医疗器械无菌检验操作规程

1、医疗器械产品无菌检验操作规程1 目的通过无菌检验,确保灭菌后产品能够达到无菌的要求。2 适用范围适用于灭菌后医疗器械产品(列举的无菌检验。3 检验依据本厂产品注册标准(编号EN1174-1996 医疗器械灭菌产品中微生物数量的评估中国药典(2005年版GB14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分:生物试验方法GB15980-1995 一次性使用医疗用品卫生标准4 仪器、设备百级层流超净工作台、电热干燥箱、电热恒温培养箱、霉菌培养箱、压力蒸汽灭菌器、集菌仪(器、电子天平、PH计、冰箱、恒温水浴锅、酒精灯、三角烧瓶,接种环、无菌棉签、镊子,试管架,大试管若干等。5 无菌检

2、验室的环境要求5.1 无菌检验应在环境洁净度10000级下的局部百级的单向流空气区域内进行。5.2 缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空气应保持正压,阳性对照室与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验室与室外大气之间静压差应大于10Pa。无菌检验室的室温应保持1826,相对湿度:4565%。5.3 无菌检验室的单向流空气区、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室(区悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的监测。每年至少检测一次。5.4 无菌检验过程中应同时检查超净工作台单向流空气中的菌落数:每次操作时在层流空气所及台面的左中右置3个营养琼脂平板,暴露30m

3、in,于3035培养48小时,菌落数平均应不超过1CFU/平板。6 无菌检验前的准备6.1 器具灭菌、消毒6.2 人员、物料进入无菌检验室30min。7 无菌检验操作要求7.1 全过程必须严格执行无菌操作,防止微生物污染。7.2 使用玻璃器皿应轻取轻放,避免破损,以防培养物扩散。7.3 所有操作均应在近火焰区进行,且不得有大幅度或快速动作,以免搅动空气中的尘埃微粒。7.4 使用金属接种器具时,用前、用后均需灼烧灭菌。7.5 在接种培养物时,动作应轻、准,防止培养物溅出,产生汽溶胶,造成污染。7.6 操作过程中所有的带菌物品,用后均应作消毒、灭菌处理。可在检验过程中随用随时放入消毒液缸内浸泡或消

4、毒桶内,或在检验完成后经传递窗传至一般区,立即用压力蒸汽灭菌锅121灭菌30分钟。8 培养基制备8.1需气菌、厌气菌培养基(硫乙醇酸盐流体培养基的制备酪胨(胰酶水解15.0g葡萄糖5.0gL-胱氨酸0.5g硫乙醇酸钠0.5g(或硫乙醇酸(0.3ml酵母浸出粉5.0g氯化钠2.5g新配制的0.1%刃天青溶液1.0ml琼脂0.75g水1000ml除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调节pH为7.1±0.2。在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5,否刚需经100水浴加热到粉红色消失(不超过20分

5、钟迅速冷却,只限加热一次,并应防止被污染。8.2 霉菌培养基(改良马丁培养基的制备胨5.0g酵母浸出粉2.0g葡萄糖20.0g磷酸二氢钾1.0g硫酸镁0.5g水1000 ml除葡萄糖外,取上述成分混和,微温溶解,调节pH值约为6.8,煮沸,加葡萄糖溶解后,摇匀,滤清,调节pH为6.4±0.2。8.3 还可使用按处方生产的符合规定的脱水培养基,按照使用说明书配制。8.4 培养基配制后应尽快灭菌,避免微生物繁殖。一般采用高压蒸汽121灭菌30分钟。8.5 制备好的培养基应在225保存,在3周内使用。8.6 培养基的无菌性检查每批配制的培养基均应进行无菌性检查(可与产品无菌检验同步进行。检

6、查时,每批培养基随机取不少于5支(瓶培养14天,应无菌生长。9 稀释液、冲洗液的制备9.1 0.1%蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g,加水1000ml,微温溶解,滤清,分装后置入压力蒸汽灭菌器内,121灭菌30分钟后,于4保存备用。, 分装后置入压力蒸汽灭菌器内, 121灭菌30分钟后,于4保存备用9.2 pH7.0 氯化钠-蛋白胨缓冲液取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钾7.23g、氯化钠4.30g、蛋白胨1.0g,加水1000ml。微温溶解,滤清,分装后置入压力蒸汽灭菌器内,121灭菌30分钟后,于4保存备用。9.3 浸提介质:9g/L无菌氯化钠溶液,可直接从有证单位采购大输液。10 对照菌液制备10.1 无菌检验所用的菌株传代次数不得超过5代。10.3 采用平皿