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文档简介
1、转基因食品检测转基因食品检测目录目录 一、转基因食品简介 二、转基因食品检验流程 三、转基因食品检验实验室工作区域的设置 四、转基因食品检测实验室仪器配置 五、主要食用菌中转基因食品检测(举例) 一、转基因食品简介转基因食品, 就是通过基因工程技术将一种或几种外源性基因转移到某种特定的生物体中,并使其有效地表达出相应的产物(多肽或蛋白质),此过程叫转基因。以转基因生物为原料加工生产的食品就是转基因食品。根据转基因食品来源的不同可分为植物性转基因食品,动物性转基因食品和微生物性转基因食品。转基因食品具有很多优点,如:可增加作物产量,可以降低生产成本,可增强作物抗虫害、抗病毒等的能力;提高农产品耐
2、贮性。但转基因食品在安全性以及环境污染等问题使转基因食品一直存在争议。 二、转基因食品检验流程实验室样品到样验收(确定是否具备检验的工作条件) 混样 获取测试样品 测试样品的制备(待检状态) 核酸和(或)蛋白等目标物质的提取 PCR实验(包括扩增和产物分析)和(或)蛋白质检测 结果判定 结果表述,出具检验报告。 三、转基因食品检验实验室工作区域的设置四、转基因食品检测实验室仪器配置仪器设备仪器设备功能作用功能作用电子天平(感量1mg)用于样品的称量。粉碎机样品粉碎。液氮罐储存液氮。磁力搅拌器用于含沉淀物液体样品或固液混合物的加热混匀。旋涡振荡器用于试样的振荡混匀。恒温金属浴用于试样的恒温孵育过
3、程,温浴温度常为37和65。台式离心机用于样品离心,选用普通高速离心机即可。高速冷冻离心机用于样品离心。微型离心机用于样品快速微量离心。pH计用于pH测量。核酸蛋白分析仪用于DNA浓度和纯度测定。超净工作台用于PCR扩增区加样过程,提供局部超净工作环境。(垂直流)生物安全柜用于用于PCR扩增区加样过程,保护人员、样品和环境。四、转基因食品检测实验室仪器配置仪器设备仪器设备功能用途功能用途PCR基因扩增仪用于相关基因的扩增分析实时荧光定量PCR仪用于相关基因的快速、定量分析。微波炉用于琼脂糖凝胶的制备。电泳仪用于PCR扩增产物的电泳分离。电泳槽凝胶电泳系统的核心部分。凝胶成像系统用于PCR电泳后
4、观察、拍照、记录和分析。高温干燥箱用于样品、器皿的干燥。高压灭菌锅灭菌试剂的制备、器皿灭菌。微量移液器用于PCR板的移液操作。常用实验量程为0.2L2.0L, 2L20L, 20L200L, 200L1000L。冰箱28冰箱,-20冰箱和-80冰箱。用于样品、试剂、标本的储存。纯水机实验用纯水、超纯水的制备。制冰机用于实验室冰块的制备。耗材PCR反应管,离心管(1.5mL,2mL,15mL,50mL),移液器枪头,PE手套等五、主要食用菌中转基因食品检测(举例) 主要食用菌(如杏鲍菇、红菇、姬松茸、香菇、草菇、牛肝菌、鸡腿菇、金针菇、双孢蘑菇、猪肚菇、凤尾菇、小平菇、秀珍菇、猴头菇、金顶侧耳、
5、茶树菇、竹荪、黑木耳、白木耳等)中转基因成分的检测。实验原理:样品经过提取 后,针对转基因食用菌所导入的常见外源基因的基因序列设计引物,通过 技术,对外源基因的 片段进行特异性扩增,根据实验结果,判定该食用菌样品是否含有外源基因成分。五、主要食用菌中转基因食品检测(举例)实验仪器配置:1、电子天平:感量为0.001与0.0001。2、粉碎机。3、鼓风干燥箱。4、微量移液器:体积范围是0.20L2.0L, 2L20, 20200, 2001000,枪头用前应高压灭菌处理。5、旋涡振荡器。6、恒温金属浴(或恒温水浴锅):恒温范围为室温100 ,精度为0.5 。7、台式高速离心机,低温冷冻高速离心机
6、,微型离心机。五、主要食用菌中转基因食品检测(举例)实验仪器配置:8、 DNA 浓缩仪。 9、核酸蛋白分析仪。10、PCR 仪。 11、电泳仪、电泳槽 12、凝胶分析成像系统。 13、PCR超净工作台或生物安全柜。 14、微波炉。 15、高压灭菌锅。 16、PH 计。 17、制冰机。 18、纯水机。 19、低温冰箱(-20以下)。 20.真菌NDA提取试剂盒。五、主要食用菌中转基因食品检测(举例)实验主要操作步骤:DNA提取DNA 浓度与纯度测定定性定性PCRPCR检测检测结果判断结果判断天平、干燥箱、粉碎机、真菌DNA提取试剂盒、移液器、旋涡振荡器、金属浴、高速台式离心机、高速冷冻离心机核酸蛋白分析仪1、PC
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