中蒙药制剂分析新方法新技术

1、中蒙药制剂分析的新方法新技术姓名：黄月学号：2011110087专业：药物化学摘要目的 通过介绍中蒙药制剂分析的新方法进一步了解中蒙药制剂分析的优点及好处。方法 以国内外大量有代表性的论文为依据进行分析和归纳整理。并简单举两个具体事例来进一步了解中蒙药制剂的新方法。结论 采用新的中蒙药制剂分析方法可以有效的控制其有效性及安全性。关键词：中蒙药制剂 二维液相色谱-质谱联用技术 复方银黄制剂 近红外光谱 复方丹参片 前言 中蒙药是中华民族宝贵的文化遗产，是中医用来防病和治病的重要手段，由于其独特的理论思想体系及悠久的临床实践史，已经受到世界各国的广泛关注。众所周知，中蒙药及其制剂是一个非常复杂的有

2、机整体，其中包括很多复杂的化学成分，即使是一味中药都包含很多不同的成分，而复方制剂中的化学成分更是数不胜数;另外，人的机体是一个无时无刻不在变化、复杂而又充满联系的有机体，而中药及其制剂防病治病的思想恰恰符合了人体是一个复杂且充满无限联系的有机体的特点，其所产生的疗效也是多种成分多重贡献的结果。1、中蒙药制剂的的分类中国药典（2000年版）一部共记载了二十六种：丸剂、胶剂、膏药、颗粒剂、滴眼剂、散剂、合剂、露剂、糖浆剂、软膏剂、片剂、酒剂、茶剂、滴丸剂、注射剂、锭剂、酊剂、搽剂、胶囊剂、滴鼻剂、栓剂、巴布膏剂、橡胶膏剂、气雾剂喷雾剂、煎膏剂（膏滋）、流浸膏剂与浸膏剂。液体制(用药材提取物制备的

3、液体制剂):合剂、糖浆剂、酒剂、茶剂、酊剂 滴鼻剂、滴眼剂、露剂、搽剂等。无植物组织与细胞，故无显微鉴别。半固体制剂（软膏）：药物、药材细粉、药材提取物与适量基质混合制成的半固体外用制剂。常用基质有油脂性、水溶性、乳剂型（乳膏剂）；检查项目包括装量、微生物。半流体制剂（药材提取液的浓缩液）：煎膏剂(膏滋)、流浸膏剂与浸膏剂（半流体或固体），无植物组织与细胞，故无显微鉴别。固体制剂（药材提取物、药材粉末加赋形剂、制备而成）：丸剂、胶剂、颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、锭剂、胶剂、茶剂、栓剂。有植物组织与细胞，可做显微鉴别。2、中药制剂分析的特点2、1中药制剂化学成分的多样性与复杂性任何一种中药的化学

4、成分都十分复杂，包括各类型的有机和无机化合物，由几味以至几十味药组成的复杂中药制剂所含成分更为复杂；中药制剂化学成分可以是不同类别的，如生物碱，黄酮等，在相同类别的成分中可能含有性质相近的多种同系物；中药制剂中所含成分的含量高低差别很大，含量高者可达百分之几十，低者可至千成分之几；有些化学成分还会相互影响，含量发生较大变化，给质量分析增加难度。2.2中药制剂原料药材质量的差别原料药材的品种，规格，产地，生长环境，药用部位，采收季节，加工方法等均会影响药材中有效成分的含量，从而影响中药制剂的质量和临床疗效。炮制方法的影响中药材经加工炮制后，其化学成分，性味，药理作用等方面都会发生一定的变化，为了

5、保证中药制剂的质量，药材应严格遵守中药炮制规范，对炮制工艺，成品质量都要严格把关，才能保证中药制剂质量稳定，可靠。2.3以中医药理论为指导原则，评价中药制剂质量中药制剂的组方原则有君，臣，佐，使之分，在进行质量分析时，首先进行组方分析，按功能主治分出君，臣，佐，使药味，选择合适的化学成分为指标来评价中药制剂的质量。由于中药成分的复杂性，药理作用的多方面性，难于以某个或某些成分的含量评价中药制剂质量。目前多根据制剂中单味药有效成分的特性建立控制制剂中某味药质和量的检测方法，随方分析主药或药群的有效成分，进行质量评价。在检测成分上也要注意中医临床功能主治与现代药理学相结合进行研究。2.4中药制剂工

6、艺及辅料的特殊性同一种中药制剂，由于不同生产厂家生产工艺上的差别，将会影响到制剂中化学成分的含量。中药制剂的剂型种类繁多，制备方法各异，工艺较为复杂，很多在单味中药鲜品中存在的化学成分，经过炮制或制备工艺中经加热处理后，结构发生变化，已不复存在或含量甚微，有些则在制备过程中因挥发，分解，沉淀等原因使质量分析更加困难。中药制剂所用辅料各式各样，如蜂蜜，蜂蜡，糯米粉，植物油，铅丹等都可作为辅料，这些辅料的存在，则对质量分析均有一定的影响，需选择合适的方法，将其干扰排除，才能获得准确的分析结果。2.5中药制剂杂质来源的多途径性中药制剂的杂质来源要比化学制剂复杂的多，由生产过程中带入的；药材中非药用部

7、位及未除净的泥沙；药材中所含的重金属及残留农药；包装，保管不当所产生的霉变，走油，泛糖，虫蛀等产生的杂质；洗涤原料的水质二次污染等途径均可混入杂质。所以中药制剂易含有较高的重金属，砷盐，残留农药等杂质。2.6中药制剂有效成分的非单一性中药制剂产生的疗效不是某单一成分作用的结果，也不是某些成分简单作用的加和，是各成分之间的协同作用。用一种成分衡量其质量优劣有失偏颇，某单一成分的含量高低并不一定与其临床作用效果具有简单的线性关系，检测任何一种活性成分均不能反映它所体现的整体疗效。研究复方中药制剂的物质基础，应用灵敏可靠的分析仪器，测定多种有效成分，才能更加科学，客观地评价中药制剂质量。3、中蒙药制

8、剂分析的新方法、新技术3.1二维液相色谱-质谱联用技术在复方银黄制剂成分研究中的应用银黄制剂是由金银花和黄芩两种中药材经过提取、加工而成的中药制剂，同时具有金银花和黄答的多种药理作用，可以抗菌消炎、清热解毒，临床上多用于急性扁桃体炎、咽喉炎、上呼吸道感染等症的治疗。目前，银黄制剂的种类主要有银黄口服液、银黄颗粒、银黄胶囊、银黄片、银黄冲剂、银黄注射液等。据报道，对于银黄制剂的质量控制多为采用高效液相色谱法测定其中两种主要成分绿原酸和黄芩苷的含量1-5和其指纹图谱协6-10的研究，但中药复方的化学成分非常复杂，其中包括上百种化学成分，据目前的报道还不能全面地反映银黄制剂的内在组分信息。为了更好地

9、将其应用于临床疾病的治疗，全面地对其进行质量控制，需要深入研究其中的活性成分。对混合提取液进行高效液相色谱分离，采用离线二维液相色谱方法对其中的有效成分进行二维分离，采用液-质联用技术对混合提取液中的组分进行了初步分析，为复方银黄制剂的研究提供了更广阔的思路，为其进行全面的质量控制奠定基础。将样品溶液按照液相色谱条件:LC-20AT，岛津高效液相色谱仪，SPD-20A检测器，N-2000色谱工作站;色谱柱为 Hypersil CN基柱 (250mm×4.6mmi.d.，5m，大连依利特分析仪器有限公司);流动相:A液为甲醇，B液为0.1%(v/v)甲酸水溶液;梯度洗脱:0-10min

10、，10%A-20%A;10-20min，20%A-40%A;20-30min，40%A-45%A:30-40min，45%A-50%A；流速为 1.0mL·min-1;检测波长为254nm;进样量:20L。进样，从进样开始每5min收集一次流分，重复进样6次并收集流分。合并相同时间段收集的流分并旋转浓缩，自然风干后，用70%甲醇水溶液定量至0.2mL，得到8个流分。取每个流分按照液相色谱条件:LC-20AT岛津高效液相色谱仪，SPD-20A检测器，N-2000色谱工作站;色谱柱为 Agilent Eclipse XDB-C18:色谱柱(250mm×4.6mm,5m，Unim

11、iero Technologies .Inc,USA);流动相：A液为乙腈，B液为0.1%(v/v)甲酸水溶液;梯度洗脱：0-20min，10%A-35%A;20-40min，35%A-60%A；检测波长:254nm；流速：1.0mL·min-l；进样量:20L。进样。图1金银花和黄芩的混合提取液在CN柱上的分离色谱图图2金银花和黄芩的混合提取液在C18柱上的分离色谱图 在一维分离中CN柱上得到了16种组分，C18柱上得到了20种组分。在二维分离中共得到53种组分，比一维分离中得到了更多的组分。但是，从二维图上看到，二维的分离仍然有些不完全，有些组分还分不开，仍需进行多维分离。以CN

12、柱为第一维分离柱，C18柱为第二维分离柱，构建了一个二维色谱分离体系。图3、4分别为收集的每一个流分在第二维C18柱上的色谱分离图。从图3、4可以看到，至少有53种成分得到了较好的分离，比一维色谱显著地提高了分离效率。图3 流分1，2，3，4在C18柱上的分离色谱图图4流分5，6，7，8在CI，柱上的分离色谱图3.2 近红外光谱分析技术在复方丹参片质量控制中的应用传统中药的质量控制和分析方法也正向着一体化与综合性的方向前进。同时，我国对于中药及其制剂质量控制手段也在不断的革新，一些新技术也被人们广泛接受。近年来，近红外光谱分析技术得到了飞速的发展，且在农业11，食品及石油化学工业降等方面取得了

13、较好的成绩。因此，应用近红外光谱技术对中药及其制剂进行全面、有效、快速的质量控制具有非常大的潜力。复方丹参片为中国药典收载的中成药，其疗效确切，不良反应少，且价格低廉，所以为临床常用的复方制剂之一12。众所周知，复方丹参片所含成分复杂多样，其疗效可能是通过多靶点、多途径的作用形式发挥，很难确定哪一种药材是有效药材或哪几种化学成分是有效成分。同时，因为复方丹参片生产厂家众多，不同厂家不同批次间有效成分的含量差异较大，仅用其中任何一种或几种活性成分为控制指标则不能完全反映其所体现的整体疗效13。因此，现有的质量控制方法，诸如一种或多种有效成分的含量测定，不能满足从中药制剂的整体化学成分出发且快速控

14、制其质量的要求。另外，由于复方丹参片成分与其药效间的复杂性，现有的化学指纹图谱质量控制方法不能体现复方丹参片中多种成分间“协同作用”或“拮抗作用”的药效特征。因此，特别需要将药效和不同厂家不同批次复方丹参片化学成分及含量之间的差异有机结合起来，从而满足全面、有效、快速控制复方丹参片质量的要求。目前，中国药典采用高效液相色谱法（HPCL)控制复方丹参片质量，定量检测指标是丹参酮IIA和丹酚酸14。也有学者针对一种或几种药材中不同类型的有效成分的鉴别或含量测定对复方丹参片的质量进行控制15-22。但是，复方丹参片一为复方制剂，所含成分多种多样，通过多靶点、多途径的作用形式发挥其疗效，很难确定哪一种

15、药材是有效药材或哪几种化学成分是有效成分同时因为复方丹参。采用近红外光谱分析技术建立不同种党参药材随机森林分类模型。采用近红外光-谱分析技术建立一种快速区别不同产地党参药材的随机森林、决策树以及K-最近邻分类模型。采用近红外光谱技术获得复方丹参片粉末的光谱指纹图谱，并利用偏最小二乘多元线性回归建立复方丹参片近红外光谱与其活血化瘀药效之间的定量谱-效关系模型。结论中蒙药制剂分析在中蒙药的应用中占有和重要的位置。中蒙药制剂的质量控制则是确定其能安全、有效地被利用的重要保证。本文通过对金银花和黄芩分别提取，制得提取液后，参照中国药典银黄口服液项下比例混合，得到混合提取液后并应用二维液相色谱-质谱联用

16、技术对其进行研究。近年来，随着药物分析工作者的努力及分析技术的发展，中药质量控制逐渐向综合性和一体化的方向发展。在众多综合性分析方法中，色谱指纹技术仍然是最普遍的用于中药及其制剂的质量控制的一种方法。与色谱指纹图谱一样，近红外光谱也是一种能够反映中药及其制剂各成分综合信息的指纹图谱，且更侧重于中药及其制剂的整体信息的体现，因此也同样用于中药及其制剂的质量评价。这些新技术、新方法将会为中蒙药制剂分析锦上添花。参考文献1 张俊玮，杨翠微.银黄口服液中黄芬营与绿原酸的含量测定J.湖南医药导报，2002，8(7):389-390.2 朱啸风，孙钦美，刘景俊.银黄口服液中黄答普和绿原酸含量的测定J1.齐

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