蜂胶黄酮对D-半乳糖致老年痴呆小鼠抗氧化能力的影响

1、蜂胶黄酮对D-半乳糖致老年痴呆小鼠抗氧化能力的影响 11-01-11 11:26:00 编辑：studa20 作者：苏晓杰 高君1 张悦 赵蕾【摘要】 目的探讨蜂胶黄酮(EEP)对D-半乳糖致老年性痴呆(AD) 小鼠脑指数、脑组织单胺氧化酶B(MAO-B)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响。方法60只健康昆明小鼠随机分成6组，分别为正常组、模型组、阳性对照组及高中低3个剂量蜂胶黄酮治疗组。正常组常规喂养，其余组皮下注射D-半乳糖100 mgkg-1d-1，共7 w，阳性对照组造模同时灌胃50 mgkg-1d-1茴拉西坦胶囊;治疗组3个剂量(300、150、75

2、 mgkg-1d-1)每天灌胃蜂胶黄酮;模型组灌胃等体积的生理盐水。第50天处死小鼠取脑，测其脑指数及脑组织MAO-B，SOD，GSH-Px含量的变化。结果实验组的脑指数显著高于模型组(P0.05)，SOD，GSH-Px活性显著高于模型组(P0.01)，MAO-B含量显著低于模型(P0.01)，与正常对照组比较，各指标相近。结论蜂胶黄酮能提高脑指数，增强抗氧化能力，抑制MAO-B活性，从而保护脑细胞，抵抗痴呆。 【关键词】 蜂胶黄酮;D-半乳糖;老年性痴呆;脑指数【Abstract】ObjectiveTo research of effects of propolis flavonoids o

3、n superoxide dismutase (SOD), monoamine oxidase-B (MAO-B), glutathione peroxidase (GSH-Px) in the Alzheimer disease (AD) mices brains and brain index.Methods60 mice were randomly divided into 6 groups.Mice in normal group were fed with conventional additives.The others group were administrated with

4、D-galactose (100 mgkg-1d-1) for successive 7 weeks.Simultaneously, the mice were given with 50 mgkg-1d-1 aniracetam served as a positive control.Three experimental groups wereadministrated with high, middle and low dosages of propolis flavonoids (300, 150, 75 mg/kg).Mice in model group were daily ad

5、ministrated with saline water.After 50 days, the mice were killed and taken the brain.Brain index, MAO-B, SOD,GSH-Px in brains were determined.ResultsThe experimental group of brain indexwas significantly higher than that of model group (P0.05).SOD, GSH-Pxwere significantly higher than those of mode

6、l group (P0.01).MAO-B concentration was significantly lower than that of model group (P0.01).In the normal control group, the index was similar.ConclusionsPropolis flavonoids could increase the brainindex, promote the endogenous antioxidant activity, enhance the clearance of lipid peroxide and other

7、 metabolic waste, inhibit the MAO-B activity.Thereforepropolis flavonoids could protect cells, delay senile, improve AD symptoms.【Key words】Propolis flavonoids; D-galactose; Alzheimer disease; Brain index老年痴呆是威胁人类健康的主要杀手之一，65岁以上老年人患病率为3%8%，80岁以上老年人患病率高达20%1，其病因、病理机制等尚不明确，治疗标准仍不统一。蜂胶黄酮(EEP)是蜂胶中所含的主要有

8、效成分之一，药理作用广泛。研究表明其具有清除自由基、抗脂质过氧化、促进脑血液循环、改善脑组织代谢等作用2。但目前还未见有关EEP抗老年痴呆的报导，本实验旨在探讨EEP对老年痴呆小鼠的作用，为其治疗老年痴呆方面的临床应用提供理论依据。1材料与方法1.1材料与仪器EEP由黑龙江中医药大学生化教研室采用醇提取获得，黑龙江省中药研究所鉴定并测定含量;细胞超声粉碎机购自宁波科生仪器厂;高速低温离心机D-37520为德国HERAEUS公司产品;7600-20全自动生化分析仪为日本日立公司产品。D-半乳糖为Sigma公司产品;单胺氧化酶-B(MAO-B)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH

9、-Px)试剂盒购自南京建成生物工程研究所;茴拉西坦胶囊(三乐喜)为无锡凯西药业有限公司产品(批号:20081023，0.1 g/粒);其他试剂均为市售国产分析纯。1.2实验动物昆明健康小鼠(雌雄各半，体重22 25 g)由哈尔滨医科大学动物中心提供。1.3方法将60只小鼠随机分为6组：正常组，模型组，阳性对照组(茴拉西坦胶囊组)、EEP高、中、低3个剂量治疗组，每组10只。正常组以普通饮食喂养，其余组小鼠腹腔注射D-半乳糖100 mgkg-1d-1，连续7 w，建立小鼠AD模型。同时，高、中、低剂量治疗组每天分别灌胃蜂胶黄酮300、150、75 mg/kg，阳性对照组每天灌胃50 mg/kg茴

10、拉西坦胶囊，模型组灌胃等体积的生理盐水。第50天断头处死小鼠，开颅取脑，称重，从断头至称重在5 min内完成。根据公式计算脑指数，脑指数=(脑重/体重)100%。按重量体积比(19)加生理盐水制成10%脑组织匀浆液，3 000 r/min,离心10 min，4，取上清液，用日本日立7600-20全自动生化分析仪，按试剂盒说明检测MAO-B、SOD及GSH-Px。1.4统计学处理应用SPSS17. 0统计软件进行方差分析及t检验，全部数据用xs表示。 11-01-11 11:26:00 编辑：studa202结果2.1蜂胶黄酮对脑指数的影响模型组小鼠脑指数较低(4.520.63)%，与正常组(5

11、.160.79)%比较，差异有显著性(P0.05);高、中剂量实验组及阳性对照组脑指数较高(5.080.74)%，(4.980.65)%，(4.920.36)%，与模型组比较差异显著(P0.05)，与正常组比较，无显著性差异，低剂量EEP组(4.560.89)%与模型组无显著差异。2.2蜂胶黄酮对脑中MAO-B、SOD、GSH-Px的影响高、中剂量治疗组脑中MAO-B的含量明显低于模型组(P0.01)，与正常组持平，而模型组MAO-B的含量显著高于正常组(P0.01)。正常组脑中的SOD的含量明显高于模型组(P0.01);治疗组中高、中剂量SOD含量明显高于模型组(P0.01)，与正常组接近，

12、低剂量组显著高于模型组(P0.05)。各EEP治疗组的GSH-Px含量明显高于模型组(P0.01);与正常组相比，EEP高剂量治疗组GSH-Px含量显著升高(P0.05)，中、低剂量组与之比较，差异不显著;模型组GSH-PX含量明显低于正常组(P0.01)，见表1。表1EEP对AD模型小鼠脑中MAO-B、SOD、GSH-Px的影响3讨论痴呆的主要特征是脑萎缩，脑重量减轻，体积缩小，脑沟回变窄，脑裂增宽，脑室扩大。脑萎缩的主要原因是神经元数量的减少，所以脑指数可以有效地反映脑组织的变化。MAO能催化各种单胺类化合物的氧化脱氢作用，生成醛、氨和过氧化氢，分为MAO-A和MAO-B两种，MAO-B活

13、性与年龄呈正相关，随年龄增加而上升，与衰老密切相关3，4，而MAO-A则无此种关系。GSH-Px通过特异性地催化还原型谷胱甘肽(GSH)对氢过氧化物的还原反应，而消除细胞内有害的过氧化代谢产物，以阻断脂质过氧化连锁反应，从而起到保护细胞代谢的正常进行的重要作用。目前认为，GSH-Px活性是抗衰老药物的重要指标之一3，4。SOD是机体内清除自由基的重要抗氧化酶之一，其活力和含量反映了机体清除氧自由基的能力。研究表明，随着年龄的增长，SOD清除氧自由基能力的下降，引起氧自由基及脂质过氧化物(LPO)日益增多，由于生物膜中不饱和脂肪酸被氧化成过氧化物时，可使细胞膜的通透性改变，线粒体、微粒体膜膨胀破

14、裂，造成细胞代谢和功能形态的改变，最后导致机体衰老和老年性疾病的发生。SOD活性亦被认为是抗衰老药物的重要指标之一3，4。由于各类型的痴呆都有脑血流量降低，所以脑血管扩张剂和脑细胞代谢促进剂以改善脑血流，预防梗死和促进代谢作用而广泛使用。中医药对治疗老年痴呆有较好的前景，针对病因进行以气养心、化痰通窍、滋阴补肾等治疗，取得了较满意的疗效。目前EEP对D半乳糖致衰小鼠学习记忆的改善作用及对脑一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、乙酰胆碱酯酶(AchE)的作用已被证实5，本研究通过测定脑指数及脑组织中抗氧化酶等指标，验证了EEP对老年性痴呆模型鼠具有一定的对抗作用，为EEP对老年性痴呆作用机制的研究及临床药物开发提供了实验基础。【参考文献】 1刘琳琳，周坤福.中医药延缓衰老分子机制研究进展J.江西中医药，2006;1(1)：57-