第四章微生物的营养与培养基

1、 营养物质是微生物生存的物质基础，而营养是营养物质是微生物生存的物质基础，而营养是微生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。微生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。营养物质营养物质: 参与营养过程并具有营养功能的物质参与营养过程并具有营养功能的物质 营养营养:指生物体从外部环境中摄取对生命活动所必需的指生物体从外部环境中摄取对生命活动所必需的能量和物质能量和物质，以满足其生长和繁殖需要的一种最基本，以满足其生长和繁殖需要的一种最基本生理功能。生理功能。 构成：构成：水（水（75-90%）、无机盐、蛋白质、）、无机盐、蛋白质、 糖、脂类、核酸糖、脂类、核酸元素：元素： 大量元素：碳、氢、钠、氧

2、、氮、大量元素：碳、氢、钠、氧、氮、 磷、硫、钾、镁、钙、铁磷、硫、钾、镁、钙、铁 微量元素微量元素:锌、锰、钼、硒、钴、铜、钨、镍锌、锰、钼、硒、钴、铜、钨、镍 、硼、硼特有成分：特有成分：肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、砒啶二羧型氨基酸、砒啶二羧酸、二氨基庚二酸酸、二氨基庚二酸一、微生物的化学组成一、微生物的化学组成第一节微生物的营养六要素第一节微生物的营养六要素 二、微生物的营养要素二、微生物的营养要素 营养物质按照它们在机体中的生理作用不同，可以营养物质按照它们在机体中的生理作用不同，可以将它们区分成六大类。将它们区分成六大类。营养物质营养物质水水碳源碳源氮

3、源氮源无机盐无机盐生长生长因子因子能能源源一切能满足微生物生长、繁殖所需碳元素的营养物质一切能满足微生物生长、繁殖所需碳元素的营养物质微生物细胞的含碳量占干重的微生物细胞的含碳量占干重的50%（一）碳源（一）碳源1、种类、种类:无机含碳化合物无机含碳化合物有机含碳化合物有机含碳化合物CO2和碳酸盐等和碳酸盐等糖与糖的衍生物（糖与糖的衍生物（多糖：如淀粉、麸皮、米糠等；多糖：如淀粉、麸皮、米糠等；饴糖；单糖饴糖；单糖),脂类、醇类、有机酸、烃类、芳香族脂类、醇类、有机酸、烃类、芳香族化合物等。化合物等。微生物利用的碳源谱微生物利用的碳源谱种类种类碳源物质碳源物质备注备注糖糖葡萄糖、果糖、麦芽糖、

4、蔗糖、淀粉、葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉、半乳糖、乳糖、甘露糖、纤维二糖、纤半乳糖、乳糖、甘露糖、纤维二糖、纤维素、半纤维素、甲壳素、木质素等维素、半纤维素、甲壳素、木质素等单糖优于双糖，己糖优于戊糖，淀粉优单糖优于双糖，己糖优于戊糖，淀粉优于纤维素，纯多糖优于杂多糖。于纤维素，纯多糖优于杂多糖。有机酸有机酸糖酸、乳酸、柠檬酸、延胡索酸、低级糖酸、乳酸、柠檬酸、延胡索酸、低级脂肪酸、高级脂肪酸、氨基酸等脂肪酸、高级脂肪酸、氨基酸等与糖类比效果较差，有机酸较难进入细与糖类比效果较差，有机酸较难进入细胞，进入细胞后会导致胞，进入细胞后会导致pHpH下降。当环境下降。当环境中缺乏碳源物质时，氨基

5、酸可被微生物中缺乏碳源物质时，氨基酸可被微生物作为碳源利用。作为碳源利用。醇醇乙醇乙醇在低浓度条件下被某些酵母菌和醋酸菌在低浓度条件下被某些酵母菌和醋酸菌利用。利用。脂脂脂肪、磷脂脂肪、磷脂主要利用脂肪，在特定条件下将磷脂分主要利用脂肪，在特定条件下将磷脂分解为甘油和脂肪酸而加以利用。解为甘油和脂肪酸而加以利用。烃烃天然气、石油、石油馏分、石蜡油等天然气、石油、石油馏分、石蜡油等利用烃的微生物细胞表面有一种由糖脂利用烃的微生物细胞表面有一种由糖脂组成的特殊吸收系统，可将难溶的烃充组成的特殊吸收系统，可将难溶的烃充分乳化后吸收利用。分乳化后吸收利用。COCO2 2COCO2 2为自养微生物所利用

6、。为自养微生物所利用。碳酸盐碳酸盐NaHCONaHCO3 3、CaCOCaCO3 3、白垩等、白垩等为自养微生物所利用。为自养微生物所利用。其他其他芳香族化合物、氰化物芳香族化合物、氰化物蛋白质、核酸等蛋白质、核酸等利用这些物质的微生物在环境保护方面利用这些物质的微生物在环境保护方面有重要作用。有重要作用。当环境中缺乏碳源物质时，可被微生物当环境中缺乏碳源物质时，可被微生物作为碳源而降解利用。作为碳源而降解利用。最适碳源最适碳源 糖糖 醇醇 有机酸有机酸 脂类脂类最适糖类最适糖类 单糖单糖 双糖双糖 多糖多糖最适单糖最适单糖 已糖已糖 戊糖戊糖最适多糖最适多糖 淀粉淀粉 纤维素纤维素 木质素、

7、几丁质木质素、几丁质最适碳源最适碳源 C-H-O异养微生物：异养微生物：凡必须利用有机碳源的微生物凡必须利用有机碳源的微生物自养微生物：自养微生物：以无机碳源作主要碳源的微生物以无机碳源作主要碳源的微生物根据微生物利用的碳源物质不同将其分为根据微生物利用的碳源物质不同将其分为1 1）提供合成细胞物质及代谢物的原料）提供合成细胞物质及代谢物的原料2 2）为）为整个生理活动提供所需要能源（异养微生整个生理活动提供所需要能源（异养微生物）。物）。2、功能：、功能：双功能营养物双功能营养物C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O + 能量（能量（ATP ）凡是能提供微生物生长繁殖所需氮元素的

8、营养源称为凡是能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源称为氮源。氮源。1、氮源谱、氮源谱有机氮有机氮无机氮无机氮NH3铵盐铵盐硝酸盐硝酸盐牛肉膏牛肉膏酵母膏酵母膏蛋白胨蛋白胨尿素尿素（二）氮源（二）氮源分子氮分子氮N2微生物利用的氮源物质微生物利用的氮源物质种类种类氮源物质氮源物质元素元素水平水平备注备注蛋白蛋白质类质类蛋白质及其不蛋白质及其不同程度降解产同程度降解产物物(胨、肽、氨胨、肽、氨基酸等基酸等)N.C.H.X大分子蛋白质难进入细胞，一些真菌和少数细大分子蛋白质难进入细胞，一些真菌和少数细菌能分泌胞外蛋白酶，将大分子蛋白质降解利菌能分泌胞外蛋白酶，将大分子蛋白质降解利用，而多数细菌只能

9、利用相对分子质量较小其用，而多数细菌只能利用相对分子质量较小其降解产物降解产物氨及氨及铵盐铵盐NH3、(NH4)2SO4等等NH容易被微生物吸收利用容易被微生物吸收利用硝酸硝酸盐盐KNO3等等N.O容易被微生物吸收利用容易被微生物吸收利用分子分子氮氮N2N固氮微生物可利用，但当环境中有化合态氮源固氮微生物可利用，但当环境中有化合态氮源时，固氮微生物就失去固氮能力时，固氮微生物就失去固氮能力其他其他嘌呤、嘧啶、嘌呤、嘧啶、脲、胺、酰胺、脲、胺、酰胺、氰化物氰化物大肠杆菌不能以嘧啶作为唯一氮源，在氮限量大肠杆菌不能以嘧啶作为唯一氮源，在氮限量的葡萄糖培养基上生长时，可通过诱导作用先的葡萄糖培养基上

10、生长时，可通过诱导作用先合成分解嘧啶的酶，然后再分解并利用合成分解嘧啶的酶，然后再分解并利用,嘧啶可嘧啶可不同程度地被微生物作为氮源加以利用不同程度地被微生物作为氮源加以利用1）氨基酸自养型微生物：氨基酸自养型微生物：能利用尿素、铵盐、硝酸能利用尿素、铵盐、硝酸盐甚至氮气等简单的氮源自行合成所需的一切氨基酸盐甚至氮气等简单的氮源自行合成所需的一切氨基酸的生物的生物2）氨基酸异养型微生物：氨基酸异养型微生物：凡需要从外界吸收现成的氨基凡需要从外界吸收现成的氨基酸作为氮源的微生物。酸作为氮源的微生物。按氮源的不同微生物可分为：按氮源的不同微生物可分为：1）提供合成细胞中含氮物，如蛋白质、核酸，以）

11、提供合成细胞中含氮物，如蛋白质、核酸，以及含氮代谢物等的原料；及含氮代谢物等的原料； 2）少数细菌可以）少数细菌可以铵盐、硝酸盐等铵盐、硝酸盐等氮源为能源。氮源为能源。2、功能、功能：能源：能为微生物的生命活动提供最初能量来源营养能源：能为微生物的生命活动提供最初能量来源营养物或辐射能物或辐射能1、能源谱、能源谱化学物质化学物质辐射能辐射能化能异养微生物的能源有机物无机物化能自养微生物的能源光能自养和光能异养微生物的能源2、功能：、功能：为微生物生长提供能量为微生物生长提供能量（三）能源（三）能源能源能源单功能营养物单功能营养物-光辐射光辐射双功能营养物双功能营养物-还原态的无机物还原态的无机

12、物NH4+三功能营养物三功能营养物-氨基酸类氨基酸类生长因子：是一类对调节微生物正常代谢所必需，但不能用简生长因子：是一类对调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳源或氮源自行合成或合成量不足以满足机体生长需要的单的碳源或氮源自行合成或合成量不足以满足机体生长需要的的微量有机物。的微量有机物。（四）生长因子（四）生长因子狭义：维生素狭义：维生素 广义：维生素、氨基酸、碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、广义：维生素、氨基酸、碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类、分支或直链脂肪酸胺类、分支或直链脂肪酸 微微 生生 物物 生长因子生长因子 需要量（需要量（ /ml）III型肺炎链球菌（型肺炎链球菌（Stre

13、ptococcus pneumoniae）胆碱胆碱 6 ug金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus） 硫胺素硫胺素 0.5ng白喉棒杆菌（白喉棒杆菌（Cornebacterium diphtherriae） B-丙氨酸丙氨酸 1.5ug破伤风梭状芽孢杆菌（破伤风梭状芽孢杆菌（Clostridium tetani） 尿嘧啶尿嘧啶 0-4ug肠膜状串珠菌（肠膜状串珠菌（Leuconostoc mesenteroides） 吡哆醛吡哆醛 0.025ug根据微生物对矿质元素需要量大小可以把它分成根据微生物对矿质元素需要量大小可以把它分成（五）无机盐（五）无机盐定义：

14、为微生物细胞生长提供碳、氮源以外的各定义：为微生物细胞生长提供碳、氮源以外的各种重要元素（包括大量元素和微量元素）的物质。种重要元素（包括大量元素和微量元素）的物质。 微量元素：微量元素：Cu、Zn、Mn、Mo、Co （微生物生长所需浓度在微生物生长所需浓度在10-610-8mol/L）大量元素：大量元素：P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe （微生物生长所需浓度在微生物生长所需浓度在10-310-4mol/L）无机盐及其生理功能无机盐及其生理功能元素元素化合物形式化合物形式(常用常用)生理功能生理功能磷磷KH2PO4，K2HPO4核酸、核蛋白、磷脂、辅酶及核酸、核蛋白、磷脂、辅酶及ATP等高能

15、分子的成等高能分子的成分，作为缓冲系统调节培养基分，作为缓冲系统调节培养基pH硫硫(NH4)2SO4，MgSO4含硫氨基酸含硫氨基酸(半胱氨酸、甲硫氨酸等半胱氨酸、甲硫氨酸等)、维生素的成、维生素的成分，谷胱甘肽可调节胞内氧化还原电位分，谷胱甘肽可调节胞内氧化还原电位镁镁MgSO4己糖磷酸化酶、异柠檬酸脱氢酶、核酸聚合酶等活己糖磷酸化酶、异柠檬酸脱氢酶、核酸聚合酶等活性中心组分，叶绿素和细菌叶绿素成分性中心组分，叶绿素和细菌叶绿素成分钙钙CaCl2，Ca(NO3)2某些酶的辅因子，维持酶某些酶的辅因子，维持酶(如蛋白酶如蛋白酶)的稳定性，芽的稳定性，芽孢和某些孢子形成所需，建立细菌感受态所需孢

16、和某些孢子形成所需，建立细菌感受态所需钠钠NaCl细胞运输系统组分，维持细胞渗透压，维持某些酶细胞运输系统组分，维持细胞渗透压，维持某些酶的稳定性的稳定性钾钾KH2PO4，K2HPO4某些酶的辅因子，维持细胞渗透压，某些嗜盐细菌某些酶的辅因子，维持细胞渗透压，某些嗜盐细菌核糖体的稳定因子核糖体的稳定因子铁铁FeSO4细胞色素及某些酶的组分，某些铁细菌的能源物质，细胞色素及某些酶的组分，某些铁细菌的能源物质，合成叶绿素、白喉毒素所需合成叶绿素、白喉毒素所需微量元素与生理功能微量元素与生理功能元素元素生理功能生理功能锌锌存在于乙醇脱氢酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、醛缩酶、存在于乙醇脱氢酶、乳酸脱氢酶

17、、碱性磷酸酶、醛缩酶、RNARNA与与DNADNA聚合酶中聚合酶中锰锰存在于过氧化物歧化酶、柠檬酸合成酶中存在于过氧化物歧化酶、柠檬酸合成酶中钼钼存在于硝酸盐还原酶、固氮酶、甲酸脱氢酶中存在于硝酸盐还原酶、固氮酶、甲酸脱氢酶中硒硒存在于甘氨酸还原酶、甲酸脱氢酶中存在于甘氨酸还原酶、甲酸脱氢酶中钴钴存在于谷氨酸变位酶中存在于谷氨酸变位酶中铜铜存在于细胞色素氧化酶中存在于细胞色素氧化酶中钨钨存在于甲酸脱氢酶中存在于甲酸脱氢酶中镍镍存在于脲酶中，为氢细菌生长所必需存在于脲酶中，为氢细菌生长所必需无机盐的功能无机盐的功能3)与酶的组成和活力有关；与酶的组成和活力有关；5）用作某些化能自养细菌的能源）用

18、作某些化能自养细菌的能源6）用作呼吸链末端的氢受体。）用作呼吸链末端的氢受体。1）提供微生物细胞化学组成中的除）提供微生物细胞化学组成中的除C和和N以外的重要以外的重要组成元素组成元素2）参与并稳定微生物的细胞结构；）参与并稳定微生物的细胞结构；4）调节和维持微生物生长过程中诸如渗透压、氢离）调节和维持微生物生长过程中诸如渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位等生长条件子浓度和氧化还原电位等生长条件如如P构成核酸，构成核酸，S构成各种含硫的氨基酸（半胱氨酸和甲硫氨酸）构成各种含硫的氨基酸（半胱氨酸和甲硫氨酸）P参与细胞膜和核酸的基本结构，参与细胞膜和核酸的基本结构，Ca参与细胞芽孢的皮层的组参与细胞

19、芽孢的皮层的组成，成，Mg具有稳定核糖体和细胞膜的作用具有稳定核糖体和细胞膜的作用Mg、Cu、Zn、Ca等为许多酶的激活剂等为许多酶的激活剂, Cu存在于细胞色存在于细胞色素氧化酶中素氧化酶中.Na、K有调节渗透压的作用，磷酸盐缓冲液有调节有调节渗透压的作用，磷酸盐缓冲液有调节PH的稳定的稳定的功能，含硫的的功能，含硫的Na2S和二硫苏糖醇可降低氧化还原电位和二硫苏糖醇可降低氧化还原电位C6H12O66H2O 6CO224H(脱脱H酶）酶）24H+4NO3- 2N2 +12H2O（硝酸还原酶）（硝酸还原酶）2CH3CHOHCOOH+H2SO4 2CH3COOH+2CO2+2H2O+H2S+能量

20、能量l硝酸盐还原细菌在厌氧条件下以硝酸盐还原细菌在厌氧条件下以NO3-作电子受体作电子受体硫酸盐细菌以硫酸盐细菌以SO42-为受体为受体几种生物的几种生物的游离水含量游离水含量人体：人体：60%海蛰：海蛰：96%微生物微生物孢子孢子营养体营养体霉菌孢子：霉菌孢子：39%细菌芽孢：细菌芽孢：皮层：皮层：70%核心：极低核心：极低细菌：细菌：80%酵母：酵母：75%霉菌：霉菌：85%u 水在细胞中有两种存在形式：水在细胞中有两种存在形式： 结合水和游离水结合水和游离水. 不同细胞及不同细胞结构中游离水的含量有较大不同细胞及不同细胞结构中游离水的含量有较大差别。差别。（六）水（六）水主要生理功能：主

21、要生理功能： 起到溶剂与运输介质的作用；起到溶剂与运输介质的作用； 参与细胞内一系列化学反应；参与细胞内一系列化学反应； 维持蛋白质、核酸等生物大分子稳定的天然构象；维持蛋白质、核酸等生物大分子稳定的天然构象；微生物通过水合作用与脱水作用控制由多亚基组成微生物通过水合作用与脱水作用控制由多亚基组成的结构的结构 有效的控制细胞内温度的变化有效的控制细胞内温度的变化;保持充足的水分是细胞维持正常形态的重要因素保持充足的水分是细胞维持正常形态的重要因素;溶剂和运输介质溶剂和运输介质参与化学反应参与化学反应维持生物大分子的天然构象维持生物大分子的天然构象控制体内温度控制体内温度维持细胞的正常形态维持细

22、胞的正常形态控制有多亚基组成的结构控制有多亚基组成的结构合成含氮物质合成含氮物质提供能量提供能量合成含碳物质及细胞结构合成含碳物质及细胞结构提供能量提供能量提供微生物细胞重提供微生物细胞重要的化学物质和辅要的化学物质和辅助因子的组分助因子的组分, , 参参与代谢。与代谢。提供元素；维持细胞提供元素；维持细胞结构的稳定性；与酶结构的稳定性；与酶的组成和活力；用作的组成和活力；用作受氢体；维持渗透压；受氢体；维持渗透压；提供能源提供能源营养物质营养物质水水碳源碳源氮源氮源无机无机盐盐生长生长因子因子能能源源提供能量提供能量根据碳源、能源及氢供体的需求的不同根据碳源、能源及氢供体的需求的不同，可可将

23、微生物分为：将微生物分为：光能无机自养型光能无机自养型(photolithoautotrphy)光能有机异养型光能有机异养型(photoorganoheterotrphy)化能无机自养型化能无机自养型(chemolithoautotrphy)化能有机异养型化能有机异养型(chemoorganoheterotrophy)第二节微生物的营养类型第二节微生物的营养类型1 1光能无机自养型（光能自养型）光能无机自养型（光能自养型）这类微生物利用光作为能源，以这类微生物利用光作为能源，以CO2为基本为基本碳源；还原碳源；还原CO2的的氢供体是还原态无机化合物氢供体是还原态无机化合物（H2O、H2S等）等

24、）真核藻类和蓝细菌真核藻类和蓝细菌紫硫细菌和绿硫细菌紫硫细菌和绿硫细菌碳源碳源氢供体氢供体能源能源2 2光能有机异养型（光能异养型）光能有机异养型（光能异养型）以光为能源，以以光为能源，以CO2CO2或简单的有机碳化合物（甲酸、或简单的有机碳化合物（甲酸、乙酸、丁酸、甲醇、丙酮、乳酸）作为碳源与氢乙酸、丁酸、甲醇、丙酮、乳酸）作为碳源与氢供体营光合生长的微生物。供体营光合生长的微生物。红螺菌科红螺菌科碳源碳源能源能源氢供体氢供体3 3化能无机自养型（化能自养型）化能无机自养型（化能自养型）利用无机化合物氧化过程中释放的能量，以二利用无机化合物氧化过程中释放的能量，以二氧化碳为碳源、氧化碳为碳源

25、、氢供体是还原态无机化合物而氢供体是还原态无机化合物而生长的微生物生长的微生物CO2+4H2 CH4+2H2O产甲烷细菌产甲烷细菌5 56 6. .7 7千千卡卡O OH HO O2 21 1H H2 22 22 2氢供体氢供体能源能源碳源碳源4 4化能有机异养型（化能异养型）化能有机异养型（化能异养型）以有机碳化合物作为能源、碳源和氢供体以有机碳化合物作为能源、碳源和氢供体的微生物的微生物有机物通常既是碳源也是能源；有机物通常既是碳源也是能源；大多数细菌、真菌、原生动物都是化能有机异养型微生物；大多数细菌、真菌、原生动物都是化能有机异养型微生物；所有致病微生物均为化能有机异养型微生物；所有致

26、病微生物均为化能有机异养型微生物；结核杆菌 化能异养型微生物的分类：化能异养型微生物的分类：（生活场所、获取养料方式）生活场所、获取养料方式）兼性寄主菌：既营寄生又营腐生生活的。兼性寄主菌：既营寄生又营腐生生活的。(结核杆菌结核杆菌)寄生菌：只能在活寄主体吸收营养物生活的。寄生菌：只能在活寄主体吸收营养物生活的。腐生菌：利用无生命的有机物作为营养物质。腐生菌：利用无生命的有机物作为营养物质。微生物的营养类型微生物的营养类型 营养类型营养类型能源能源氢供体氢供体碳源碳源举例举例光能光能无机无机自养自养型型光能光能H2 、H2S、S 、H2O等等无机物无机物CO2光合细菌（紫硫光合细菌（紫硫细菌、

27、绿硫细菌、细菌、绿硫细菌、蓝细菌）、藻类蓝细菌）、藻类光能光能有机有机异养异养型型光能光能有机物有机物简单有机简单有机物物红螺细菌红螺细菌化能化能无机无机自养自养型型化学能化学能(无机无机物氧化物氧化)H2 、H2S、Fe2+、NH3或或NO2-等等无机无机物物CO2硝化、硫化、铁、硝化、硫化、铁、氢细菌等氢细菌等化能化能有机有机异养异养型型化学能化学能(有机有机物氧化物氧化)有机物有机物有机物有机物绝大多数细菌和绝大多数细菌和全部真核微生物全部真核微生物紫色非硫细紫色非硫细菌菌无有机物时无有机物时自养型微生物自养型微生物有有机物时有有机物时异养型微生物异养型微生物光照与厌氧时光照与厌氧时光能

28、营养型微生物光能营养型微生物黑暗与好氧时黑暗与好氧时化能营养型微生物化能营养型微生物营养物质能否进入细胞取决于三个方面的因素：营养物质能否进入细胞取决于三个方面的因素：营养物质本身的性质（相对分子量、质量、溶解性、营养物质本身的性质（相对分子量、质量、溶解性、电荷性等电荷性等) )微生物所处的环境（温度、微生物所处的环境（温度、pHpH、渗透压等）；、渗透压等）；微生物细胞的透性屏障微生物细胞的透性屏障（原生质膜、细胞壁、荚膜等）。（原生质膜、细胞壁、荚膜等）。第三节营养物质进入细胞的方式第三节营养物质进入细胞的方式根据物质运输过程的特点根据物质运输过程的特点，可将物质的运输方式分为可将物质的

29、运输方式分为单纯扩散单纯扩散促进扩散促进扩散主动运送主动运送基团移位基团移位一、单纯扩散一、单纯扩散被吸收物质依靠其在细胞内外的浓度梯度为动力，被吸收物质依靠其在细胞内外的浓度梯度为动力，从浓度从浓度高高的部位向浓度的部位向浓度低低的部位的扩散的过程。的部位的扩散的过程。运送的物质主要有：水、脂肪酸、乙醇、甘油、一些运送的物质主要有：水、脂肪酸、乙醇、甘油、一些气体（气体（O2O2、CO2CO2）及某些氨基酸等。及某些氨基酸等。 特特点点 物质在扩散过程中没有发生任何反应；物质在扩散过程中没有发生任何反应； 不消耗能量；不消耗能量； 运输速率与膜内外物质的浓度差成正比运输速率与膜内外物质的浓度

30、差成正比 不能逆浓度运输；不能逆浓度运输；二、促进扩散（协助扩散）二、促进扩散（协助扩散）以细胞内外的浓度梯度为动力，在以细胞内外的浓度梯度为动力，在载体蛋白载体蛋白参与下，物质参与下，物质从浓度从浓度高高的胞外向浓度的胞外向浓度低低的胞内扩散。的胞内扩散。促进扩散模式图促进扩散模式图细胞膜细胞膜外细胞膜内恢复原构象移位再循环结合结合构象改变 通过促进扩散进入细胞的营养物质主要有氨基通过促进扩散进入细胞的营养物质主要有氨基酸、单糖、维生素及无机盐等。酸、单糖、维生素及无机盐等。载体蛋白特点：载体蛋白特点：1、具有、具有特异性特异性，一般微生物通过专一的载体蛋白运输相应，一般微生物通过专一的载体

31、蛋白运输相应的物质，但也有微生物对同一物质的运输由一种以上的载体的物质，但也有微生物对同一物质的运输由一种以上的载体蛋白来完成。蛋白来完成。2、其构象发生改变不消耗能量、其构象发生改变不消耗能量 参与运输的物质本身的分子结构不发生变化参与运输的物质本身的分子结构不发生变化不消耗能量不消耗能量不能进行逆浓度运输不能进行逆浓度运输运输速率与膜内外物质的浓度差成正比运输速率与膜内外物质的浓度差成正比需要载体参与需要载体参与三、主动运送：为微生物吸收营养的主要方式三、主动运送：为微生物吸收营养的主要方式需要从外界提供需要从外界提供能量能量，由载体蛋白参与的，由载体蛋白参与的逆浓度逆浓度梯度梯度的物质转

32、运方式称为的物质转运方式称为-细胞膜细胞膜外细胞膜内恢复原构象移位再循环结合构象改变ADP+PiATP转运的物质：无机离子、糖、氨基酸和有机酸等转运的物质：无机离子、糖、氨基酸和有机酸等可以进行逆浓度运输可以进行逆浓度运输物质运输过程中需要消耗能量物质运输过程中需要消耗能量物质运输过程中需要载体物质运输过程中需要载体四、基团移位四、基团移位基团移位是一类既需要基团移位是一类既需要载体蛋白载体蛋白的参与，又需要的参与，又需要消耗能量消耗能量的物质运送方式，且的物质运送方式，且溶质溶质在运送前后还会在运送前后还会发发生分子结构的变化生分子结构的变化。大肠杆菌吸收葡萄糖采用的是磷酸转移酶系统（大肠杆

33、菌吸收葡萄糖采用的是磷酸转移酶系统（PTS），即磷酸烯醇式丙酮酸即磷酸烯醇式丙酮酸己糖磷酸转移酶运输系统。己糖磷酸转移酶运输系统。PTS 通常由五种蛋白质组成，包括酶通常由五种蛋白质组成，包括酶I、酶酶II（包括包括a、b、c三三种亚基）和一种低相对分子量的热稳定蛋白质（种亚基）和一种低相对分子量的热稳定蛋白质（HPr）。）。运送的物质主要有：各种糖类、核苷酸、丁酸和腺嘌呤等物质运送的物质主要有：各种糖类、核苷酸、丁酸和腺嘌呤等物质运送步骤运送步骤: :1.1.热稳载体蛋白热稳载体蛋白( (HPr)HPr)的激活的激活 磷酸烯酸式丙酮酸（磷酸烯酸式丙酮酸（PEPPEP）+HPr +HPr 丙酮

34、酸丙酮酸+ +P PHPrHPr2、糖被磷酸化后运入膜内、糖被磷酸化后运入膜内 酶酶II PHPr+糖糖 糖糖P +HPr酶酶I在酶的作用下HPr被激活在酶的作用下P-HPr将磷酸转移给糖大肠杆菌磷酸转移酶体系与葡萄糖的运输需要能量需要能量需要载体需要载体可以逆浓度运输可以逆浓度运输运送物质结构在运输过程中会发生化学变化运送物质结构在运输过程中会发生化学变化营营养养物物质质运运送送入入细细胞胞的的4种种方方式式 比较项目比较项目单纯扩散单纯扩散促进扩散促进扩散主动运输主动运输基团转位基团转位特异载体蛋白特异载体蛋白运输速度运输速度物质运输方向物质运输方向胞内外浓度胞内外浓度运输分子运输分子能量

35、消耗能量消耗运输后物质的结构运输后物质的结构无无慢慢由浓至稀由浓至稀相等相等无特异性无特异性不需要不需要不变不变有有快快由浓至稀由浓至稀相等相等特异性特异性不需要不需要不变不变有有快快由稀至浓由稀至浓胞内浓度高胞内浓度高特异性特异性需要需要不变不变有有快快由稀至浓由稀至浓胞内浓度高胞内浓度高特异性特异性需要需要改变改变培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。谢产物用的混合营养料。特点：特点：1 1、任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要、任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素素碳源、氮源、无机盐、能源、

36、生长因子、水碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水2 2、任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理、任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理；第四节培养基第四节培养基用途：用途：促使微生物生长；积累代谢产物；分离微生物菌种；鉴促使微生物生长；积累代谢产物；分离微生物菌种；鉴定微生物种类；微生物细胞计数；菌种保藏；制备微生定微生物种类；微生物细胞计数；菌种保藏；制备微生物制品。物制品。一、选用和设计培养基的原则和方法一、选用和设计培养基的原则和方法目的明确目的明确营养协调营养协调理化条件适宜理化条件适宜经济节约经济节约1、目的明确、目的明确1 1）何菌）何菌培养培养化能自养型化能自养型的氧化硫杆

37、菌的培养基组成为：的氧化硫杆菌的培养基组成为：S 10g MgSOS 10g MgSO4 4.7H.7H2 2O 0.5g O 0.5g （NHNH4 4) )2 2SOSO4 4 0.4g 0.4g FeSOFeSO4 4 0.01g H 0.01g H2 2POPO4 4 4g CaCl 4g CaCl2 2 0.25g H 0.25g H2 2O 1000mlO 1000ml培养培养化能异养化能异养的大肠杆菌一种培养基是由下列化学成分组成：的大肠杆菌一种培养基是由下列化学成分组成：葡萄糖葡萄糖 5 5g NHg NH4 4H H2 2POPO4 4 1g NaCl 5g MgSO 1g

38、NaCl 5g MgSO4.4.7H2O 7H2O 0.2g K0.2g K2 2HPOHPO4 4 1g H 1g H2 2O 1000mlO 1000ml2 2）何产物）何产物获得菌体获得菌体N源高源高一些；一些；获得代谢产物获得代谢产物N源低源低一些一些3 3）何规模）何规模实验室培养、种子培养、发酵培养实验室培养、种子培养、发酵培养常见的培养四大类微生物的培养基常见的培养四大类微生物的培养基细菌（牛肉膏蛋白胨培养基）：细菌（牛肉膏蛋白胨培养基）：牛肉膏牛肉膏 3 3g g 蛋白胨蛋白胨 10 10g NaCl 5g Hg NaCl 5g H2 2O 1000mlO 1000ml放线菌（

39、高氏放线菌（高氏1 1号）号）淀粉淀粉 20 20g Kg K2 2HPOHPO4 4 0.5g NaCl 0.5g MgSO 0.5g NaCl 0.5g MgSO4 4.7H.7H2 2O 0.5g O 0.5g KNOKNO3 3 1g FeSO 1g FeSO4 4 0.01g H 0.01g H2 2O 1000mlO 1000ml酵母菌酵母菌( (麦芽汁培养基麦芽汁培养基) )葡萄糖葡萄糖1g KCl1.8g 1g KCl1.8g 酵母浸膏酵母浸膏2.5g 2.5g 醋酸钠醋酸钠8.2g 8.2g H2O 1000ml霉菌（查氏合成培养基）霉菌（查氏合成培养基）NaNONaNO3

40、3 3g K 3g K2 2HPOHPO4 4 1g KCl 0.5g MgSO 1g KCl 0.5g MgSO4 4.7H.7H2 2O 0.5g O 0.5g FeSOFeSO4 4 0.01g 0.01g 蔗糖蔗糖 30 30g Hg H2 2O 1000mlO 1000ml2、营养协调、营养协调1）选择适宜的营养物质）选择适宜的营养物质 2）营养物质浓度及配比合适）营养物质浓度及配比合适培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累对大多数微生物来说，它们各种营养物质的比

41、例大体对大多数微生物来说，它们各种营养物质的比例大体 水水 碳源碳源 氮源氮源 P/ S K/ Mg 生长因子生长因子10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6其中碳氮比（其中碳氮比（C/N）的影响较大的影响较大碳氮比碳氮比指微生物培养基中所含碳源中碳原子的指微生物培养基中所含碳源中碳原子的摩尔数与氮源中氮原子的摩尔数之比。摩尔数与氮源中氮原子的摩尔数之比。例：谷氨酸生产中例：谷氨酸生产中 C/N 3/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；C/N4/1 时，菌体生长受抑制，而谷氨酸大量增加。时，菌体生长受抑制，而谷氨酸大量增加。真菌需真菌需C/N较高

42、的培养基，相当于动物的较高的培养基，相当于动物的“素食素食”细菌尤其是动物病原菌需细菌尤其是动物病原菌需C/N比较低，相当于动物的比较低，相当于动物的“荤荤食食”。3、理化条件适宜、理化条件适宜pH水活度水活度氧化还原电势氧化还原电势渗透压渗透压1） pH培养基的培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。微生物的生长繁殖或产生代谢产物。通常培养条件：通常培养条件：细菌：细菌：pH6.57.5放线菌：放线菌：pH7.58.5酵母菌：酵母菌：pH3.86.0霉菌：霉菌：pH4.05.8磷酸缓冲液：磷酸缓冲液：pH值从值从

43、6.07.6之间之间K2HPO4+HCl KH2PO4+KClKH2PO4+KOH K2HPO4+H2O加入加入CaCO3：CO32 HCO3 H2CO3 CO2+H2O+H+H+H+H培养基中所含氨基酸、肽、蛋白质等物质也可起到缓冲作用。培养基中所含氨基酸、肽、蛋白质等物质也可起到缓冲作用。为了维持培养基为了维持培养基pH值的相对恒定，通常采用下列两种方值的相对恒定，通常采用下列两种方式：式：u内源调节：内源调节：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；调节培养基的碳氮比。调节培养基的碳氮比。u外源调节：外源调节：按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液按实

44、际需要不断向发酵液流加酸或碱液2）渗透压）渗透压等渗溶液等渗溶液适宜微生物生长适宜微生物生长高渗溶液高渗溶液细胞发生质壁分离细胞发生质壁分离低渗溶液低渗溶液细胞吸水膨胀，直至破裂细胞吸水膨胀，直至破裂3) 水活度水活度在天然或人工环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含在天然或人工环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量量. .一般用在一定的温度和压力条件下一般用在一定的温度和压力条件下, ,溶液的蒸汽压力与同样条溶液的蒸汽压力与同样条件下纯水蒸汽压力之比表示，即：件下纯水蒸汽压力之比表示，即：w=P/Pw=P/Po o式中式中P P代表溶液蒸汽压力代表溶液蒸汽压力, , P PO

45、O代表纯水蒸汽压力。代表纯水蒸汽压力。纯水纯水ww为为1.00,1.00,溶液中溶质越多溶液中溶质越多, , ww越小越小。微生物一般在微生物一般在ww为为0.600.600.990.99的条件下生长的条件下生长, , ww过低时过低时, ,微生物生长的迟缓期延长微生物生长的迟缓期延长, ,比生长速率和总生长量减少。比生长速率和总生长量减少。微生物不同，其生长的最适微生物不同，其生长的最适ww不同。不同。各种微生物生长繁殖范围和各种食品的水活度4) 氧化还原电势氧化还原电势氧化还原电势又称氧化还原电位（氧化还原电势又称氧化还原电位（redox potential），），是度量是度量某氧化还原系

46、统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势某氧化还原系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标，其单位是的一种指标，其单位是V（伏）或伏）或mV（毫伏）。毫伏）。不同类型微生物生长对氧化还原电位的要求不同不同类型微生物生长对氧化还原电位的要求不同高高 +0.1V 低低好氧好氧兼性兼性厌氧厌氧调节调节增加：搅拌、振荡、加氧化剂增加：搅拌、振荡、加氧化剂降低：驱除氧气、加入还原剂降低：驱除氧气、加入还原剂4. 经济节约经济节约以粗代精以粗代精以野代家以野代家以废代好以废代好以国代进以国代进以简代繁以简代繁以氮代朊以氮代朊以烃代粮以烃代粮以纤代糖以纤代糖研究某种微生物的培养条件；研究某种微生

47、物的培养条件；设计特定微生物的培养基配方；设计特定微生物的培养基配方；确定特定微生物的最佳培养条件；确定特定微生物的最佳培养条件；1）不同培养基配方的比较）不同培养基配方的比较2）单成分来源和数量的比较）单成分来源和数量的比较3）几种成分浓度比例调配的比较）几种成分浓度比例调配的比较4）小型实验放大到大型生产条件的比较）小型实验放大到大型生产条件的比较5）PH和温度实验和温度实验按培养基成分分按培养基成分分按物理性状分按物理性状分按培养基的用途分按培养基的用途分第三节第三节 培养基培养基二、培养基的类型及应用二、培养基的类型及应用培养基类型培养基类型天然培养基天然培养基组合培养基组合培养基半组

48、合培养基半组合培养基基本培养基基本培养基鉴别培养基鉴别培养基选择培养基选择培养基固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基脱水培养基脱水培养基二、培养基的类型二、培养基的类型a. 天然培养基天然培养基 以动物、植物或微生物体包括其提取物为原料配制的培养基。以动物、植物或微生物体包括其提取物为原料配制的培养基。牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏牛肉膏 3.0 克克蛋白胨蛋白胨 10.0 克克食盐食盐 5.0 克克蒸馏水（自来水）蒸馏水（自来水） 1000毫升毫升1、按照培养基成分分：、按照培养基成分分：优点：优点：营养丰富、种类多样、配方方便、价格低廉营养丰富、种

49、类多样、配方方便、价格低廉缺点：缺点：成分不清楚、不稳定成分不清楚、不稳定适用于：适用于：实验室菌种的培养；发酵工业中生产菌种；某些发酵实验室菌种的培养；发酵工业中生产菌种；某些发酵产物的生产产物的生产b. 组合培养基组合培养基 用化学成分和浓度完全清楚的物质配制的培养基。用化学成分和浓度完全清楚的物质配制的培养基。高氏一号合成培养基高氏一号合成培养基 可溶性淀粉可溶性淀粉 20.0克克KNO3 1.0克克K2HPO4 0.5克克MgSO47H2O 0.5 克克NaCl 0.5克克FeSO4 7H2O 溶液溶液2滴（滴（10%）蒸馏水蒸馏水 1000毫升毫升优点：优点：成分清楚、重演性高成分清

50、楚、重演性高缺点：缺点：价格较贵、配制麻烦、微生物生长比较一般价格较贵、配制麻烦、微生物生长比较一般适用于：适用于：营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定或营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定或生物测定等对定量要求较高的研究工作中生物测定等对定量要求较高的研究工作中C.半组合培养基半组合培养基 主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分酵母菌酵母菌(麦芽汁培养基麦芽汁培养基)葡萄糖葡萄糖 1g KCl 1.8g 酵母浸膏酵母浸膏 2.5g 醋酸钠醋酸钠 8.2g H2O 1000ml2、按照培养基的物理性状、按照培养基的物理性

51、状b. 液体培养基液体培养基 未加凝固剂呈液态的培养基称为液体培养基。未加凝固剂呈液态的培养基称为液体培养基。c. 半固体培养基半固体培养基 在液体培养基中加入少量琼脂在液体培养基中加入少量琼脂（0.2-0.5%） 。a. 固体培养基固体培养基在液体培养基中加入在液体培养基中加入凝固剂凝固剂使呈固体状态，称为固体培养基。使呈固体状态，称为固体培养基。(琼琼脂脂1.5-2%)脱水培养基脱水培养基含有除水以外的一切营养成分的商品培养基含有除水以外的一切营养成分的商品培养基固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏 大规模工业

52、生产及在实验室进行微生物的基础理论和应用方面的研究大规模工业生产及在实验室进行微生物的基础理论和应用方面的研究 观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定 琼脂、琼脂、明胶、海藻酸胶、硅胶等明胶、海藻酸胶、硅胶等3、按照培养用途：、按照培养用途：二、培养基的类型二、培养基的类型b. 选择培养基选择培养基 用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。培养基。c. 鉴别培养基鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，通过指示剂的呈色反应，用以鉴别根据微生物的代谢特点，通过指示剂的呈色反应，

53、用以鉴别不同微生物的培养基。不同微生物的培养基。伊红伊红-美蓝培养基美蓝培养基鉴别大肠杆菌鉴别大肠杆菌(菌落小菌落小,绿色光泽绿色光泽)和产气肠杆菌和产气肠杆菌(菌落大菌落大,灰棕色灰棕色)）a. 基本培养基基本培养基 含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物的培养基。含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物的培养基。加富性选择培养基加富性选择培养基-投其所好投其所好抑制性选择培养基抑制性选择培养基-取其所抗取其所抗选择培养基选择培养基鉴别培养基鉴别培养基微微生生物物的的营营养养和和培培养养营养六要素：营养六要素：营养类型：营养类型：进入细胞的方式：进入细胞的方式：培养基配制培养基配制目的明确、营

54、养协调、目的明确、营养协调、理化条件适宜、经济节约理化条件适宜、经济节约培养基培养基类类型及应用型及应用天然培养基、组合培养基、天然培养基、组合培养基、半组合培养基半组合培养基基本培养基、鉴别培养基、基本培养基、鉴别培养基、选择培养基选择培养基碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水光能无机自养型、光能有机异养型、光能无机自养型、光能有机异养型、化能无机自养型、化能有机异养型化能无机自养型、化能有机异养型单纯扩散、促进扩散、单纯扩散、促进扩散、主动运送、基团移位主动运送、基团移位原则：原则：方法：方法：按培养基成分分：按培养基成分分：按物理性状分：按物理性状

55、分：固体培养基、液体培养基、固体培养基、液体培养基、半固体培养基、脱水培养基半固体培养基、脱水培养基按培养基的用途分：按培养基的用途分：知识结构知识结构1、大、大 多多 数数 微微 生生 物物 的的 营营 养养 类类 型型 属属 于：于：光光 能能 自自 养养 B. 光光 能能 异异 养养 C. 化化 能能 自自 养养 D. 化化 能能 异异 养养2、蓝、蓝 细细 菌菌 的的 营营 养养 类类 型型 属属 于于:A光光 能能 自自 养养 B. 光光 能能 异异 养养 C化化 能能 自自 养养 D. 化化 能能 异异 养养3、碳、碳 素素 营营 养养 物物 质质 的的 主主 要要 功功 能能 是

56、是:A.构构 成成 细细 胞物胞物 质质 B.提提 供供 能能 量量 C.A,B 两两 者者4、占、占 微微 生生 物物 细细 胞胞 总总 重重 量量 70%-90% 以以 上上 的的 细细 胞组胞组 分分 是是:A.碳碳 素素 物物 质质 B.氮氮 素素 物物 质质 C.水水5、能、能 用用 分分 子子 氮氮 作作 氮氮 源源 的的 微微 生生 物物 有：有：A.酵酵 母母 菌菌 B.蓝蓝 细细 菌菌 C.苏苏 云云 金金 杆杆 菌菌6、腐、腐 生生 型型 微微 生生 物物 的的 特特 征征 是是：A.以以 死死 的的 有有 机机 物物 作作 营营 养养 物物 质质B.以以 有有 生生 命命

57、 活活 性性 的的 有有 机机 物物 作作 营营 养养 物物 质质C.A,B 两两 者者7、自、自 养养 型型 微微 生生 物物 和和 异异 养养 型型 微微 生生 物物 的的 主主 要要 差差 别是：别是：A.所所 需需 能能 源物源物 质质 不不 同同 B.所所 需需 碳碳 源不源不 同同 C.所所 需需 氮氮 源不源不 同同8、基、基 团团 转转 位位 和和 主主 动动 运运 输输 的的 主主 要要 差差 别别 是：是：A.运运 输输 中中 需要需要 各各 种种 载载 体体 参参 与与 B.需需 要要 消消 耗能耗能 量量 C.改改 变变 了了 被运被运 输输 物物 质质 的的 化化 学

58、学 结结 构构9、单、单 纯纯 扩扩 散散 和和 促促 进进 扩扩 散散 的的 主主 要要 区区 别别 是：是：A.物物 质质 运运 输的输的 浓浓 度度 梯梯 度度 不不 同同B.前前 者者 不不 需能需能 量量 , 后后 者者 需需 要要 能能 量量C. 前前 者者 不不 需需 要要 载载 体体 , 后后 者者 需需 要要 载载 体体10、微、微 生生 物物 生生 长长 所所 需需 要要 的的 生生 长长 因因 子子 ( 生生 长长 因因 素素 ) 是：是：A.微微 量量 元元 素素 B.氨氨 基基 酸酸 和碱和碱 基基C.维维 生生 素素 D.B,C 二二 者者11、能、能 用用 分分

59、子子 氮氮 作作 氮氮 源源 的的 微微 生生 物物 有：有：A.酵酵 母母 菌菌 B.蓝蓝 细细 菌菌 C.苏苏 云云 金金 杆杆 菌菌12、自、自 养养 型型 微微 生生 物物 和和 异异 养养 型型 微微 生生 物物 的的 主主 要要 差差 别是：别是：A.所所 需需 能能 源物源物 质质 不不 同同 B.所所 需需 碳碳 源不源不 同同 C.所所 需需 氮氮 源不源不 同同13、基、基 团团 转转 位位 和和 主主 动动 运运 输输 的的 主主 要要 差差 别别 是：是：A.运运 输输 中中 需要需要 各各 种种 载载 体体 参参 与与 B.需需 要要 消消 耗能耗能 量量 C.改改

60、变变 了了 被运被运 输输 物物 质质 的的 化化 学学 结结 构构14、单、单 纯纯 扩扩 散散 和和 促促 进进 扩扩 散散 的的 主主 要要 区区 别别 是：是：A.物物 质质 运运 输的输的 浓浓 度度 梯梯 度度 不不 同同B.前前 者者 不不 需能需能 量量 , 后后 者者 需需 要要 能能 量量C. 前前 者者 不不 需需 要要 载载 体体 , 后后 者者 需需 要要 载载 体体15、细、细 菌菌 中中 存存 在在 的的 一一 种种 主主 要要 运运 输输 方方 式式 为：为：A.单单 纯纯 扩扩 散散 B.促促 进进 扩扩 散散 C.主主 动动 运运 输输 D.基基 团团 转转