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1、沙棘总黄酮抗角叉菜胶诱发大鼠血栓形成作用的研究 09-09-06 16:44:00 编辑:studa20 作者:袁本香 杨桂珍 任艳艳【摘要】 目的观察沙棘总黄酮(total flavones of Hippophae rhamnoides, TFH)对角叉菜胶所致大鼠尾静脉血栓的影响,并分析其作用机制。方法采用后足跖部皮下注射角叉菜胶0.25 mL/100g制备SD大鼠尾静脉血栓模型,观察24,36,72 h大鼠血栓发生率与黑尾长度。将60只大鼠随机分为沙棘总黄酮高、中、低剂量组及模型对照组、阳性对照组(阿司匹林组)和正常对照组,每组10只。各实验组动物均灌胃1次/d。30 d后测定各组大鼠
2、凝血酶原时间(PT)、 活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、125I-血栓素B2 (TXB2) 、125I-6-keto-前列腺素F1a (6-keto-PGF1a)水平以及血清一氧化氮(NO)含量。结果沙棘总黄酮能显著缩短大鼠黑尾长度,增加血浆PGI2/TXA2比值,延长TT,APTT时间,并可升高NO含量。结论沙棘总黄酮对角叉菜胶所致大鼠炎性血栓形成具有预防作用,其作用机制可能与提高PGI2和NO水平有关。 【关键词】 沙棘总黄酮 血栓形成 角叉菜胶 血栓素B2 6-keto-前列腺素F1aAbstract:ObjectiveTo observe the effects
3、of total flavones of Hippophae rhamnoides on Carrageenaninduced thrombopoieses in rats and study its mechanism. Methods1.Caudal venous thrombosis rat model was established by injecting Carrageenan 0.25 ml/100 g subcutaneous into paw of SD rats and the rate of thromboembolism and the length of blacke
4、n tail were observed at 24,36 and 72 h. 2. 60 rats were divided randomly into groups of TFH (high、medium and low dose),model 、 asprin and control (n=10). They were treated intragastrically once a day for 30days .PT,APTT,TT,TXB2,6-Keto-PGF1a and NO in serum were measured. ResultsTFH could significant
5、ly shorten the length of blacken tail and raise the ratio of PGI2/ TXA2 as well as prolong TT and APTT and increase the content of NO. ConclusionTotal flavones of Hippophae rhamnoides can prevent thrombogenesis induced by Carrageenan.Its possible mechanism may related to the increase of PGI2and NO.K
6、ey words:Total flavones of Hippophae rhamnoides; Thrombogenesis; Carrageenan; TXB2 ; 6-Keto-PGF1a 血栓相关性疾病严重威胁人类健康,由心肌梗塞、脑卒中等血栓栓塞性疾病导致的死亡已占到全球总死亡的51%。血小板在血栓形成中起着重要作用,人们希望应用具有抗血小板作用的药物来防治血栓栓塞性疾病。沙棘总黄酮(TFH)对心血管系统具有多种药理作用,能显著降低实验性高血脂大鼠血清胆固醇、甘油三酯含量;显著增加前列环素(PG2)水平,提高PG2/TXA2(血栓素A2)比值;也能显著降低血小板内CAM含量,抑制血小
7、板聚集反应,延长凝血时间1,2。本实验采用大鼠后足跖部皮下注射角叉菜胶建立炎性血栓模型,研究沙棘总黄酮对大鼠体内血栓形成的作用,并对其作用机制进行初步探讨,同时考察其对凝血系统的影响。1 器材 1.1 药品与试剂沙棘总黄酮由青海康普德生物制品有限公司提供,批号20070107(以异鼠李素为标准,沙棘总黄酮含量为27%)。肠溶阿司匹林片,由山西三九同达药业有限公司提供,批号H14023223(25mg/片),生理盐水由宁夏启元药业有限公司提供,批号0511114-2,NO测定试剂盒购自于南京建成生物工程研究所,批号20070423,TXB2 测定试剂盒由北京北方生物技术研究所提供,批号20070
8、420,6-keto-PGF1a 测定试剂盒由北京北方生物技术研究所提供,批号20070400,角叉菜胶为SIGMA公司产品,批号G1023-25G。1.2 仪器SYSMEX CA-1500全自动血凝分析仪(日本岛津 ),RFJ-2008PS免疫计数器(核工业西安262厂生产), UV-9100分光光度计(北京第二光学仪器厂生产),可调式移液器(上海仪器有限公司生产),800型离心沉淀器(上海手术器械厂生产),台式离心机(上海亭高科学仪器厂制造)。2 方法2.1 分组与给药方法SD(Spragye - Dowleg)清洁级健康雄性大鼠(22020)g 60只,由本院实验动物中心提供,合格证号SCXR(宁)20070004。自由进食饮水、适应性观察1周后随机分为组: 正常对照组、模型对照组、阳性对照组(阿司匹林组)、沙棘总黄酮高、中、低剂量组,每组各1只。沙棘总黄酮用蒸馏水配成浓度分别为50%,25,12.5%的溶液,阿司匹林用蒸馏水配成浓度为1%的溶液,1次/d灌胃,模型对照组和正常对照组给予等量容积的蒸馏水灌胃,1次/d。连续灌胃30 d。最后1次给药前两天开始造模,将角叉菜胶以生理盐水配成2%浓度,于大鼠后足跖部皮下注射, 0.25 ml/100 g,分别在24,36 h,72 h后测量大鼠黑尾长度,之后以2%乌拉坦腹腔注射麻醉,心腔取血检测相应指标。2.2 黑
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