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文档简介
1、动物生理学实验报告a) 取放试管时要用拇指和食指捏住试管的上端,不要握住试管的底部,以免手的温度影响结果。b) 每支试管口径及采血量要尽量一致,不可相差太大。c) 记录凝血时间要准确。d) 判断凝血的标准要前后一致。一般以倾斜试管达45时,试管内血液不见流动为准。【实验结果及相关讨论】管号实验条件加入 0.1肝素溶液10.1mL(6 滴)加入2草酸钾溶液20.1mL(6滴)室温(6 滴生理盐水)凝血时间(一组)大于20min大于20min凝血时间(二组)大于20min现象解释肝素是抗凝剂,能不可逆的阻止血液凝固。由于肝素钠具有带强负电荷的理化特性,能干扰血凝过程的许多环节,在体内外都有抗凝血作
2、用。其作用机制比较复杂, 主要通过与抗凝血酶(AT-)结合,而增强后者对活化的a、a、a、a和a凝血因子的抑制作用。其后果涉及阻止血小板凝集和破坏,妨碍凝血激活酶的形成;阻止凝血酶原变为凝血酶;抑制凝血酶,从而妨碍纤维蛋白原变成纤维蛋白。中和组织凝血活素(因子)。抑制血小板的聚集和释放。它对血中有机成分和无机成分的测定均无影响。血液凝固的多个环节中都需要钙离子的参与,故通常用枸橼酸钠、草酸钠和草酸钾作为体外抗凝剂,它们可与钙离子结合而除去血浆中的钙离子,从而起到抗凝作用。理论上当继续向血液中加入 CaC2l溶液,CaC2l 中的钙离子会起到凝血因子 IV 的作用,从而使再次启动凝血过程,血液凝
3、固。草酸盐是可逆性抗凝剂。但本次实验中加入 CaC2l 后并没有出现凝血现象,可能是 CaC2l 溶液配置有问题,或者由于操作不当,凝血因子已经完全失活。血液流出血管后,很快会凝固。血液流出血管后血小板3静置室温(6 滴生理盐水)4每隔 15S倾斜45细玻璃粉少许(6 滴生5理盐水)7min30s7min30s4min5min2min45s3min倾斜可加速血小板的粘附聚集过程,并加大血小板释放的凝血因子与血细胞的接触面积,从而加快了凝血的过程。该过程是内源性凝血过程。玻璃粉是异物,可激活凝血因子及血小板,启动凝血过程。脑组织液中有组织因子途径抑制物,是外源性凝血途径6脑组织浸出液(6 滴)1
4、5s30s置于40水浴(6滴的特异性抑制剂,因而能加速凝血过程。适当升高温度,能增加酶的活性,加快凝血过程。7生理盐水)置于10水浴(6滴8生理盐水)竹签搅拌(6 滴生理盐9水)165s165s大于20min 有富有弹性的纤维同上蛋白纠缠在竹签上降低温度可以降低酶的活性,延缓凝血过程。在竹签的搅动下,特别是缠上线的接触面粗糙的竹签, 能加速凝血过程,使凝血因子按一定顺序相继激活而生成凝血酶,最终使纤维蛋白原变为纤维蛋白,而纠结在竹签上,形成一层蛋白膜。Page 2BT出血时间CFT束臂试验CRT血块收缩试验BPC血小板计数CT 凝血时间RT复钙时间APTT 活化部分凝血活酶时间PT凝血酶原时间
5、PF3 血小板第 3 因子TF 组织因子Fb 纤维蛋白TXA2 血栓素 A2 5-HT5 羟色胺PK 激肽释放酶原HMWK高分子量激肽原图 1 正常止血机制及血栓与止血常用筛选试验检测环节血小板的作用:在正常的血液循环中,血小板并不与内皮细胞表面或其他细胞发生作用,而是沿着毛细血管内壁排列,维持其完整性,血管局部受损伤时,血小板的止血兼有机械性的堵塞伤口和生物化学性粘附聚集作用。止血时,首先是受损的血管壁发生收缩,使局部血液流动变慢或减少。血液中的血小板在 vWF 因子存在下迅速粘附于暴露的胶原纤维,此时血小板被激活,血小板形态发生改变,由正常的圆盘状态变为圆球形,伪足突起,血小板发生聚集(血
6、小板膜糖蛋白 IIb/IIIa由纤维蛋白原介导发生互相粘附、聚集),此为血小板第一相聚集,激活的血小板便发生释放反应和花生四烯酸代谢,其中许多物质,如血小板的 ADP 等,可加速血小板的聚集、变性成为不可逆的“第二相聚集”,形成白色血栓,构成了初期止血的屏障。与此同时,由血小释放和激活许多促凝物质参与血液凝固反应。血小板膜磷脂表面提供了凝血反应的场所,血小板第3 因子在凝血过程多个环节中发挥重要作用,血小板合成释放的 TXA2 和 5-HT 促使进一步收缩,血小板收缩蛋白则最终可使纤维蛋白收缩(血块收缩),使血栓更为坚固,止血更加彻底。凝血过程:血液凝固简称凝血,是血液由流动状态变为凝胶状态的
7、过程,它是止血功能的重要组成部分。凝血过程是一系列凝血因子被相继酶解激活的过程,最终生成凝血酶,形成纤维蛋白凝块。迄今为止,参与凝血的因子共有14 个。其中用罗马数字编号的有 12个(从,其中因子并不存在)。习惯上,前4 个凝血因子常分别称为纤维Page 3动物生理学实验报告机体凝血系统包括凝血和抗凝两个方面,两者间的动态平衡是正常机体维持体内血液流动状态和防止血液丢 失的关键。机体的正常止凝血,主要依赖于完整的血管壁结构和功能,有效的血小板质量和数量,正常的血浆凝 血因子活性。其中,血小板和凝血因子是生理性止凝血的重要成分,(见图 1)。抗凝系统不仅包括抗凝因子,还包括纤溶系统。BT出血时间
8、CFT束臂试验CRT血块收缩试验BPC血小板计数CT 凝血时间RT复钙时间APTT 活化部分凝血活酶时间PT凝血酶原时间PF3 血小板第 3 因子TF 组织因子Fb 纤维蛋白TXA2 血栓素 A2 5-HT5 羟色胺PK 激肽释放酶原HMWK高分子量激肽原图 1 正常止血机制及血栓与止血常用筛选试验检测环节血小板的作用:在正常的血液循环中,血小板并不与内皮细胞表面或其他细胞发生作用,而是沿着毛细血管内壁排列,维持 其完整性,血管局部受损伤时,血小板的止血兼有机械性的堵塞伤口和生物化学性粘附聚集作用。止血时,首先 是受损的血管壁发生收缩,使局部血液流动变慢或减少。血液中的血小板在 vWF 因子存
9、在下迅速粘附于暴露的胶原纤维,此时血小板被激活,血小板形态发生改变,由正常的圆盘状态变为圆球形,伪足突起,血小板发生聚 集(血小板膜糖蛋白 IIb/IIIa由纤维蛋白原介导发生互相粘附、聚集),此为血小板第一相聚集,激活的血小板便发生释放反应和花生四烯酸代谢,其中许多物质,如血小板的 ADP 等,可加速血小板的聚集、变性成为不可逆的“第二相聚集”,形成白色血栓,构成了初期止血的屏障。与此同时,由血小释放和激活许多促凝物质参与血液 凝固反应。血小板膜磷脂表面提供了凝血反应的场所,血小板第3 因子在凝血过程多个环节中发挥重要作用,血小板合成释放的 TXA2 和 5-HT 促使进一步收缩,血小板收缩
10、蛋白则最终可使纤维蛋白收缩(血块收缩),使血栓更为坚固,止血更加彻底。凝血过程:血液凝固简称凝血,是血液由流动状态变为凝胶状态的过程,它是止血功能的重要组成部分。凝血过程是一 系列凝血因子被相继酶解激活的过程,最终生成凝血酶,形成纤维蛋白凝块。迄今为止,参与凝血的因子共有14 个。其中用罗马数字编号的有 12个(从,其中因子并不存在)。习惯上,前4 个凝血因子常分别称为纤维Page 3机体凝血系统包括凝血和抗凝两个方面,两者间的动态平衡是正常机体维持体内血液流动状态和防止血液丢 失的关键。机体的正常止凝血,主要依赖于完整的血管壁结构和功能,有效的血小板质量和数量,正常的血浆凝 血因子活性。其中
11、,血小板和凝血因子是生理性止凝血的重要成分,(见图 1)。抗凝系统不仅包括抗凝因子,还包括纤溶系统。BT出血时间CFT束臂试验CRT血块收缩试验BPC血小板计数CT 凝血时间RT复钙时间APTT 活化部分凝血活酶时间PT凝血酶原时间PF3 血小板第 3 因子TF 组织因子Fb 纤维蛋白TXA2 血栓素 A2 5-HT5 羟色胺PK 激肽释放酶原HMWK高分子量激肽原图 1 正常止血机制及血栓与止血常用筛选试验检测环节血小板的作用:在正常的血液循环中,血小板并不与内皮细胞表面或其他细胞发生作用,而是沿着毛细血管内壁排列,维持 其完整性,血管局部受损伤时,血小板的止血兼有机械性的堵塞伤口和生物化学
12、性粘附聚集作用。止血时,首先 是受损的血管壁发生收缩,使局部血液流动变慢或减少。血液中的血小板在 vWF 因子存在下迅速粘附于暴露的胶原纤维,此时血小板被激活,血小板形态发生改变,由正常的圆盘状态变为圆球形,伪足突起,血小板发生聚 集(血小板膜糖蛋白 IIb/IIIa由纤维蛋白原介导发生互相粘附、聚集),此为血小板第一相聚集,激活的血小板便发生释放反应和花生四烯酸代谢,其中许多物质,如血小板的 ADP 等,可加速血小板的聚集、变性成为不可逆的“第二相聚集”,形成白色血栓,构成了初期止血的屏障。与此同时,由血小释放和激活许多促凝物质参与血液 凝固反应。血小板膜磷脂表面提供了凝血反应的场所,血小板第3 因子在凝血过程多个环节中发挥重要作用,血小板合成释放的 TXA2 和 5-HT 促使进一步收缩,血小板收缩蛋白
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