微生物霉菌、放线菌的形态综述

1、霉菌、放线菌形态观察实验四 1 1、学习并掌握放线菌和霉菌形态观察的、学习并掌握放线菌和霉菌形态观察的基本方法；基本方法； 2 2、初步了解放线菌和霉菌的形态特征、初步了解放线菌和霉菌的形态特征实验目的实验原理v放线菌和霉菌等微生物常具有发达的菌丝体。放线放线菌和霉菌等微生物常具有发达的菌丝体。放线菌的菌丝一般无隔、分枝，菌丝直径与细菌相似。菌的菌丝一般无隔、分枝，菌丝直径与细菌相似。霉菌的菌丝比放线菌大得多，分为无隔菌丝和有隔霉菌的菌丝比放线菌大得多，分为无隔菌丝和有隔菌丝。菌丝从功能上可分为基内菌丝、气生菌丝和菌丝。菌丝从功能上可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝。孢子丝。v由于基内菌丝（营养

2、菌丝）与培养基结合紧密，很由于基内菌丝（营养菌丝）与培养基结合紧密，很难直接用接种工具挑取，因此，如果采用常规的制难直接用接种工具挑取，因此，如果采用常规的制片方法，将很难观察到直观和自然生长状态下的菌片方法，将很难观察到直观和自然生长状态下的菌丝体或孢子丝形态。本实验介绍的丝体或孢子丝形态。本实验介绍的插片法、玻璃纸插片法、玻璃纸法、载玻片法法、载玻片法等可以解决上述不足。等可以解决上述不足。v插片法：插片法：平板接种平板接种 插上灭菌盖玻片插上灭菌盖玻片 菌丝沿培养基表面与盖玻片的交接处生长菌丝沿培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上而附着在盖玻片上 取盖玻片镜检观取盖玻片镜检观察

3、察v玻璃纸法：玻璃纸法：灭菌的玻璃纸覆盖在培养基上灭菌的玻璃纸覆盖在培养基上 在玻璃纸上接种在玻璃纸上接种 培养后，在玻璃纸上形成菌培养后，在玻璃纸上形成菌苔苔 揭下玻璃纸，直接镜检揭下玻璃纸，直接镜检 （以上两种方法可观察到放线菌自然生长状态下的以上两种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，便于观察不同生长期的形态）特征，便于观察不同生长期的形态）u 载玻片培养观察法 用无菌操作将培养基琼脂用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养。培养后盖上盖玻片培养。培养一定时间后，将载玻片的一定时间后，将载玻片的培养物直接放在显微镜下培养物直接放在显微镜下观察

4、。该法既可以保持霉观察。该法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物观察不同发育期的培养物u水浸片观察法 将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝染色将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片观察。该制片的液中，制成霉菌制片观察。该制片的特点是：细胞不变形；具有防腐作用特点是：细胞不变形；具有防腐作用不易干燥，能保持较长时间；且能防不易干燥，能保持较长时间；且能防止孢子飞散；染液的蓝色能增强反差止孢子飞散；染液的蓝色能增强反差v实验器材实验器材1 1）菌种：）菌种：青霉青霉2 2）染色液：）染色液：乳酸石炭酸棉蓝乳酸石炭酸棉蓝3 3）仪器：）仪器：载玻片、盖玻片、

5、解剖针、载玻片、盖玻片、解剖针、 镊子、显微镜等镊子、显微镜等u水浸片观察法（1 1）加染液加染液：加一滴乳酸石炭酸棉蓝液于洁净：加一滴乳酸石炭酸棉蓝液于洁净的载玻片中央。的载玻片中央。（2 2）挑菌：挑菌：用镊子（或解剖针）从菌落的边缘用镊子（或解剖针）从菌落的边缘处挑取少量带有孢子的霉菌菌丝，放入乳酸处挑取少量带有孢子的霉菌菌丝，放入乳酸石炭酸棉蓝染液中。石炭酸棉蓝染液中。（3 3）盖片：盖片：用解剖针细心地把菌丝挑散开，加用解剖针细心地把菌丝挑散开，加盖玻片。盖玻片。（4 4）观察：观察：置于显微镜下观察。先用低倍镜观置于显微镜下观察。先用低倍镜观察菌丝体形态，再转换高倍镜。察菌丝体形态

6、，再转换高倍镜。 v注意：注意：取菌时，青霉和曲霉与培养基结合紧取菌时，青霉和曲霉与培养基结合紧密，不易挑取，可连少量培养基一起挑取，密，不易挑取，可连少量培养基一起挑取，再在染液中分离菌丝。再在染液中分离菌丝。黑曲霉黑曲霉青青 霉霉黑曲霉（黑曲霉（电镜下电镜下）青霉（青霉（电镜下电镜下）v根霉根霉实验安排（实验安排（ 4人人/组组）一、器皿包扎和灭菌一、器皿包扎和灭菌 （1）培养皿）培养皿9只（报纸包扎）只（报纸包扎） （2）干热灭菌（）干热灭菌（160 ，2h）二、制备无菌水二、制备无菌水 （1）250mL三角瓶：内装玻璃珠和三角瓶：内装玻璃珠和90mL水水 （2）试管）试管6支：分装支：分装9mL水水/支支 （3）牛皮纸包扎，高压蒸汽灭菌）牛皮纸包扎，高压蒸汽灭菌(121, 20min)显微镜下观察时，气生菌丝在上，基内菌丝在下，气生显微镜下观察时，气生菌丝在上，基内菌丝在下，气生菌丝颜色较暗，而基内