防治大豆疫霉根腐病的药剂筛选

1、农药学学报1999,1(3:3944Ch inese Jou rnal of Pesticide Science防治大豆疫霉根腐病的药剂筛选朱振东王晓鸣田玉兰武小菲(中国农科院作物品种资源研究所北京100081摘要在离体条件下测定了8种内吸性杀菌剂对大豆疫霉菌菌丝生长的抑制作用。甲霜灵、甲霜灵锰锌、安克锰锌、杀毒矾、霜脲锰锌、克露和加瑞农为有效杀菌剂,霜霉威不具有抑菌效果。甲霜灵的EC50值为0.4870g mL,抑菌效果最好,安克锰锌、甲霜灵锰锌的EC50值分别为1.4261g mL和1.7697g mL,效果次之。在活体条件下,甲霜灵和甲霜灵锰锌能完全抑制大豆疫霉菌对感病大豆品种的侵入,并

2、具有较长的药效期,安克锰锌、杀毒矾和霜霉威虽然具有明显的防治效果但药效期很短。大豆疫霉菌菌株间对甲霜灵锰锌的敏感性存在差异,但这种差异与菌株来源没有相关性,EC50平均值为1.8302g mL,没有发现耐药性菌株。在我国黑龙江省目前缺乏有效抗病品种的情况下,建议应用甲霜灵锰锌防治大豆疫霉根腐病。关键词大豆;疫霉根腐病;大豆疫霉菌;杀菌剂;化学防治由大豆疫霉菌(P hy top h thora sojae引起的大豆疫霉菌根腐病是在我国发生的一种新的大豆病害,目前已在黑龙江省造成危害1,2。该病在大豆的任何生育期均可造成危害,具有极大的破坏性和毁灭性。大豆对疫霉菌的抗性由显性单基因控制,选育抗病品

3、种是防治该病的主要方法,但由于该菌遗传变异性极大,在美国和加拿大已有多个抗病基因被不断产生的新的生理小种所克服3。一些研究表明,甲霜灵对大豆疫霉根腐病具有一定的防治效果,特别是耐病品种辅以甲霜灵处理防病效果明显4。在我国,虽然已筛选出一些抗大豆疫霉菌1号生理小种的品种5,但由于目前黑龙江省病区生理小种结构仍不明确,这些品种的实用性有待进一步研究。因此,筛选并应用杀菌剂是我国目前有效防治大豆疫霉根腐病的方法之一。1材料与方法1.1供试材料25%甲霜灵可湿性粉剂(南通染化厂;58%甲霜灵锰锌可湿性粉剂(NOVA R T IS公司产品;64%杀毒矾M8可湿性粉剂(SANDO Z公司产品;69%安克锰

4、锌可湿性粉剂(氰胺中国有限公司产品;72%杜邦克露可湿性粉剂(杜邦中国有限公司产品;72%霜脲锰锌可湿性粉剂(河北万全农药厂;72.2%霜霉威水剂(江苏新沂农药厂;47%加瑞农可湿性粉剂(北兴化学工业株式会社。大豆疫霉菌菌株U SA2R1和U SA2R25由美国俄亥俄州立大学Schm itthenner博士提供;“九五”国家攻关(962005201212资助课题PS M1和PM S2由黑龙江省农科院合江地区农科所马淑梅研究员提供,其他11个菌株均从染病大豆植株分离获得。除特别说明外,所有试验均用4121菌株。合丰25号(已鉴定为感病品种,由黑龙江省农科院合江地区农科所马淑梅研究员提供。1.2杀

5、菌剂对大豆疫霉菌菌丝生长的影响在25黑暗条件下,供试菌株4121在稀释V8培养基上培养7d,用打孔器从菌落边缘打取直径为5mm的圆形菌块,移在含不同浓度药剂的稀释V8平板上(药剂的浓度梯度分别是:甲霜灵和甲霜灵锰锌为0、0.1、0.5、1、5、10g mL;安克锰锌为0、0.5、1、1.5、2、2.5、3g mL;克露、霜脲锰锌和杀毒矾为0、5、10、15、20、25、30g mL,加瑞农和霜霉威为0,0.1, 0.5,1,5,10,50,100g mL,菌块面朝下置于平板中央,每平板接种1块,每处理重复三次, 25黑暗条件下培养,5d后测量菌落直径,作出不同药剂的抑菌回归方程,求出EC50和

6、EC95值。试验重复3次。1.3不同药剂对大豆疫霉菌作用的活体测定供试品种为合丰25号,以种子重量0.5%药剂量拌种。药剂处理种子播种后7、10、15、20、25d分别运用下胚轴伤口接种4121菌株5,以同一播期未进行处理种子的植株为对照,接种后在雾室保湿2d,然后移入温室正常管理,6d调查发病情况。病级划分标准为:0级,没有病斑扩展;1级,病斑扩展5mm;2级,病斑扩展10mm;3级,病斑扩展15mm;4级,病斑扩展大于15mm,植株存活;5级,植株死亡。试验重复2次。供试品种为合丰25号,以种子重量0.5%药剂量拌种。用修改的W alker和Schm itthen2 ner的菌层接种方法进

7、行药效试验6:底部带孔的大小为9c m12.5c m12.5c m(底径高口径的标准塑料花盆用吸水纸封盖底眼,加6c m高的新蛭石并加水浸透,将在直径为9 c m的DV8A培养基平板上培养10d的4121菌株接种体圆片置于蛭石中央,上面加2.5c m 高的蛭石,加水充分浸透后播种。每个药剂处理10粒种子,均匀播于花盆中央,保证每粒种子都垂直于接种体层以便根直接穿过接种体层。播种后覆盖2c m的蛭石,浇水浸透。每处理设接菌对照(未处理种子加接种体层和空白对照(未处理种子不加接种体层。温室温度控制在1828,出苗后每天浇水12次并根据需要辅以光照。25d后调查出苗后植株死亡率和病级,计算防治效果。

8、试验重复2次。出苗后死亡率(%=(死苗数 出苗总数100病级(植株矮化率:Sco re=1-N a H aN bH b100式中N a:接菌处理活植株数;N b:未接菌处理活植株数;H a:接菌处理平均株高;H b:未接菌处理平均株高防治效果=(S c-S t S c100式中S c:接菌对照病级;S t:药剂处理病级。04农药学学报1999年1.4不同来源大豆疫霉菌分离物对甲霜灵锰锌的敏感性方法同1.2。2结果与分析2.1杀菌剂对大豆疫霉菌菌丝生长的影响测定了8种对低等真菌具有抑菌作用的内吸性杀菌剂对大豆疫霉菌菌丝生长的影响。结果表明,在离体条件下甲霜灵、甲霜灵锰锌、安克锰锌、霜脲锰锌、克露

9、和杀毒矾6种药剂能明显抑制菌丝生长,其中甲霜灵的EC 50值为0.487g mL ,效果最好,其次为安克锰锌和甲霜灵锰锌(见表1。霜霉威为氨基甲酸酯类内吸性杀菌剂,在离体条件下抑菌作用很弱,其EC 50值为1185.6481g mL 。加瑞农在50g mL 时对大豆疫霉菌的相对抑制率为64.84%,在100g mL 时完全抑制其生长,但低浓度的加瑞农可加速大豆疫霉菌菌丝生长。表16种杀菌剂对大豆疫霉菌菌丝生长的抑制作用T ab le 1T he sen sitivity of hyp hal grow th of P hy top h thora sojae to 6fungicides药剂F

10、ungicide抑菌回归方程Inh ib ito ry equati on EC 50 g mL -195%置信度95%fiducial li m it EC 95 g mL-1y =3.2592+1.9243x8.02946.557810.414057.47492.2不同药剂对大豆疫霉菌作用的活体测定运用下胚轴伤口接种检测6种杀菌剂在活体条件下对大豆疫霉菌的抑菌效果。结果表明,在活体条件下药剂间对大豆疫霉菌的抑菌效果和药效期差异明显。0.5%剂量拌种,播种后25d 接种,甲霜灵和甲霜灵锰锌的防效均保持100%,这两种药剂在活体条件下具有很高的抑菌效果和较长的药效期。0.5%安克锰锌、杀毒矾、

11、霜脲锰锌和霜霉威拌种,播种后7d 接种,其防效分别为68%、22%、0%和0%,播种后10d 接种,杀毒矾防效降至0,15d 后安克锰锌完全失去作用。菌层法接种试验结果见表2。对出苗率的调查结果表明,除霜霉威外,其他5种药剂处理不影响种子萌发,同时能防止由大豆疫霉菌引起的出苗前死亡,但霜脲锰锌显著延缓种子萌发。25d 后甲霜灵和甲霜灵锰锌处理出苗后植株死亡率均为0,植株生长发育正常,根系发达,未表现任何大豆疫霉根腐病症状,显然完全抑制了大豆疫霉菌的侵入。该结果再次表明,甲霜灵和甲霜灵锰锌在活体条件下对大豆疫霉菌具有很高的抑制作用和较长的作用期。安克锰锌、杀毒矾和霜霉威防治效果依次为76.18%

12、、74.88%和71.09%,部分植株表现矮化或死亡,其14第3期朱振东等:防治大豆疫霉根腐病的药剂筛选在活体条件下对大豆疫霉菌的作用效果明显低于甲霜灵和甲霜灵锰锌,不能抑制疫霉菌的入侵。霜脲锰锌的防病效果最差,仅为43.91%,而且有28.57%的植株死亡。表20.5%药剂拌种对大豆疫霉根腐病的防治效果T ab le2T he con tro l efficiency of coating seed w ith0.5%fungicides to soybean p hytop h tho ra roo t ro t disease杀菌剂Fungicide出苗率(%Seedling rate出

13、苗后死亡率(%M o rtality ofseedling病级D iseaseseverity防治效果(%Con tro lefficiency空白对照Con tro l96.670-2.3大豆疫霉菌分离物对甲霜灵锰锌的敏感性测定分别来自于黑龙江省佳木斯、牡丹江、穆林、宾县、安徽蒙城和美国的15个菌株对甲霜灵锰锌的敏感性(见表3。结果表明:菌株间对甲霜灵锰锌敏感性存在差异,其EC50值范围在1.28652.3739g mL,平均值为1.8302g mL,EC95值在12.693042.1161g mL,平均值为27.4046g mL。来自于蒙城的PM C1菌株具有最高EC50值和EC95值,但

14、与最低值相比仅分别相差约2倍和3倍。另外,菌株间对甲霜灵锰锌敏感性的高低与来源不具有相关性。因此,所测定菌株均为甲霜灵锰锌敏感菌株,不存在抗药性。3讨论大豆疫霉菌为土传病原菌,在大豆的任何生育阶段均可造成严重危害,这为病害的防治,特别是药剂防治带来极大的困难。甲霜灵、甲霜灵锰锌、安克锰锌、杀毒矾和霜脲锰锌在离体条件下对大豆疫霉菌均表现有效,但在活体条件下只有甲霜灵和甲霜灵锰锌可完全抑制大豆疫霉菌的侵入并保持较长时间的药效,安克锰锌和杀毒矾不能抑制大豆疫霉菌的侵入,其药效期较短。在美国和加拿大,已有应用甲霜灵防治大豆疫霉根腐病的报道,在播种时沟施甲霜灵能24农药学学报1999年表3大豆疫霉菌分离

15、物对甲霜灵锰锌的敏感性T ab le 3T he sen sitivity of hyp hal grow th of iso lates of P hy top h thora sojae to m etalaxyl 2M Z分离物Iso late来源Sou rce 抑菌回归方程Inh ib ito ry equati on EC 50 g mL -195%置信度95%fiducial li m itEC 95 g mL -1PSJ 141-1黑龙江佳木斯PS M 2黑龙江290农场6-2黑龙江牡丹江16-1黑龙江穆林P M C 2U SA 2R 1美国y =4.6994+1.4510x1.

16、61131.27842.001921.9145U SA减轻感病品种的损失4,7。但是,甲霜灵为高抗药性风险药剂,许多疫霉菌已产生对甲霜灵的抗药性8。自然条件下大豆疫霉菌便存在对甲霜灵具有高耐药性的菌株,应用甲霜灵防病可能选择自然耐药性菌株,导致抗药性群体产生9。事实上美国大豆疫霉菌菌株已产生对甲霜灵的耐药性10。在我国,李宝笃等研究了大豆疫霉菌对甲霜灵的敏感性和变异性,未发现对甲霜灵具有耐药性的菌株10。在本研究中我们也未发现对甲霜灵锰锌具有耐药性的菌株。因此,为了控制大豆疫霉根腐病在黑龙江省的危害,在目前大豆疫霉菌生理小种分布不明确和抗病品种还无法立即推广的情况下,可以首选甲霜灵锰锌进行病害

17、防治。应用甲霜灵锰锌可以降低甲霜灵的用量,能延缓大豆疫霉菌对甲霜灵抗药性的产生,同时兼治大豆其他根腐病及种子病害。安克锰锌为卵菌低抗药性风险药剂,改变应用方法如采用种衣剂延长其药效期,用于防治大34第3期朱振东等:防治大豆疫霉根腐病的药剂筛选44 农药学学报 1999 年 豆疫霉根腐病具有一定的前景。 参考文献 1沈崇尧, 苏彦纯, 植物病理学报, 1991, 21 ( 4 : 298 2韩晓增, 何志鸿, 张增敏, 大豆通报, 1998, ( 6 : 5 6 3 ao Y. , T yler B. M. , F ung a l Genetics and B iology , 1996 , 2

18、0 : 43 51 M 4Schm itthenner A. F. , P lan t D isease , 1995, 69: 362 368 5Zhu Z. D. , W ang X. M. , S oy bean Genetics N ew sletter, 1998, 25: 52 53 6 a lker A. K. , Schm itthenner A. F. , C rop S cience, 1994, 24: 487 489 W 7A nderson T. R. , B uzzell R. I , P lan t D isease, 1982. 66 ( 12 : 1144 1

19、145 . 8王文桥, 刘国容, 植物病理学报, 1996, 26 ( 4 : 294 296 9H unger R. M. , H amm P. B. , Ho rner C. E. et a l. , P lan t D isease, 1982, 66 ( 8 : 645 649 10 李宝笃, 彭友付, 沈崇尧, 植物病理学, 1995, 25 ( 1 : 23 27 SCREEN ING O F FUNG IC I ES FO R CO NTROLL ING D PHY TO PHTHO RA ROO T RO T O F SOY BEAN Zhu Zhendong ang X ia

20、om ing T ian Yu lan u X iaofei W W ( In stitu te of C rop Germ p lasm R esou rces, CAA S, Beijing 100081 AbstractEffect of 8 system ic fung icides on g row th of P hy top h thora sojae w a s investiga ted in v itro. Am ong the tested chem ica ls, seven of them effectively inh ib it the g ro th of P.

21、 sojae excep t p rop am oca rb hyd roch lo 2 longer; In add ition d i ethom o rp h m ancozeb, oxad ixyl m ancozeb and p rop am oca rb hyd roch lo ride had better m to P hy top h thora soybean cu ltiva rs a re no t ava ilab le, app lying m eta laxyl m ancozeb to con tro l th is d isea se m ay ride. T he EC 50 va lues fo r inh ib ition of m ycelia l g row th by m eta laxyl, d i ethom o rp h m ancozeb, m eta laxyl m m ancozeb, oxad ixyl m ancozeb, cym oxan il m ancozeb, cu rza te2 8 w ere 0. 4870 g mL , 1. 4261 g mL , M be an a lterna tive and effective w ay. Key wordsSoybean; Phytop h tho ra r