植物基因工程疫苗的研究进展.docx

1、会做传真本栏目旨在从不同方面报道行业或企业的大型会议.欢迎提供会议残索。E-mai:sysc.zn江西博乘大药厂会,*保50段4猊斌米会业1好*t、水地址：江西有九江昼沙域工业因电话：“792-6893392河址：公司推荐产品：通效阿H西尊朋针头袍岐的钉北方金4i排止痢针2008年12月6-7日“京津冀畜牧善医科技创新交流会暨新思想、新观点、新方法论坛”部分内容摘煽植物基因工程疫苗的研究进展作者：王伟青李玉冰周珍辉曾俊安英凤王振玲北京农业职业学院畜牧兽医系改编：赵翠卿本刊编辑部植物基因工程疫苗是利用植物系统表达病原菌抗原蛋白一个或儿个亚单位的疫苗，它没有病原菌完整的侵染能力，却可以使机体对特异

2、的病毒或细菌产生免疫应答反应。由于转基因植物产生的疫苗对动物实施免疫只是简单地摄取含这种疫苗的植物组织或种子，所以这种疫苗不会被酶类所破坏，可通过机体肠道黏膜作用激发特异性免疫应答，使动物获得持久性疾病防御能力，旦没有或很少出现病原体的过敏反应。植物表达系统表达异源蛋白成本低，具有正确折叠的能力、口服安全等特点.受到了国内外研究人员的广泛关注,Curtiss等人在1990年首次报道了在烟草中表达链球前抗原蛋白SpaA.1997年转基因植物疫苗的第一次临床试验证明了植物基因工程疫苗在抵抗传染性疾病方面的巨大潜能°利用植物作为抗原表达和传递的载体已经成为当今生物技术研究的热点之一。一、植

3、物基因工程疫苗的优势植物基因工程疫苗是Mason等提出的,该技术是利用分子生物学技术把重组的疫苗基因导入植物，并使其在植物体内大髭表达的一类技术。植物基因工程疫苗与常规疫苗及其它新技术疫苗相比,具有以下优势：1.植物细胞具有全能性，能够再生植株,且植物细胞中很少含有潜在的动物或人类病原,更安全可辎。2. 可利用植物能够储藏蛋白质于种子中这一有利条件,进行简单方便地生产'储藏和发放疫苗。3. 用转基因植物生产疫苗是最经济的生产系统，因为需要的仅是阳光、水和肥料。4. 植物具有完整的真.核细胞表达系统,有利于禾纽蛋白质的准确组装和表达，使表达产物具有与高等动物细胞一致的免疫原性和生物活性。

4、5. 直接以植物的可食用部分进行曰服免疫,既可减去纯化过程,降低生产成本，又可避免繁琐的接种程序c与皮下注射相比,转基因植物产生的亚基或可溶性抗原的口服免疫常常在刺激免疫反应方面效率较高，只需要少屋的抗原。二、植物基因工程疫苗的研究进展(-)植物基因工程疫苗的研究进展随着基因工程疫苗的发展将转基因植物生产基因工程疫苗用人或动物疾病的防治已成为新兴的研究领域。利用植物基因工程生产畜禽疫苗比生产人用疫苗更具现实意义和发展潜力。尽管目前还没有培育出成熟的植物转基因畜禽疫苗品种，但相关研究已取得了一定成果。牛、猪、家禽、兔等的植物基因工程疫苗的研究情况，见下表。植物基因工程疫苗的研究应用物疫笛植物表达

5、蛋白他略)牛功妗薯、秘命芥口玲戎珥4(H4DV)VP1妥白烟草.4C±牛携以，(RPV)血彼去(0釜白俳染姓炎古4岩突蚩台(TGEV-S)和Ecoll不时热股(HB)睛(牛用口躇疫疡毒以荀也可用于祐村早)黄色玉米柱大杆茜LtB玉来样子*tH缄传豪姓胃肠炎珞#亚单待染姓炎恩状珥，S釜白精流行姓腹泻珥，杭原家禽璃件朵姓法氏去痛功,主矣括主保如姓枕原VP2蚩白1马普薯育传染姓女七管炎令#(IBV)S1的蛋白而h梅琦件染姓支七管炎(1BV)S1兔兑出血巩滴4(RHDV)AST/89(二)提高植物丞因工程疫苗表达量和免疫原性的研究进展植物基因工程疫苗抗原表达虽低是其发展的主要限制之-。虽然抗体

6、的表达量可以达到总的可溶性蛋白的8%,但是其他蛋白的表达水平仅有0.01%,几乎没有超过0.40%的。1. 在叶绿体中表达抗原蛋白在过去几年中，用叶绿体表达页组蛋白已取得了很大的进展。在烟草叶绿体中,Staub等人表达了含二硫键的人生长素，占植物可溶性蛋白的7%;Decosa等人表达了一种杀虫剂，占植物可溶性蛋白的45%;Daniell等人表达了其聚霍乱毒素亚单位,占植物可溶性蛋白的411%,是在核中表达的41倍;Tregoning等人表达了菌源的富含AT(7213%AT)和人工合成的富含GC(5213%AT)的破伤风毒素C片段，笛源的基因在叶绿体中更为稳定，两种蛋白分别占细胞可溶性蛋白的25

7、%和10%。2. 通过融合蛋白表达杭原妥白Tregoning等人设计了一个融合蛋白.来提高HbsAg在植物中的表达最。这个融合蛋白由一段大豆生(仲下页)2008年12月5-6日大连三仪动物药品有限公司举办的“科技成果产业化研讨会夔大连三仪集团创业十周年四顾”内容描编禽流感疫苗使用中应注意的4个问题主讲：周蛟北京市农林科学院畜牧兽医研究所摘编：赵翠卿本刊编辑部禽流感疫苗在使用过程中，常由于不能合理使用，而造成鸡群产蛋率下降或免疫不确实,从而为养殖户造成不必要的经济损失。只有了解使用中应注意的问题,才能合理使用禽流感疫苗。一、注意甲醪超标问题对A、B、C、D、E、F6个禽流感疫苗生产企业的Re-1

8、株、Re-1株、Re-1+Re-4株、H5+H9二价苗的21批次疫苗中甲醛进行含量测定,结果如下：表1禽滤感疫苗中的甲隧含量虫户厂本(.!%)ISH1tc-1<A2004124|O.SI%t.1A20顷06.66、6.6B9065.n%|B.u%I"C60*X,14%1.4C70201D.I?*1二、注意不同甲醛含量疫苗对产蛋率的影响不同甲醛含量的禽流感疫苗对产蛋率的影响不同,结果见表2表2不同甲醛含量的禽流感疫苗对产蛋率的影响姐剂血清中B2(Pg/nl)，蚩率（%）8佶平醉痍苗33.7170i.4傅甲醒疫苛57.5591未使用HS疫苗82.7092.5免疫6倍甲醛含量:疫苗可

9、见鸡冠萎缩、苍白。剖检可见卵泡数：B少、卵子数量少、卵子及子宫腔体积萎缩等。由上表可见,1.4倍甲醛疫苗对产蛋率影响不明显，而8倍甲醛疫苗对产蛋率的影响较明显.因此，免疫接种时应选择甲酷含量低的禽流感疫苗。三、注意禽流感疫苗免疫时间长短对产蛋率的影响由下表可见，随着禽流感免疫时间的延长，禽流感疫苗对产蛋率的影响逐渐减弱，产蛋率逐渐回升。表3禽流感免疫时间对产蛋率的影响inM尸釜率（%）JAJt疲后15天ttiiA1H5N1(M等2006333)*7.9980.1686.66tMtt85.02S5.1385.27*产蛋率：以免疫前的平均产蛋率为哀敬四、注意新城疫母源抗体对禽流感-新城疫重组二联活

10、疫苗的干扰表4新城疫母源杭体对禽流感抗体的影响cutn釜0X分AKSW1>flX.*<M(OIOOI209S)7.“S.33Hf奔4log2AHKD”二“第4.笛4.02.46由上表可见，养鸡生产中雏鸡母源抗体均大于41<?g2时，应用禽流感-新城疫二联活疫苗后，两种抗体均不升高,免疫空白期存在发生新城疫和旗流感的隐患，因此，免疫禽流感-新城疫二联活疫苗应在母源抗体低于41og2时进行。QB埴嘛日斯：2008-1219责编：赵早辩电话Q：744150942（校上页）长储存蛋白（VSPalphas）氨基端融合，信号肽的作用是引导HbsAg进入植物细

11、胞内质网，融合蛋白不裂解,在转基因植物内质网中大屋积累，提高了HbsAg的表达SoHuang等人在表达麻疹病最凝血素蛋白（H蛋白）时。构建了3种不同的表达结构:pSinH（只是H基因）,SinH/KDEL（加了一个内质网逗留序列）,Spinsp/H/KDEL（加了一个植物信号肽N端）。结果，表达虽最高的是SinH/KDEL。3. 加上强启动子CarriUo等在转基因马铃薯中表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1时,在VP1基因中加入一个或两个花椰菜病毒35S启动子（CaMV35s启动子）,或一个改进的启动子和烟草花叶病毒5,端非编码区相连，表达的蛋白量:也得到了提高。4. 提高免疫原桂的方法为多种疫苗的

12、联用Diane等人发现，在转基因烟草:中表达的麻疹凝血素蛋白，小鼠试验诱发低浓度的中和性抗体，但两种疫苗-DNA疫苗和转基因疫苗的联用，能产生高浓度的抗体。三、发展前景在疫苗的研制方面，应用多种生物技术研究和开发不同类型的高新技术制品，可提高疫苗的安全性和效力，并且在商品化方面取得更大的成就。众多的实验表明，单靠花椰菜花叶病毒（CaMV）的35S启动子效果并不理想，而II成型表达会造成不必要的能垃浪致，所以器官特异型强启动子是今后研究和应用的理想的启动子;叶绿体基因组表达也将提高重组表达蛋白员，进一步加强叶绿体转化的研究,并扩大叶绿体转化的植物种类。另外，黏膜佐剂和适当的抗原递呈细胞将提高口服亚单位疫苗的免疫效率，不同的