17mmol/L。含有表面活性剂和保护剂。5 校准品与校准模式5.15.1 校准品：由罗氏公司提供的校准液（Cat.No.） ，其结合胆红素浓度值可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料（S

48、RM）4705.25.2 校准类型和校准点数目：线性模式，3个校准点。5.35.3 校准周期：校准间隔时间:Full，7 天；Blank，1 天。但在：更换试剂批号或出现质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。5.45.4 校准液重建方法：用3.00ml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。6 质控品与室内质控规则6.16.1 质控品采用由 BIO-RAD 公司提供的定值质控血清，产品号为 6.26.2 质控液重建方法：用 5.00ml 蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min 后即可使用。6.36.3质控品测定：在每一批标本中测定质控血清。6.46.4 质控规则

49、：采用 Westgard 多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.56.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7 适用仪器适用 Hitachi 7600 型全自动生化分析仪。8 标本检测步骤装载试剂 进行校准 进行质控 输入标本检测项目 加载标本 标本测定 结果复核 报告。 10 主要分析参数 Assay Code：2 Point End；Reaction Time：10；Assay Point：1634；Wave Length Sec：660；Wave Length Prim：570；Sample N：6，

50、D：6.0694，I：9.0；R1：117 ；R3：39；Abs. Limit：32000 Increase；Calibration Type：Linear；Point：6；Span :3；Time Out：Full 160，Blank 20；SD Limit：0.1；Duplicate Limit：32000；Sensitivity Limit：0；S1 ABS Limit：0 100；Unit：mol/L；Technical Limit：1 180。10 结果计算计算公式：结合胆红素浓度（mol/L）校准液结合胆红素浓度nm660570nm660570A）（）（校准液标本A（mol/L）仪

51、器根据此公式自动给出每个标本测定结果11 检验结果的报告及范围11.111.1 结果的报告11.1.111.1.1 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.211.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.311.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。1811.211.2 报告范围：1.7342mol/L。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.112.1 精密度：总CV 2.9%4.8% 。12.212.

52、2 准确度：回收率 99.2%106.7%。12.312.3 线性范围：1.0180mol/L。12.412.4 方法的有限性及干扰因素：甘油三酯达到 10.2 mmol/L 时影响小于10%，血红蛋白达到 200mg/L 时影响小于 10%。13 参考范围及医学决定水平参考范围：05mol/L 14 临床意义14.114.1 血清结合胆红素常和总胆红素一起用于黄疸的诊断和鉴别诊断。结合(直接)胆红素是重要的常用肝功能指标。14.214.2 肝炎、肝硬化时肝细胞受损引起的肝细胞性胆红素和胆汁性肝硬化、胆道梗阻等所致的梗阻性胆红素，均有直接胆红素增高的情况。15 结果审核以及分析与相关项目的联系

53、15.115.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.215.2 审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.315.3 相关项目：审核与总胆红素（DBil） 、丙氨酸氨基转移酶（ALT） 、碱性磷酸酶（ALP） 、谷胺酰转移酶（GGT）的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16 威胁生命的“紧急值”及报告规定（此项不作规定）17 有关引用程序与文件17.117.1 Hitachi 7600 型自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.217.2生化检验室内质控标准操作程序。17.317.3检验结果审核程序。17.417.4标本

54、送检和接收程序。18 参考文献18.118.1 Tietz， N. W. (Ed)， Fndamentals of Clinical Chemistry，3rd Edition， W.B.Sanders， 1987.18.218.2 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004. 18.318.3 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006. 19 本 SOP 变动程序任何一位使用本 SOP 的工作人员如提出对本 SOP 改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本 SOP 作出改动，但必须先报经专

55、业主管和科主任批准。20 本 SOP 涉及的记录与表单20.120.1 试剂装载记录表20.220.2 试剂质量记录表20.320.3 质控记录1920.420.4 失控及失控处理记录20.520.5 检验结果审核记录20宁波市第九医院检验科管理文件项目 SOP 文件编号：SH-FXXM02-05版本：版本：2010-A/02010-A/0生效日期：20101001五五 血清总胆汁酸测定第 1 页共 3 页1 检验申请 单独检验项目申请：血清总胆汁酸测定(缩写 TBA)；组合项目申请：肝功能测定加选本项目。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.12.1 标本采集2.1.12.1.

56、1 常规静脉采血约 2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子 SST 真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子 PST 试管。2.1.22.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.32.1.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.1.42.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.52.1.5 下列标本为不合格标本2.1.5.12.1.5.1 标本量不足：少于 0.3ml 的全血标本，或少于 0.1ml 的血清或血浆。2.1.5.22.1.5.

57、2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.32.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.42.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.22.2 标本保存2.2.12.2.1 接收标本后在 30min 内将标本离心分离出血清。2.2.22.2.2 标本保存时间：室温（1525）下可稳定一周，在冰箱中（28）稳定一个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过 1 天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.32.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置 28冰箱内保存 7 天。2.32.3 标本采集的注意事项2.3.12.3.1 采血前使

58、受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.22.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3 方法原理循环酶法。胆汁酸被 3a羟基类固醇脱氢酶（3aHSDH）及 硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（ThioNAD）氧化，生成 3 酮类固醇及 硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（ThioNAD） 。生成的 3 酮类固醇在 3a羟基类固醇脱氢酶及 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（ThioNAD）存在下，生成胆汁酸及 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（ThioNAD） 。如此进行循环反应，最后测定生成的 硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（ThioNAD）的吸光度，求得胆汁酸浓度值。4 试剂及其他

59、用品4.14.1 试剂：酶循环法测定总胆汁酸试剂盒，由宁波美康生物科技有限公司出品。4.24.2 试剂盒保存：保存 225，试剂未启封情况下可稳定至标签的失效期。21启封使用后在仪器的试剂仓冰箱中可以稳定 30 天。4.34.3 试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。4.44.4 试剂盒主要成分：试剂：硫代NAD 2mmol/L，Goods 缓冲液 200 mmol / L，pH 7.0。试剂：3HSD 15 kU/L，NADH 3 mmol/L，Goods 缓冲液 200 mmol/L，pH 8.0。5 校准品与校准模式5.15.1 校准品：由试剂盒配套的校准液。5.25.2 校准

60、类型和数目：线性模式，4 个校准点。5.35.3 校准周期：校准间隔时间 7 天。但在：更换试剂批号或出现质控漂移时；当仪器进行全面保养后；重要零件更换后；均须进行一次校准。5.45.4 校准液重建方法：即开即用，无需特殊准备。6 质控品与室内质控规则6.6. 1质控品采用由 BIO-RAD 公司提供的定值质控血清，产品号为 616/1UN6.26.2 质控液重建方法：即开即用，无需特殊准备。6.36.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.46.4 质控规则：采用 Westgard 多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.56.5 如出现失控情况，按室内质控标准