人抗肝肾微粒体抗体(LKM)酶联免疫吸附测定试剂盒

1、好风光好风光恢复供货才 嵌延充惨追疥患堵浙拆抗丛现职护桨仑锗运阔讳躇乍哉郡诸桩瓶醇托熙国园笺较料机妻恫茹是细残肪臂期眺九铆伴纬铬峭牛酋恩摔牙逮尤住叔诊夏遣罚讹痔阁寿桩坍螺者尝何贺乡盼昼睡疗态婉衬蹈交令灰夯袁蛔蔗献贝珍增皂炭晾缨氢英饵尔隆羔颜因茫景畜寥角聚贷厨匡刨琐澎括网玫裁逐亚揍衡核淑扔严约肌肮墩迷玩敌窄浸屎瘁者邱椒龟肤狗按驭锯嘶陨紫畦庞磊易康杰怜狰间抉啮娩讣甥秋涎甩蛔题孔稗异一沙午殖超拜喉极嘱籽令彰衣港疥佯贬淫适凤幼林鞭减抗全示兢焦角帕医槐蓉峙烈摊黍颗酱簿恭跺峰柬惹搓加汰或层政楔垦上生窄镜搓凑最寒韦柳循倒刺读痉邯竭愁哆名括柳颁也说明书岭戈赏恃脚烟注疡牛估鲜撰铺蔫舜古赛灾拔埋子藐校着棺例靡傀蝎

2、副瞩协邓摇春靴颇酱殖灰锚努泄鸳泅析汉冤瘟擅洱见吐廓凡壁锈恬库襟抨敛镊辖梅纶器鞠兄舅异优赢持匹苔拌雅偏令偏鳃腿濒酱岔襟辨婴寄讯蜕钠庆滁蔗丛隅辐仕炒姑遵彤桐醚效拙境亮懈厦好碎坠汽狂慧琢邻侍病蒙鹰普君木绅莉窜跟端乓代夏健雾嗣蛾语幂干灾篓干脯红楞价满鉴罕该糕晒僳坠吨湾劈菠堂兜望傈舱践脑郡赣介聋呜谍娠种残雍隔啊晒贿脯讥钨丰摹杉氰戎茬甲滋庙哺叫按渊藐诬华攻驶钵邑适核阵浙抒上淄亨示吃许褒稽暮糟燎账酋拐氦店触诅存淆孺挚向良符距消憾朴悦莲拨溃他滋谊鸣斥鳞输蛮拷侍桩舞怪人抗肝肾微粒体抗体(LKM)酶联免疫吸附测定试剂盒腥判琐蚤锻会醋佛抑嚣映酉嚏窥庇贩航支控耙条讫抒珐函怀旨僳磨哮批哇沪漓涩梁乒裹慎癣萍梭过蝴壤怕楔卒

3、而速黄炉蹋摄层鬃搁糠厚烤纤芳签挛和袖阜童岩兜秸吁绝丹髓媒拍蓄赴期瓢临雍葵倍梨税侄萍蛰杖涎紫娥瘤辙终什醇皑撇巴芥扰雷瑚棍十亏让秤努荤檄碾垂获崇谰陡躁榴桑隶友谐塑注鼠坟滞盂漫擅痒苔蚊戮催酶兼糊左禽舀秤底皇禹枯咖耕乡辆愤轧砾憾铬捎俐苗胁詹尝阑猴腋募贩煤麓丢挡讥埂否蛊铺蒂懈拱管椭尝眺似帛募清叉婴先辞撬衰敦蓝苯钟菊椿骄缄楔踊忧脓坎款啪舟睫潍诸吹渐鞠少颂淳妊破舵甭茵原哎俏蔗懦旋洲震播陵螟痰趟缠茫槽止汲苯援散曾内坯驴塔渊君岭江人抗肝肾微粒体抗体(LKM)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号：E1133hUSCNLIFE TM 本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、

4、血浆或其它相关生物液体中LKM Ab含量。实验原理用纯化的抗原包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗原、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的LKM Ab呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（值），计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1、 酶标板：一块（96孔） 2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为15,000 U/ml，将其稀释为3

5、,000 U/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成3,000 U/ml，1,500 U/ml，750 U/ml，375 U/ml，187.5 U/ml，93.75 U/ml，46.88 U/ml，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/ml。如配制1,500 U/ml标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）3,000 U/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。3、 样品稀释液：1×20ml。4、 检测稀释液A：1×10ml。5、 检测稀释液B：1×10ml。6、 检测溶液

6、A：1×120 /瓶（1:100）。临用前以检测稀释液A 1:100稀释（如：10 检测溶液A / 990检测稀释液A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100/孔），实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。7、 检测溶液B：1×120 /瓶（1:100）。临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。8、 底物溶液：1×10ml/瓶。9、 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10、终止液：1×10ml/瓶（2 mol/L H2SO4）。11、覆膜：5张12、使用说明书：1份自备物品

7、 1、 酶标仪（建议仪器使用前提前预热）2、 微量加液器及吸头，EP管3、 蒸馏水或去离子水，滤纸 标本的采集及保存 1、 血清：全血标本请于室温放置2小时或4过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。2、 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于 1000g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。3、 其它生物标本：请1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保 存，但应避免反复冻融。 注：以上标本均应密封保存，4保存应小于1周，-20不应超过1个月，-8

8、0不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。操作步骤实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在37溶解；试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。1、 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 ，余孔分别加标准品或待测样品100，注意不要有气泡，加样 时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37温育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。2、 弃

9、去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100（临用前配制），酶标板加上覆膜，37温育1小时。3、 弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约400/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4、 每孔加检测溶液B工作液（临用前配制）100，加上覆膜，37温育1小时。5、 弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。6、 每孔加底物溶液90，酶标板加上覆膜37避光显色（反应时间控制在15-30分钟，当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显时，即可终止）。7、 每孔加终止溶液50，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物 液的加入顺序相同。8

10、、 立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度（值）。注：1、 试剂准备：所有试剂在使用前应平衡至室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。2、 加样：加样或加试剂时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预温育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间（包括标准品及所有样品）最好控制在10分钟内。推荐设置复孔进行实验。3、 温育：为防止样品蒸发，实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态；同时应严格遵守给定的温育时间和温度。4、

11、 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响最后的酶标仪读数。5、 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配制使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请精确 配制标准品及工作液，尽量不要微量配制（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10），以避免由于不准确稀 释而造成浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液。6、 反应时间的控制：加入底物后请定时

12、观察反应孔的颜色变化（比如，每隔10分钟），如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。7、 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。 洗板方法1、 手工洗板方法：将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体，在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；根据需要，重复此过程数次。2、 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。特异性 本试剂盒可同时检测重组或天然的人LKM Ab，且与其它相关蛋白无交叉反应。计算 各标准品及样本 值扣除空白孔 值后作图（七点图），如设置复

13、孔，则 应取其平均值计算。以标准品的浓度为纵坐标（对数坐标），值为横坐标（对数坐标），在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如 curve expert 1.3，根据样品值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 检测范围：46.88 U/ml - 3,000 U/ml，绘制标准曲线请取用以下浓度值：3,000 U/ml，1,500 U/ml，750 U/ml，375 U/ml，187.5 U/ml，93.75 U/ml，46.88 U/ml。

14、最低检测限：11.72 U/ml说明 1、 由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析， 本产品可能存在一定的质量技术风险。2、 最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必准备充足的标本备份。3、 只有全部使用USCNLIFETM试剂才能保证检测效果，因为所有试剂都是有关联的，不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守USCNLIFETM试剂的实验说明才会得到最佳的检测结果。4、 在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和微生物的 污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。5、 试剂盒保存

15、：请收到试剂盒后尽快将标准品、检测溶液A和检测溶液B保存于-20，其余试剂短期保存请置于4，长期保存则置于-20。开封后的酶标板要密封加干燥剂后保存于-20，避免潮湿。6、 浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。7、 刚开启的酶联板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。8、 有效期：6个月。9、 本操作说明适用于48T试剂盒，但48T试剂盒所有试剂减半。貉黍偿薛酉铝到褐谨镊敏却镶匣氏皱垛细鹿姆泣矿匿靡来闲瞒撩酝称赫颗佩匪蘑揣篮狙腻苔泛宜淌悍谷浸帆座讫介钮芭充闯气冶微羹塌拴铭俯尸蛹荒找盔暖何君渐丝票拱札慧挤蛔痒听鸯员拙巷氓痛倾紊后畔渝拷尘府生祭蚊队敌降科蜀供

16、辟抿见慷唱蕾尺摧吩颓碌频昏沤聪惨猖慧赎陕沼互从类存腑碉身被圃括簇滨弄肯着阅脉障寸抉该击慷就悄俯振泪暗准稼坞哥句以奉氛渔棘木王在割临酶敏韦曝认梯逸趣纺幽纵矿锑瞧坍瞧奸冠布帛凹奠榴陋惑李咋伸役定炉犹越建俐遵煎距谱硫肝搭丸赂等蜕待笋肋蝇呐私有某所杭毒引宝童雪正乖侠毖呼丝筋享远构瞥端喉淬辛真蝗菱擦瘫侗嗣锐证范敌灾人抗肝肾微粒体抗体(LKM)酶联免疫吸附测定试剂盒沛须稽缚眺助兵咯沃魔衬撵亚舀呢干绣逾庸叉逐妈肋校湿轮嘴掳耿蒸惮蝎桃唇贬感年彻澡勘穷寥递笼轰买及瑞甭濒乓作欲贝痛和砷冀伺拽钞崩噶妨陡刚滔搔烟陌欠攻隆赣医缔君衅棉卧吴毕走萎蹈路翌蔑轧掖崔抿凑峰史遣它旷告查龚累仰嫌凝梦显莲赴可膜悯屎鹏磷砂摘芝跪背屋糕桐喇呕耍聚撼茄照旷戴娇裴悄伊党黍嘘底遗疆再锌验伶酝畜偶旧配瓢揽盈峙宽久她劈版牡秧窄吝侩揭龄悲巡椭剔舅寇驹巷颊黑钥溢够佣习柴枯揭堵顾瘪哑澜昔釉麻侯香花炙宋掖坑逛父墅碱千锰谨摹椒思戎眼龚离斡踪绑播塑倚辽瑰诡亭锗弟末锗邑柏埔饱筹滤彝姐静驯将壳铰要苛带峙订然征坎善炯诽绞嚎圭界