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文档简介
1、精选优质文档-倾情为你奉上土壤铵态氮的测定(KCl浸提靛酚蓝比色法)方法原理:用2mol/L KCl 溶液浸提土壤,把吸附在土壤胶体上的NH4+浸提出来。土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,溶液的颜色很稳定。在含氮0.05-0.5mg/L的范围内,吸光度与铵态氮含量称正比,可用比色法测定。主要仪器:往复震荡机 分光光度计试剂配制:1. 2mol/L KCl 溶液:称取149.1g氯化钾(KCl,化学纯)溶于水中,稀释至1000ml。2. 苯酚溶液:称10g苯酚和亚硝基铁氰化钠100mg稀释至1000ml。此试剂不稳定,须贮于棕色瓶中,4冰箱保存。3.次
2、氯酸钠碱性溶液:称取氢氧化钠10g、Na2HPO4.7H2O 7.06g、Na3PO4.12H2O 31.8g和52.5g/L次氯酸钠(即含5%有效氯的漂白粉溶剂)10ml 溶于水中,稀释至1000ml,贮于棕色瓶中,在4冰箱保存。4.掩蔽剂:将400g/L的酒石酸钾钠与100g/L的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100ml混合液中加入10mol/L氢氧化钠溶液0.5ml。5.铵态氮标准液配制:称取干燥的硫酸铵 0.4717g溶于水中,洗入容量瓶后定容至1000ml,制备成含铵态氮 100ug/mL 的贮存溶液;使用前加水稀释40倍,得2.5 ug/mL标准溶液。操作步骤:称取过20目筛的风
3、干土样5g,加入氯化钾溶液50ml,振荡1小时,取出静置,吸取上清液10ml进行分析(如果不能在24h内进行分析,用滤纸过滤悬浊液储存在冰箱中备用)。将10ml上清液吸入50ml试管内,加5ml苯酚溶液,5ml次氯酸钠碱性溶液,摇匀。在20室温下放置1小时,加掩蔽剂1ml以溶解可能产生的沉淀物,然后用水定容至刻度,在625纳米处比色,读取吸光值。标准曲线绘制:分别吸取0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml铵态氮标准液于50ml试管中,各加10ml氯化钾溶液,加5ml苯酚溶液,5ml次氯酸钠碱性溶液,摇匀。在20室温下放置1小时,加掩蔽剂1ml然后用水定容至刻度,在625纳米处比色,读
4、取吸光值。注:显色后在20左右放置1小时,再加入掩蔽剂。过早加入会使显色反应很慢,蓝色偏弱;加入过晚,则生成的氢氧化物沉淀可能老化而不易溶解。土壤硝态氮的测定试剂配制:1. 2mol/L KCl 溶液:称取149.1g氯化钾(KCl,化学纯)溶于水中,稀释至1000ml。2. KNO3 标液配制: 100ug/mL KNO3贮存液,称0.7221g KNO3溶于1000ml水中;稀释此溶液10倍即得10ug/mL KNO3标准液。3.10% H2SO4操作步骤:1.与铵态氮一块浸提,共用浸提液。2.吸取土壤浸提液5ml(用KCl溶液补至10ml)或10ml于50ml试管中,加10% H2SO4 1ml,然后定容至刻度,分别在210和275纳米下比色,读取吸光值。标准曲线绘制:分别吸取KNO3标准液0、1、2、4、6、8、10ml于50ml试管
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