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文档简介
1、精选优质文档-倾情为你奉上课题1 菊花的组织培养 班级 姓名 【教学目标】 1、熟悉植物组织培养的基本过程2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化一、基础知识 (一)植物组织培养的基本过程1.细胞分化 (1)概念:在个体发育中,相同细胞的后代在_、_、_上发生稳定性差异的过程。(2)过程:如:受精卵增殖生长分化形成组织、器官、系统。(3)特点:持久性:是一种持久性的变化,它发生在生物体的整个生命过程中,在_期达到最大限度。稳定性:细胞分化是稳定的,一般是_的。全能性:已分化的细胞,仍具有发育成完整个体的潜能。(4)结果:形成不同的细胞和组织。(5)原因:_的结果。2.细胞全能性(1
2、)定义:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。(2)原理:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。(3)实例:已分化的植物细胞,仍具有全能性。高度特化的动物细胞,从整个细胞来说,全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性,这是因为_。(4)全能性的比较: 受精卵>胚胎干细胞>生殖细胞(卵细胞)>体细胞。3.植物组织培养(1)必要条件:细胞离体;一定的营养物质、激素和其他外界条件。(2)原理:细胞的全能性(3)相关概念:外植体:_。脱分化:由高度分化的植物组织或细胞_的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化
3、。再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化。愈伤组织: _,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞。(二)影响组织培养的因素 1.外植体的选取不同植物的组织培养难度不同;同一种植物的不同组织培养难度不同。菊花的组织培养一般选择_。2.培养基的配制(MS培养基)3.不同植物激素浓度,使用顺序和使用量大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S;微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等。使用顺序实验结果先生长素,后细胞分裂素先细胞分裂素,后生长素同时使用生长素细胞
4、分裂素比值结果比值高时比值低时比值适中4.消毒:在培养的整个过程中,都需要是一个_环境。5.pH、温度、光照 菊花: pH=_;温度控制在_;每日用日光灯照射_h。二、实验操作 (一)MS固体培养基制备 1配置各种母液无机物中大量元素浓缩_倍,微量元素浓缩_倍,常温保存。激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。2配制培养基 配制培养液; 调PH;培养基的分装。分装到锥形瓶中,每瓶分装50ml或100ml。由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素。3灭菌分装好的培养基连同其他器械一起
5、进行 灭菌。(二)外植体消毒1选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝。2消毒流水冲洗:菊花茎段用流水冲洗后可少许 ,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min左右。 酒精处理:用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70的酒精中摇动_次,持续_s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗。消毒液处理:取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为0.1的氯化汞溶液中12min,取出后在无菌水中至少清洗_次,漂净消毒液。课题1 菊花的组织培养的第二课时 班级 姓名 (三)接种1接种室消毒污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种室消毒是至关重要的。用70的酒精喷雾使空气消毒, 酒精擦拭工作台并
6、用紫外线照射20分钟。2无菌操作要求操作要在_完成,每次使用器械后,都需要_,接种后立即_。3材料的切取和接种4接种注意事项每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为75的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种。外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定,一般胡萝卜_块,菊的茎或叶_块,也不要太少,以充分利用培养基中的营养成分和光照条件。插入时应注意_,不要_。茎段、茎尖基部插入培养基利于_。(四)培养1愈伤组织的培养3试管苗的培养当愈伤组织长到一定大小后,可以更换培养基,进行试管苗的见光培养。(五)移栽1打开封口膜移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶
7、的封口膜,让试管苗在培养间生长几日。2清洗转移用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间。3移栽:幼苗长壮后,移栽到土壤中。(六)栽培幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花。 达标测试1以下不能说明细胞全能性的实验是 ( ) A胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 B紫色糯性玉米种子培育出植株C转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 D番茄与马铃薯体细胞杂交培育出植株 2植物细胞表现出全能性的条件是 ( )A给予适宜的营养和外界条件 B将成熟筛管的细胞核移植到去核卵细胞中C导入其他植物细胞的基因 D脱离母体后,给予适宜的营养和外界条件 3下列细胞工
8、程技术培育新品种,操作过程中不能形成愈伤组织的是( ) A植物组织培养 B植物体细胞杂交 C动物细胞培养 D转基因植物的培育4愈伤组织分化过程,培养基中细胞分裂素/生长素的比值较低时诱导分化的是( ) A根 B芽 C叶 D胚性细胞团5下列植物组织培养的目的中不正确的是 ( ) A生产人工种子 B生产新品种 C生产杀虫剂 D生产抗体6.关于愈伤组织形成过程的正确叙述是 ( )A.愈伤组织形成是离体的植物细胞分化的结果B.愈伤组织形成是离体的植物细胞脱分化和分裂的结果C.愈伤组织形成是离体的动物细胞分化的结果D.愈伤组织形成是离体的动物细胞脱分化和分裂的结果7. 把胡萝卜的单个韧皮部的
9、细胞放入配制的培养基上培养,获得了许多完整的植株,这种繁殖方式和细胞工程技术分别属于 ( )A.孢子生殖和细胞杂交技术 B.无性生殖和植物组织培养C.配子生殖和细胞拆合技术 D.卵式生殖和细胞培养8(10分)请回答下列有关植物组织培养的几个问题: (1)离体植物组织和细胞培养常用的一种培养基是 ,培养中常用的两种植物激素是 和 。 (2)植物组织培养的一般实验操作步骤包括 、外植体消毒、_、 培养、移栽、栽培。 (3)图示植物组织培养的部分过程:离体的器官、组织或细胞A植物体 过程是 ,过程是 ,A是 (4)组织培养过程中还需要维持一定的外界条件,一是要有适
10、宜的 _ _ ,二是_ _ _环境。【基础知识】答案一、基础知识(一)植物组织培养的基本过程1.细胞分化(1)形态、结构、生理功能。(3)特点:胚胎。不可逆转。(5)原因:基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达。2.细胞全能性(3)实例:细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质。3.植物组织培养(3)相关概念:外植体:从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官。脱分化:产生愈伤组织。愈伤组织:细胞排列疏松而无规则。(二)影响组织培养的因素1.外植体的选取:未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。3.不同植物激素浓度,使用顺序和使用量先细胞分裂素,后生长素,细胞既分裂也分化比值低时,促芽分化,抑根形成4.消毒:无菌。5.pH、温度、光照:pH=5.8;温度1822;照射12。二、实验操作(一)MS固体培养基制备1配置各种母液:10倍,微量元素浓缩100倍,常温保存。(二)外植体消毒2消毒: 酒精处理: 23次, 67s。消毒液处理: 3次。(三)接种2无菌操作要求:酒精灯火焰旁;用火焰灼烧灭菌;盖好瓶盖。4接种
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