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文档简介
1、管 号1 2 3 4 5 6 7 8底物液底物液(0.04M)碳酸缓碳酸缓液液(pH=10)蒸馏水蒸馏水0.05 0.15 0.25 0.30 0.40 0.60 0.80 0.00 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 0.95 0.85 0.75 0.70 0.60 0.40 0.20 1.00混匀后混匀后37水浴,预温水浴,预温5分钟左右分钟左右 加入酶液后立即混匀(保持加入酶液后立即混匀(保持37水浴),水浴),反应开始。反应开始。从加入酶液起计时至下一步从加入酶液起计时至下一步 加入碱性加入碱性溶液停止反应,溶液停止反应,各管反应时间应准确一
2、各管反应时间应准确一致,为致,为15分钟。分钟。碱性溶液碱性溶液 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.04-氨基安氨基安 替比林替比林铁氰化钾铁氰化钾 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 混匀,室温放置混匀,室温放置10分钟左右分钟左右, 以以8号管为号管为空白,于空白,于5l0nm比色,记录各管的光密度比色,记录各管的光密度底物浓度底物浓度 mmol/L 1 3 5 6 8 12 16 0 1/S 1/OD1 0.333 0.200 0.167 0.125 0.083 0.063 - 1、原始数据、原始数据S1/2VMAXOD510VMAXKm底物浓度与反应速度关系曲线底物浓度与反应速度关系
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