组织中的糖、脂、蛋白质

1、三、生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测三、生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测的原理的原理 连一连连一连 糖类的检测糖类的检测蛋白质的检测蛋白质的检测脂肪的检测脂肪的检测 1 1实验步骤实验步骤50%酒精的作用酒精的作用洗掉浮色洗掉浮色现配现用现配现用2 2实验注意问题实验注意问题注：非还原糖注：非还原糖( (如蔗糖如蔗糖) )斐林试剂斐林试剂 现象现象: :(1)(1)还原糖鉴定实验还原糖鉴定实验 浅蓝色浅蓝色 Cu(OH)2的颜色的颜色 1.1.还原性糖与非还原性糖：还原性糖与非还原性糖： 还原性糖：还原性糖： 非还原性糖：非还原性糖：有还原性基团有还原性基团游离醛基或酮基的糖；游离醛基或酮基的

2、糖；如如:葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、纤维二糖。葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、纤维二糖。淀粉、纤维素、蔗糖、糖原。淀粉、纤维素、蔗糖、糖原。斐林试剂（现配现用）斐林试剂（现配现用）还原性糖（醛基）还原性糖（醛基）斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀3.反应原理反应原理: 还原糖中的醛基被还原糖中的醛基被Cu(OH)Cu(OH)2 2氧化，氧化，Cu(OH)Cu(OH)2 2被还原为被还原为CuCu2 2O O2.鉴定还原糖的试剂：鉴定还原糖的试剂：为什么不用植物的叶或西瓜与西红柿的果实为什么不用植物的叶或西瓜与西红柿的果实? ?？由于叶片中叶绿素的颜色较深，西瓜与西红柿的果实由于叶片中叶绿素的颜

3、色较深，西瓜与西红柿的果实颜色为红色，颜色为红色，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显导致实验现象不明显，因此，也不宜作实验材料。，因此，也不宜作实验材料。 2 2实验注意问题实验注意问题(1)(1)还原糖鉴定实验还原糖鉴定实验 浅色浅：浅色浅：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰。止颜色的干扰。 还原糖含量高：还原糖含量高：不能用马铃薯不能用马铃薯(含淀粉含淀粉)、甘蔗、甜、甘蔗、甜菜菜(含蔗糖含蔗糖)4.4.材料的要求材料的要求: :（2 2）鉴定淀粉的方法：）鉴定淀粉的方法：碘碘碘化钾溶液（

4、碘化钾溶液（蓝色蓝色）（3 3）脂肪的鉴定）脂肪的鉴定 1 1方法：方法：染色时间染色时间脂肪滴颜色脂肪滴颜色橘黄色橘黄色红色红色2323分分钟钟1 1分分钟钟苏丹III苏丹IV3 3鉴定脂肪的实验材料鉴定脂肪的实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花生种子（取其子叶）。最好选择富含脂肪的种子，如花生种子（取其子叶）。 2 2实验注意问题实验注意问题P18 2种方法种方法2.2.试剂试剂3 3在下列四支试管中分别加入一些物质。甲试管：在下列四支试管中分别加入一些物质。甲试管：豆浆；乙试管：人体必需的豆浆；乙试管：人体必需的8 8种氨基酸溶液；丙试管：种氨基酸溶液；丙试管：牛奶和蛋白酶；丁试管：人血

5、液中的红细胞和蒸馏水。牛奶和蛋白酶；丁试管：人血液中的红细胞和蒸馏水。上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后，有紫色反应上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后，有紫色反应的是的是( () ) A A甲、丁甲、丁 B B甲、乙、丁甲、乙、丁 C C甲、乙、丙甲、乙、丙 D D甲、丙、丁甲、丙、丁（4 4）蛋白质（三肽、多肽）的鉴定）蛋白质（三肽、多肽）的鉴定 2 2实验注意问题实验注意问题实验材料：实验材料： 最好选用富含蛋白质的生物组织（或器官），最好选用富含蛋白质的生物组织（或器官），植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋清植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋清 注注:蛋清作材料，必须稀释

6、。预留部分组织样液做对比蛋清作材料，必须稀释。预留部分组织样液做对比二苯胺试剂（二苯胺试剂（蓝色蓝色）（5 5）DNADNA的鉴定的鉴定 P26 P26 混合染色剂：混合染色剂：甲基绿使甲基绿使DNADNA分子显绿色。分子显绿色。 吡啰红使吡啰红使RNA分子显红色。分子显红色。试剂：试剂： 4 4用碘液、苏丹用碘液、苏丹染液和双缩脲试剂测得甲、乙、染液和双缩脲试剂测得甲、乙、丙三种植物的干种子中三大类有机物的颜色反应如下丙三种植物的干种子中三大类有机物的颜色反应如下表，其中表，其中“”的数量代表颜色反应深浅程度，下列的数量代表颜色反应深浅程度，下列有关说法不正确的是有关说法不正确的是( ()

7、)种子试剂种子试剂碘液碘液苏丹苏丹染液染液 双缩脲试剂双缩脲试剂甲甲乙乙丙丙 A. A.乙种子中主要含蛋白质乙种子中主要含蛋白质 B B碘液、苏丹碘液、苏丹染液和双缩脲试剂与相应的物质染液和双缩脲试剂与相应的物质发生的颜色反应分别是蓝色、橘黄色和紫色发生的颜色反应分别是蓝色、橘黄色和紫色 C C在观察颜色时有可能用到光学显微镜在观察颜色时有可能用到光学显微镜 D D这三种试剂的使用均不需要水浴加热这三种试剂的使用均不需要水浴加热A鉴定物质鉴定物质实验试剂实验试剂实验现象实验现象注意事项注意事项淀粉淀粉斐林试剂斐林试剂沉淀沉淀试剂现用现配、试剂现用现配、沸水浴加热沸水浴加热苏丹苏丹IIIIII、

8、IVIVIIIIII橘黄色橘黄色IV IV 红色红色可用显微镜观察可用显微镜观察 双缩脲试剂双缩脲试剂先加先加NaOH,NaOH,后加后加CuSO4CuSO4 二苯胺二苯胺沸水浴加热沸水浴加热碘液碘液蓝色蓝色操作（见下）操作（见下）P102P102黑暗处理黑暗处理对照处理（如遮光）对照处理（如遮光）酒精脱色酒精脱色清水冲洗清水冲洗碘液检验碘液检验还原性糖还原性糖脂肪脂肪蛋蛋 白白 质质DNA不不同同点点比较项目比较项目斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲试剂使用方法使用方法实质实质反应条件反应条件反应原理反应原理颜色颜色浓度浓度乙液乙液CuSOCuSO4 4浓度为浓度为0.05 0.05 g/mL

9、g/mLB B液液CuSOCuSO4 4浓度为浓度为0.01 0.01 g/mLg/mL相相同同都含有都含有NaOHNaOH、CuSOCuSO4 4两种成分，且所用两种成分，且所用NaOHNaOH浓度都是浓度都是0.1 g/mL0.1 g/mL甲液和乙液混合均匀后甲液和乙液混合均匀后即可使用，且现配现用即可使用，且现配现用使用时先加使用时先加A液再加液再加B液液新配制的新配制的Cu(OH)Cu(OH)2 2反应反应碱性条件下的碱性条件下的CuCu2 2需水浴加热需水浴加热不需加热即可反应不需加热即可反应还原糖中的还原糖中的醛基被醛基被Cu(OH)Cu(OH)2 2氧化，氧化，Cu(OH)Cu(

10、OH)2 2被还原为被还原为CuCu2 2O O具有两个以上肽键的化合具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与物在碱性条件下与CuCu2 2反反应生成络合物应生成络合物砖红色砖红色紫色紫色 5 5根据根据“检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质质”实验，回答下列问题：实验，回答下列问题： (1)(1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原糖所用的试剂是鉴定成熟苹果果肉中存在还原糖所用的试剂是 ，该试剂与细胞内的还原糖发生作用，形成，该试剂与细胞内的还原糖发生作用，形成沉淀。沉淀。 (2)(2)在鉴定花生子叶中脂肪的实验中，能将脂肪染在鉴定花生子叶中脂肪的实验中，能将脂肪染成橘

11、黄色的染液是，用其染色时，冲洗浮成橘黄色的染液是，用其染色时，冲洗浮色要用体积分数为色要用体积分数为50%50%的酒精，这是因为体积分数为的酒精，这是因为体积分数为50%50%的酒精的酒精能能 。 斐林试剂斐林试剂 砖红色砖红色 苏丹苏丹染液染液 溶解苏丹溶解苏丹染液染液 (3)(3)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织样液中加鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织样液中加入双缩脲试剂入双缩脲试剂A A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B B摇摇匀。其中双缩脲试剂匀。其中双缩脲试剂B B的量只有的量只有3 34 4滴，而不能过量，滴，而不能过量，为什么？为什么？。过量的双缩

12、脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与双缩脲试剂会与双缩脲试剂A A反应，使溶液呈反应，使溶液呈蓝色，而掩盖了生成的紫色蓝色，而掩盖了生成的紫色5 5根据根据“检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质质”实验，回答下列问题：实验，回答下列问题： (4) (4)本实验的注意事项：本实验的注意事项： 斐林试剂极不稳定，其甲液和乙液需斐林试剂极不稳定，其甲液和乙液需_，使用时再临时混合均匀用于实验。使用时再临时混合均匀用于实验。 双缩脲试剂的使用，应先加双缩脲试剂的使用，应先加，造成碱性环境，再加，造成碱性环境，再加。 在还原糖的鉴定中，对试管中的溶液水浴加热在还原糖的鉴定中

13、，对试管中的溶液水浴加热时，试管底部不要触及时，试管底部不要触及_；试管口不要朝向；试管口不要朝向_，以免溶液沸腾时冲出试管造成烫，以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。伤。分别配制、分别配制、储存储存 A液液(质量浓度为质量浓度为B液液(质量浓度为质量浓度为0.01 g/mL的的CuSO4溶液溶液) 烧杯底部烧杯底部 实验者或其他人实验者或其他人 0.1 g/mL的的NaOH溶液溶液) 5 5根据根据“检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质”实验，回答下列问题：实验，回答下列问题：细胞内物质或结构的检测方法细胞内物质或结构的检测方法(1)淀粉：淀粉：碘液；碘液；(2)还原糖：还原糖：斐林试剂；斐林试剂；(3) 脂肪：脂肪：苏丹苏丹或苏丹或苏丹染液；染液；(4) 蛋白质：蛋白质：双缩脲试剂；双缩脲试剂；(5)O2：(6) CO2：(7)乳酸：乳酸：(8)染色体：染色体：(9)DNA、RNA在细胞中的分布：在细胞中的分布：(10)线粒体：线粒体：(11)酒精：酒精：澄清石灰水或溴麝香草酚蓝水溶液澄清石灰水或溴麝香草酚蓝水溶液pH试纸；试纸；带火星木条带火星木条龙