不同时点分别结扎左、右颈总动脉建立大鼠血管性痴呆模型

1、不同时点分别结扎左、右颈总动脉建立大鼠血管性痴呆模型    None but a wise man can employ leisure well.                      作者：黄新武 李华 秦大莲 陈美娟 张红 章卓【摘要】  目的 改良大鼠血管性

2、痴呆（VD）双侧颈总动脉永久性结扎模型，提高模型动物存活率。方法 采取间隔3 d分2次结扎双侧颈总动脉建立VD模型，观察大鼠的成活率，及术后4 w和8 w学习记忆能力变化。结果 改良模型组动物存活率（96.0%）明显高于传统模型。术后4 w和8 w，该模型组大鼠学习记忆能力障碍明显，显著低于假手术对照组()。结论 间断永久性结扎双侧颈总动脉法是建造大鼠VD模型的理想方法。 Everybody's business is nobody's business.  【关键词】 

3、; 动物模型；血管性痴呆；Morris水迷宫；大鼠永久性结扎双侧颈总动脉模型是血管性痴呆（VD）研究中常用的模型之一1，该模型较好地模拟了人类因动脉粥样硬化、动脉管腔狭窄等因素导致的VD。而且，永久性结扎双侧颈总动脉导致VD的老年大鼠在术后2个月学习记忆能力仍无恢复趋势，这有利于药物疗效的动态观察，是VD研究的常用模型。传统方法因双侧颈总动脉同时永久性结扎，对动物创伤大，死亡率高，导致实验成本升高，标本获取困难，实验周期延长。本文拟对传统方法进行改良，探讨不同时点分别结扎左、右颈总动脉建立VD模型的成功率。1  材料与方法1.1  动物及仪器&

4、#160;God defend me from my friends; form my enemy I can defend myself.  健康雄性SD大鼠80只， 24月龄以上老年大鼠，体重（320±20）g，由泸州医学院实验动物科提供，为1级合格动物，动物合格证号：2401115。      MT200 Morris水迷宫视频分析系统，成都泰盟科技有限公司生产(医药学/临床医学论文 )。I know no such thing as genius, it is nothing but labour

5、 and diligence.  1.2  实验方法 Joy put heart into a man.  大鼠随机分为假手术对照组（30只）、模型组（50只）。具体实验方法如下：模型组，大鼠术前12 h禁食，自由饮水。用1戊巴比妥钠（3 ml/kg）腹腔注射麻醉大鼠，将大鼠仰卧位固定于鼠台，颈部皮肤剪毛备皮，碘伏酒精常规消毒。切口位于颈正中线左侧旁开0.5 cm处，长约1 cm。钝性分离皮下组织后，于切口正下方的斜方肌与气管夹角处可见左侧颈总动脉搏动。分离出左侧颈总动脉后，以4号丝线双重结扎。术中动作轻

6、柔，避免钳夹和过分牵拉迷走神经，注意无菌原则。行间断缝合。术后3 d每天以碘酒消毒伤口及周围皮肤。术后第4天，于颈正中线右侧旁开0.5 cm处切开，分离并双重结扎右侧颈总动脉，其余操作同前。假手术对照组：双侧颈总动脉不结扎，余同模型组。1.3  指标测定 术后观察大鼠一般情况及成活率，于术后4 w及8 w分别检测学习记忆成绩。使用Morris水迷宫对大鼠进行学习记忆能力的测定2。Morris水迷宫实验分为两部分： 定位航行实验：用于测量大鼠对水迷宫学习和记忆的获取能力。实验历时6 d，第1天让大鼠自由游泳

7、2 min；从第2天起，每天分上、下午两段，每段训练4次。训练时随机选择一个入水点，将大鼠面向池壁放入水中， 系统自动记录大鼠寻找并爬上平台时所需时间(逃避潜伏期)及运动轨迹，每次训练间隔为60 s。如果大鼠在120 s内未找到平台，须将其引至平台，这时潜伏期计为120 s。空间搜索实验：在第6天最后一次训练后撤除水下平台，在同一入水点将大鼠面向池壁放入水中，系统自动记录其在120 s内跨过原平台相应位置的次数及运动轨迹。1.4  统计学分析 Quality is better than quantity

8、.  计量资料以x±s表示，使用SPSS13.0软件进行单因素方差分析。Nature is the glass reflecting truth.  2  结  果    模型组术后死亡2只，其余全部存活，存活率96.0%，一般情况良好。术后4 w和8 w，与对照组比较，模型组大鼠逃避潜伏期均明显延长，在120 s内穿越平台的次数明显减少（P<0.05）。模型组在4 w和8 w之间比较差异无统计学意义。见表1、表2、表3。表1&#

9、160; 4 w大鼠在不同时间平均逃避潜伏期的比较(略)表2  8 w大鼠在不同时间平均逃避潜伏期的比较(略)表3  空间搜索实验120 s通过平台次数(略)Throw away the apple because of the core.  3  讨  论Answer a fool according to his folly.      VD是由一系列脑血管因素导致脑组织损害引起的痴呆综合征。患者表现为记忆及认知

10、等功能障碍综合征，不仅严重损害患者的健康，影响患者的生命质量，也给家庭和社会带来沉重的负担。在我国11个城市流行病学调查结果发现，60岁以上人群中VD的患病率为324/10万人口，老年性痴呆（AD）为238/10万人口，VD占各类痴呆的第一位。VD患者的平均生存时间为41个月，5年内死亡率达60以上3。并且随着人类社会的老龄化，VD已是国内外医学界研究的重要课题，由于对本病的发病机制尚不十分明确，亦缺少治疗本病的特效药物，因此建立理想的VD动物模型对于探明VD的病因、病理过程以及寻找和筛选防治药物具有重要意义。    永久性结扎双侧颈总动脉建立VD模型是

11、VD研究中常用的模型之一。有文献报道报道，该模型动物死亡率极高，存活率仅为12.5%4，本实验组在以往实验中采用该模型5发现的动物存活率也极低，实验成本加大，周期较长，给研究带来很多困难。而间断永久性结扎双侧颈总动脉改良模型大鼠恢复苏醒快，死亡率低，动物存活率高达96.0%。苏醒后对其进食和活动的影响也较小。通过Morris水迷宫检测，模型组大鼠逃避潜伏期明显延长，在规定时间内穿越平台的次数明显减少，空间记忆障碍明显，成功建造了大鼠痴呆模型，并且分别在术后4及8 w检测学习记忆能力无明显变化，说明模型稳定。其优点有：间断永久性结扎双侧颈总动脉改良模型采取颈正中线旁切口，利于分离颈总动

12、脉，减少了对迷走神经的牵拉和损伤；分次结扎，有利于脑部血流重新分配，脑部血供重新建立，机体逐渐代偿适应；这种模型更接近临床上常见的脑部慢性缺血的病理过程。因此认为，采取间断永久性结扎双侧颈总动脉可以成功建立VD模型，且较传统双侧颈总动脉同时永久性结扎建立VD模型更理想。【参考文献】  1 蔡 晶，杜 建.血管性痴呆动物模型的制作方法及其评价J.中医药学刊，2002；20(5):617.2 Vorhees CV，Williams MT.Morris water maze：procedures for assessing spatial and related forms of learning and memoryJ.Nature Protocols，2006；1(2)：848.3 Bomebroke M,Breteler NM.Epidemiology of nonAD dementiasJ.Clin Neur