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文档简介
1、组织学和胚胎学组织学和胚胎学 Histology and Embryology授课教师授课教师 焦艳焦艳首先,开课前问几个问题? 你是由什么构成的? 你是怎么来的?肾组织胚 胎本课程的结构 本课程共十五章,共20学时 课程共分成两个部分 基本组织 器官与系统绪论绪论一、组织学和胚胎学的学习内容组织学(histology):用显微镜技术研究正常 人体微细结构及其相关 功能的学科 胚胎学(embryology):研究人体发生、 生长及其发育机 制的一门科学胚胎学研究内容:受精卵组织学研究内容:细胞细胞间质组织上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织器官和系统人体胚胎儿(28周)(938周)与其它课程的关系
2、 基础课程 结构决定了功能,学习组织学是为学习生理学打基础 正常的组织结构是异常的病理改变的对照标本,只有掌握了“正常”,才能识别“异常”,所以学习组织学也是为学习病理学打基础正常肾皮质急性渗出性肾小球肾炎组织学的发展二、组织学和胚胎学研究技术 光学显微镜术 电子显微镜术 组织化学技术 其他技术(一)光镜技术(LM)分辨率约为0.2m可将物体放大约1500倍。石蜡切片术(paraffin sectioning)其基本操作程序是: 取材固定(甲醛)脱水(酒精)透明(二甲苯)包埋(石蜡)切片(切片机,5-7m)脱蜡(二甲苯)染色(HE染色)封固最常用的是苏木精伊红染色法 (hematoxylin
3、eosin staining),简称H-E染色法 苏木精为碱性染料,能将细胞核内的染色质和胞质中的核糖体染成紫兰色。伊红为酸性染料,能使细胞质和细胞外基质的成分染成红色。何谓嗜碱性和嗜酸性? 组织中的某些结构,易于被碱性染料着色的性质,称嗜碱性(basophilia),嗜碱性结构可被苏木精染成紫蓝色 易于被酸性染料着色的性质,称嗜酸性(acidophilia)。嗜酸性结构可被伊红染成红色 对碱性或酸性染料亲和力均不强者,称为中性其它常用特殊染色法 镀银染色:如将神经组织切片标本浸泡在硝酸银溶液中,可将神经元染成棕黑色或棕黄色。 若将网状组织切片标本浸泡在氢氧胺银溶液中,再经5%甲醛液还原,能将
4、网状纤维染成黑色,胶原纤维呈褐色。 醛复红弹性纤维染成紫色 有些结构染色后其呈现的颜色与所用染料的颜色不同,例如用蓝色染料(甲苯胺蓝)染肥大细胞时,其胞质中的颗粒呈现紫红色,这种现象称为异染性除石蜡切片外,还有 火棉胶包埋:眼球、睾丸 冰冻切片将组织块立即放置到液氮(-196)内快速冻结,用恒冷箱切片机制成冷冻切片。 涂片将游离的细胞直接涂在玻片上染色,如血液涂片、宫颈粘液涂片 铺片将疏松结缔组织、肠系膜等撕成薄片,铺在载玻片上 磨片将骨、牙等硬组织切割成片后再磨成薄片(二)电镜技术 电子显微镜与一般光镜不同:以电子束代替可见光;以电子透镜代替光学透镜;用荧光屏使电子束呈像;可将微细结构放大几
5、万倍至几十万倍,分辨率可达0.2nm,而光学显微镜只放大约1000倍,最高分辨为0.2m。1. 透射电镜术(TEM) 取材(更新鲜)和固定(戊二醛和锇酸) 脱水和包埋 切片:用超薄切片机切片,切成厚约50100nm的超薄片。 染色(硝酸铅、醋酸铀等重金属盐)超薄切片机透射电镜带扫描附件, 可观察样品内部及表面的超微结构透射电镜下的线粒体2. 扫描电镜术(SEM) 用于观察组织、细胞和器官表面的立体结构,分析物体的立体形象。不需要制成薄切片。 固定脱水干燥喷镀金属扫描电镜下的红细胞(三)组织化学术 是应用物理、化学反应原理,研究细胞组织内某种化学物质的分布和数量,从而探讨与其有关的技能活动。 一般组织化学:PAS反应(使细胞内的多糖形成紫红色) 糖类PAS 脂类油红、尼罗蓝、苏丹类燃料 核酸福尔根反应(DNA) 甲基绿-派若宁反应:DNA绿色,RNA红色酶类通过酶的催化活性以表示酶的存在 基本原理是:多醛糖强氧化剂过碘酸氧 化品红硫酸复合物(希夫试剂)结 合紫红色反应物肝细胞PAS反应示糖原颗粒25免疫组织化学 是根据抗原与抗体特异性结合的原理,检测肽和蛋白质的技术。免疫组织化学显示
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