实验一 小液流法测定植物细胞水势

1、2021/6/161植物生理学实验2021/6/162植物生理学实验室规则植物生理学实验室规则 1、认真预习实验。明确目的，掌握原理，列出步、认真预习实验。明确目的，掌握原理，列出步骤，提出问题。骤，提出问题。 2、认真操作，仔细观察，从实记录。、认真操作，仔细观察，从实记录。 3、正确操作仪器，不乱开仪器。、正确操作仪器，不乱开仪器。 4、注意安全和清洁卫生（包括值日）。、注意安全和清洁卫生（包括值日）。 5、正确处理废物。、正确处理废物。 2021/6/163实验报告要求实验报告要求 实验目的：简明扼要实验目的：简明扼要 实验原理：简明扼要实验原理：简明扼要 材料：用什么？材料：用什么？

2、方法：实际操作过程（文字或图示，简洁）方法：实际操作过程（文字或图示，简洁） 数据计算：原始数据，计算公式，结果。数据计算：原始数据，计算公式，结果。 讨论和分析：针对自己的结果进行，分析错误原因。讨论和分析：针对自己的结果进行，分析错误原因。 实验报告下周二上交。实验报告下周二上交。2021/6/164植物生理学实验评分标准植物生理学实验评分标准 课上：课上： 1、预习报告、预习报告 2、认真实验，操作规范，实验结果符合要求、认真实验，操作规范，实验结果符合要求 3、不迟到，不早退，积极参与卫生清扫、不迟到，不早退，积极参与卫生清扫2021/6/165课下：实验报告评分标准课下：实验报告评分

3、标准 l、卷面清洁，字迹工整、卷面清洁，字迹工整 2、语句通畅，简明扼要，逻辑性强，表达准确，、语句通畅，简明扼要，逻辑性强，表达准确， 无概念错误无概念错误 3、预习报告、实验原始记录、实验报告齐全、预习报告、实验原始记录、实验报告齐全 4、实验报告格式规范，重点突出、实验报告格式规范，重点突出 5、实验原始记录要如实认真记录实际操作、实验原始记录要如实认真记录实际操作、 观察及测定结果观察及测定结果 6、对实验结果的讨论要充分有据，论点要正确，、对实验结果的讨论要充分有据，论点要正确， 与该实验无关的内容不要写入报告中与该实验无关的内容不要写入报告中 7、抄袭别人报告者、抄袭别人报告者 0

4、分分2021/6/166本学期实验内容与安排本学期实验内容与安排 1、植物组织水势的测定、植物组织水势的测定 2、植物体内硝酸还原酶活力的测定、植物体内硝酸还原酶活力的测定 3、溶液培养与矿质元素缺乏症、溶液培养与矿质元素缺乏症* 4、光合作用的、光合作用的Hill反应反应 5、净光合速率的测定与叶绿素的提取和测定、净光合速率的测定与叶绿素的提取和测定 6、植物生长物质的生理效应、植物生长物质的生理效应 7、激动素对离体小麦叶片中超氧化物歧化酶活性、激动素对离体小麦叶片中超氧化物歧化酶活性 的影响的影响 *2021/6/167实验一实验一 植物组织水势的测定植物组织水势的测定 （小液流法）（小

5、液流法）2021/6/168 【实验目的】【实验目的】 掌握一种植物组织中水势的测定方法。掌握一种植物组织中水势的测定方法。2021/6/169植物细胞的水势植物细胞的水势 1.水势（water potential）的概念 ：指每偏摩尔体积水的化学势，是水可以用来作功的能量大小的度量，用w表示。 w ：水的偏摩尔体积 w：水溶液的化学势 w0 ：纯水的化学势wVww-w0VwVw2021/6/1610偏摩尔体积 溶液中水的偏摩尔体积：即在一定温度、压力溶液中水的偏摩尔体积：即在一定温度、压力和浓度下，和浓度下，1mol水在混合物（均匀体系）中所水在混合物（均匀体系）中所占的有效体积。占的有效体

6、积。 1个大气压和个大气压和25，1mol的水的水 体积体积 18ml，但在，但在相同条件下，将相同条件下，将1mol的水加入到大量的水和酒的水加入到大量的水和酒精等摩尔的混合物中时，这种混合物增加的体精等摩尔的混合物中时，这种混合物增加的体积不是积不是18 ml而是而是16.5 ml，16.5 ml就是水的偏就是水的偏摩尔体积。摩尔体积。 2021/6/1611 纯水的水势纯水的水势(w w0 0) )最大最大w w0 0=0=0，植物细，植物细胞的水势都为负值。胞的水势都为负值。 水势的单位：帕（水势的单位：帕（PaPa）、巴）、巴(bar)(bar)、大、大气压气压(atm)(atm)。

7、 1 1巴巴 = 0.987 = 0.987 大气压大气压 = 10 = 105 5 Pa Pa0.1MPa0.1MPa2021/6/1612植物细胞水势的组分 通常认为植物细胞的水势由3部分组成：水势 = 渗透势 + 衬质势 + 压力势 2021/6/1613小液流法小液流法 【实验原理】【实验原理】 植物材料浸入植物材料浸入不同浓度溶液中不同浓度溶液中植物材料水势植物材料水势低于溶液水势低于溶液水势植物材料水势植物材料水势等于溶液水势等于溶液水势植物材料水势植物材料水势高于溶液水势高于溶液水势材料吸水材料吸水外界溶液浓度变大外界溶液浓度变大比重变大比重变大外界溶液浓度不变外界溶液浓度不变比

8、重不变比重不变材料失水材料失水外界溶液浓度变小外界溶液浓度变小比重变小比重变小2021/6/1614浸过材料浸过材料的溶液的溶液滴回滴回同一浓度而未浸过材料同一浓度而未浸过材料的溶液中的溶液中 比重小的液流上浮比重小的液流上浮 比重不变的液流静止比重不变的液流静止比重大的液流下沉比重大的液流下沉 此溶液的水势即等于所测材料的水势此溶液的水势即等于所测材料的水势2021/6/1615 【器材与试剂】【器材与试剂】 实验仪器：试管、离心管、直角弯头的毛细吸管、实验仪器：试管、离心管、直角弯头的毛细吸管、镊子、打孔器（直径镊子、打孔器（直径0.7cm）、解剖针、移液管）、解剖针、移液管 实验试剂：实

9、验试剂： 1mol/L蔗糖溶液、甲基蓝蔗糖溶液、甲基蓝 实验材料：实验材料： 马铃薯马铃薯2021/6/1616 【实验步骤】【实验步骤】 取取8只试管编号，配制只试管编号，配制0.10.8M梯度蔗糖溶液梯度蔗糖溶液2021/6/1617 另取另取8只试管编号为实验组，分别吸取上述溶液只试管编号为实验组，分别吸取上述溶液4ml。 用打孔器打取马铃薯圆柱，切片，放入实验组试用打孔器打取马铃薯圆柱，切片，放入实验组试管中（每管管中（每管5片），放置片），放置30min，其间摇动数次；，其间摇动数次； 每个离心管中挑入少许甲基蓝，摇匀，使溶液呈每个离心管中挑入少许甲基蓝，摇匀，使溶液呈蓝色。蓝色。2

10、021/6/16185. 用毛细吸管从实验组离心管中吸取少量溶液，小用毛细吸管从实验组离心管中吸取少量溶液，小心插入装有相同浓度蔗糖的对照组试管的中部，心插入装有相同浓度蔗糖的对照组试管的中部，缓慢从毛细吸管尖端放出一滴蓝色溶液，轻轻取缓慢从毛细吸管尖端放出一滴蓝色溶液，轻轻取出滴管，观察蓝色液滴的移动方向并记录。出滴管，观察蓝色液滴的移动方向并记录。6. 计算叶片细胞的水势：计算叶片细胞的水势： celloutI cRT 2021/6/1619 【注意事项】【注意事项】 试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液管要各个浓度专用。如只

11、用一支则应从低浓度到高浓度依管要各个浓度专用。如只用一支则应从低浓度到高浓度依次吸取溶液。次吸取溶液。 甲基蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将甲基蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将使实验组各管中溶液的比重均加大。使实验组各管中溶液的比重均加大。 蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，影响结果。影响结果。 释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。 2021/6/1620 【思考题】【思考题】 如果小液滴在各对照溶液中全部上升（或下降），说如果小

12、液滴在各对照溶液中全部上升（或下降），说明什么问题？应如何改进实验设置？明什么问题？应如何改进实验设置？ 2021/6/1621实验二植物组织渗透势的测定（质壁分离法）2021/6/1622一、实验目的观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及测定植物组织渗透势的方法的产生过程及测定植物组织渗透势的方法。2021/6/1623二、实验原理二、实验原理l当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗

13、透势。时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。这种渗透势相等的溶液称为等渗溶液。该溶液这种渗透势相等的溶液称为等渗溶液。该溶液的浓度称为等渗浓度。的浓度称为等渗浓度。2021/6/1624l当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。代入公式即可计算出其渗透势。间的溶液浓度。代入公式即可计算出其渗透势。2021/6/1625三、实验材料三、实验材料l洋葱表皮洋葱表皮2021/6/162

14、6四、实验用具四、实验用具l显微镜显微镜l滤纸滤纸l载玻片载玻片l盖玻片盖玻片l镊子镊子l刀片刀片l解剖针解剖针2021/6/1627五、实验步骤五、实验步骤l切取洋葱表皮，投入切取洋葱表皮，投入18号对照组试管中使之完全浸号对照组试管中使之完全浸没没510分钟。分钟。l依次从试管中取出洋葱表皮放载玻片上（事先滴上同依次从试管中取出洋葱表皮放载玻片上（事先滴上同样浓度蔗糖溶液），盖上盖玻片于显微镜下观察。样浓度蔗糖溶液），盖上盖玻片于显微镜下观察。l确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。2021/6/1628六、实验结果六、实验结果2021/6/1629未发生质壁分离未发生质壁分离2021/6/1630箭头所示角隅处发生初始质壁分离箭头所示角隅处发生初始质壁分离2021/6/1631已在很大程度上发生质壁分离已在很大程度上发生质壁分离2021/6/1632l测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低浓度测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低浓度和不能引起质壁分离的最高浓度平均值之后，和不能引起质壁分离的最高浓度平均值之后，可按下列各式计算在常压下该组织细胞质液的可按下列各式计算在常压下该组织