国内外柑桔黄龙病发生与其监控技术应用

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2、分布概况重庆大学基因工程中心重庆大学基因工程中心2. 柑桔黄龙病常规鉴定方法重庆大学基因工程中心黄龙病症状诊断要领重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病典型症状叶片斑驳柑桔黄龙病典型症状叶片斑驳重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病（HLB）典型症状（1）重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病不同症状类型重庆大学基因工程中心柑桔叶片疑似症状重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病危害症状重庆大学基因工程中心黄龙病田间不同症状表现黄龙病田间不同症状表现I重庆大学基因工程中心黄龙病疑似症状类型黄龙病疑似症状类型重庆大学基因工程中心疑似柑橘黄龙病（疑似柑橘黄龙病（HLB） 症状症状 PCR检测检测除草剂药害除草剂药害重庆大学基因工程

3、中心重庆大学基因工程中心症状识别与分子监测技术症状识别与分子监测技术重庆大学基因工程中心黄龙病症状诊断要领黄龙病症状诊断要领重庆大学基因工程中心3. 柑桔黄龙病分子检验技术柑桔黄龙病分子检验技术无症带菌样品重庆大学基因工程中心诊断方法与检测技术诊断方法与检测技术重庆大学基因工程中心重庆大学基因工程中心重庆大学基因工程中心中心的硬件基础中心的硬件基础重庆大学基因工程中心已经建立的分子检测技术体系已经建立的分子检测技术体系重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病柑桔黄龙病重庆大学基因工程中心亚洲柑桔黄龙病病原细菌显亚洲柑桔黄龙病病原细菌显微镜形态图微镜形态图重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病菌常规柑桔黄龙病菌常

4、规PCR检测步骤检测步骤重庆大学基因工程中心黄龙病PCR样品制备方法重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病样品制备柑桔黄龙病样品制备重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病柑桔黄龙病PCR检测技术试剂检测技术试剂重庆大学基因工程中心PCR扩增程序扩增程序重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病（柑桔黄龙病（HLB）常规）常规PCR 早期诊断早期诊断重庆大学基因工程中心定量定量PCR的主要方法的主要方法重庆大学基因工程中心PCR引物的设计引物的设计重庆大学基因工程中心实时定量实时定量PCR方法原理和类型方法原理和类型重庆大学基因工程中心SYBR Green荧光染料法荧光染料法重庆大学基因工程中心TaqMan探针探针重庆大学

5、基因工程中心实时荧光实时荧光PCR检测设备检测设备重庆大学基因工程中心各种检测技术灵敏度应用比较各种检测技术灵敏度应用比较重庆大学基因工程中心实时实时PCR与常规与常规PCR相比的优势相比的优势重庆大学基因工程中心已经建立的分子检测技术体系已经建立的分子检测技术体系重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病分子检测试剂盒柑桔黄龙病分子检测试剂盒技术指标技术指标重庆大学基因工程中心分子检测的防治学意义分子检测的防治学意义重庆大学基因工程中心4.柑桔木虱监控技术柑桔木虱监控技术重庆大学基因工程中心亚洲柑桔木虱形态特征亚洲柑桔木虱形态特征:(D.citri)重庆大学基因工程中心柑桔木虱成虫与若虫柑桔木虱成虫与若

6、虫亚洲柑桔木虱非洲二点木虱重庆大学基因工程中心HLB田间扩散方式：田间扩散方式：重庆大学基因工程中心柑桔木虱生物学特性：柑桔木虱生物学特性：重庆大学基因工程中心柑桔种子传病柑桔种子传病 ？重庆大学基因工程中心防治策略与方法防治策略与方法重庆大学基因工程中心黄龙病传播介体黄龙病传播介体柑桔木虱柑桔木虱重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病昆虫传播媒介柑桔黄龙病昆虫传播媒介柑桔木虱柑桔木虱重庆大学基因工程中心传播媒介传播媒介:柑桔木虱（柑桔木虱（Diaphorina citri)重庆大学基因工程中心HLB自然和人为传播自然和人为传播重庆大学基因工程中心柑桔木虱生物学特性柑桔木虱生物学特性重庆大学基因工程中

7、心柑桔木虱药剂防治重庆大学基因工程中心柑桔木虱田间调查柑桔木虱田间调查重庆大学基因工程中心广西岑溪市送检样品检测结果广西岑溪市送检样品检测结果样品编号采集地点品种症状检测结果（Ct值）Cx01-0604-02市工农路农科所砂糖桔疑似症状N/ACx01-0604-02市工农路农科所砂糖桔叶片黄化N/ACx04-0604-01耀华村中间洞杨山桔疑似症状小叶N/ACx04-0604-02耀华村中间洞杨山桔疑似症状小叶N/ACx04-0604-03耀华村中间洞贡柑疑似症状N/ACx08-0604-01同福村沙洲组贡柑疑似症状N/ACx08-0604-02同福村沙洲组贡柑疑似症状N/ACx08-0604

8、-03同福村沙洲组贡柑疑似症状N/ACx00-0605-03樟木元凡8组砂糖桔叶片黄化27.7Cx16-0605-01新廉村河旁组夏橙黄化27.1Cx00-0606-03市岑罗路农科所砂糖桔 斑驳（典型）29.8Cx00-0606-04市岑罗路农科所砂糖桔 斑驳29.3Cx16-0606-02波塘街大南组砂糖桔疑似症状N/ACx16-0606-03波塘街大南组砂糖桔疑似症状N/ACx16-0606-04波塘镇波塘社区杨山桔斑驳30.6Cx16-0606-05波塘社区石榔杨山桔黄化N/ACx16-0606-06波塘社区石榔杨山桔黄化32.2Cx16-0606-07波塘社区庙脚组杨山桔斑驳32.2

9、重庆大学基因工程中心广西岑溪市送检样品检测结果广西岑溪市送检样品检测结果重庆大学基因工程中心重庆大学基因工程中心重庆大学基因工程中心5.柑桔黄龙病综合防控策略柑桔黄龙病综合防控策略重庆大学基因工程中心综合防除策略与措施综合防除策略与措施重庆大学基因工程中心柑桔木虱带菌率动态监测柑桔木虱带菌率动态监测重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病综合防除实例柑桔黄龙病综合防除实例重庆大学基因工程中心表表1. 柑橘黄龙病症状诊断和分子诊断柑橘黄龙病症状诊断和分子诊断 （广西（广西北海北海 1999年）年）第一轮 1 st round斑驳症状Routine Survey*分子诊断PCR Detection符合度Ag

10、reement %阳性样品数/样品总数No. Positive / No. Total 106/214109/214阳性检出率Positive Result %49.5350.9397.25阴性样品数/样品总数No. Negative/ No. Total112/214108/214阴性检出率Negative Result %52.3450.4796.43第二轮 2nd round 斑驳症状Routine Survey*分子诊断PCR Detection符合度Agreement%阳性样品数/样品总数No. Positive / No. Total 88/18293/182阳性检出率Positive Result %48.3551.194.62阴性样品数/样品总数No. Negative / No. Total 94/18289/182阴性检出率Negative Result %51.6548.994.68重庆大学基因工程中心柑桔黄龙病田间采样柑桔黄龙病田间采样重庆大学基因工程中心广西北海农场柑桔黄龙病监测与控制广西北海农场柑桔黄龙病监测与控制重庆大学基因工程中心国内外黄龙病防除案例国内外黄龙病防除案例重庆大学基因工程中心重庆大