基因工程第二节导学案

1、专题 1 基因工程 第二节基因工程的基本操作程序 设计者： 审核：高二生物备课组 课型：新授课 课时： 2 课时 学习冃标 简述基因工程原理及基木操作程序。重、难点 学习过程一、目的基因的获取：1. 冃的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 02. 获取目的基因的方法(1) 从基因文库中获取目的基因 基因文库：将含冇某种生物不同基因的许多 ，导入受体菌的群体中，各个受体菌分別含有这种生物的不同棊因，称为基因文库。基因组文库：含有一种牛物的 基因 种类 f I cD"A 文库：含有一种牛物的 基因(2) 利用PCR技术扩增忖的基因。 PCR是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。

2、条件：已知目的基因的 序列。 过程：冃的基因 DNA受热形成,与 结合，然后在 的作用下进行延伸形成 DNAo 方式：指数扩增二 25 为扩增循环的次数)( 3) 人工合成法：基因较小，核廿酸序列己知，可以人 T 合成。即时训练 1利用mRNA反转录形成从受体细胞小提取利用dnA专录A. B. 二、基因表达载体的构建1. 表达载体的组成： 目的基因 + 卜?列属于获取 H 的基因的方法的是()2. 鞭 动基因转录产生 mRNAo终止了：位于基因的标记基因： 3.4. 从基因组文库屮提取利用PCF技术人工合成C. D.+标记基因等。启动子：位于基因的, 它是 和结合的部位， , 终止 受休细胞是

3、否含有目的基因。表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且 代；同时使冃的基因 和发挥作用。即时训练 2 卜列哪项不是基因表达载体的组成部分() A. 启动子 B. 终止密码C. 标记基因三、将目的基因导入受体细胞5.给下一D. 目的基因基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和转化：冃的 的过程。(二) 方法1. 将目的基因导入植物细胞农杆菌转化法 农杆菌特点：易感染 植物和裸了植物，对 植物没冇感染力；Ti质粒的 可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。 转化：目的基因插人 进入农杆菌一导入植物细胞一冃的基因整合到植物细胞染色体上一目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(

4、2) 基因枪法：是单了叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。(3) 花粉管通道法2将目的基因导入动物细胞(1) 方法：注射技术。(2) 操作程序：目的基因表达载体 一取卵(受精卵)一显微注射一注射了目的基因的受精卵移植到一性动物的 内发育一新性状动物。3. 将F1的基因导人微生物细胞(1) 原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质和对较少等。(2) 大肠杆菌最常用的转化方法是： 处理细胞一 细胞一表达载体与感受态细胞混合一 细胞吸收DNA分了。即时训练3下列哪项不是将冃的基因导入植物细胞的方法()A.基因枪法B.显微注射法C.农杆菌转化法D.花粉管通道法四、目的基因的检测与鉴定1.

5、检测(1) 方法：DNA分了杂交技术、抗原抗体分了杂交方法。(2) 内容 检测转基因牛物染色体的 DNA是否插入o 检测目的基因是否转录 0 检测目的基因是否翻译成 o2. 鉴定：鉴定、抗病鉴定等。当堂检测1.下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。D(1) ?过程如果使用人的肝细胞，则不能成功，原因是(2) 过程必需的酶是 酶，过程必需的酶是 酶(3) 在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B,使它们产生 , 再加入 ，才可形成 C。(4) 为使过程更易进行，可用 (药剂)处理Do2、科沖家通过基因工程，培育岀能抗棉铃虫的棉花植株抗虫棉，其过程人致如图所示J组转化

6、的堀赠AB侵染C C过程的培养基因除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入(4)如果利用DM分子朵交原理对再生植物进行检测，D过程应该用_4、在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗基因(kan2)常作为标记基因，只有含卡那霉 素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上牛长。下图为获得抗虫棉的技术流程。离体棉花叶片纽织a点为目的基因与 质粒A的结合点。工程苗0令成人生长索的RNABt毒蛋白基因*十壤农杆菌 吕入培养选心竺空空抗虫基闪含kan质粒构建苏云金芽 抱杆菌转人(1)细菌的基因Z所以能在棉花细胞内表达，产生抗性，其原因是 3.科学家将人的生长素棊因与大肠杆菌的DNA分了进行重组，并成功地在大

7、肠杆菌中得以表达。过程如右图据图回答：(1)人的皋因Z所以能与大肠杆菌的DNA分了进行重 组，原因是,过程表示的是米取方法來获取冃的基因。T-图中(3)过程用人工方法，使体外重组的 DNA分子 转 移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒 细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用 处理使细胞处于能的生理状态，这种细胞称为细胞，再将表达载体溶于缓冲液中与混合，在一定的温度下完成转化。 如杲把己经导入了普通质粒 A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培 养,发生的现象是 Ti质粒枪测*师选的坏濮铳性穗因込构建基因F“表达载体植株细胞!/ LI K tttAJC 人的 站亠生艮倉就IM1感染抗氛节育请据图回答：(1) A过程需要的酶有(2) B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是愈伤组织诱导选择再住柚:株- 分化D转松抗虫植株沽电纟I质粒上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用 的方法是0目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是H的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上,