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1、第一章 绪论一 简答题1. 21世纪是生命科学的世纪。20世纪后叶分子生物学的突破性成就,使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。试阐述分子生物学研究领域的三大基本原则,三大支撑学科和研究的三大主要领域?答案:(1)研究领域的三大基本原则:构成生物大分子的单体是相同的;生物遗传信息表达的中心法则相同;生物大分子单体的排列(核苷酸,氨基酸)导致了生物的特异性。(2)三大支撑学科:细胞学,遗传学和生物化学。(3)研究的三大主要领域:主要研究生物大分子结构与功能的相互关系,其中包括DNA和蛋白质之间的相互作用;激素和受体之间的相互作用;酶和底物之间的相互作用。2. 分子生物学的概念是什么?答案

2、:有人把它定义得很广:从分子的形式来研究生物现象的学科。但是这个定义使分子生物学难以和生物化学区分开来。另一个定义要严格一些,因此更加有用:从分子水平来研究基因结构和功能。从分子角度来解释基因的结构和活性是本书的主要内容。3 二十一世纪生物学的新热点及领域是什么?答案:结构生物学是当前分子生物学中的一个重要前沿学科,它是在分子层次上从结构角度特别是从三维结构的角度来研究和阐明当前生物学中各个前沿领域的重要学科问题,是一个包括生物学、物理学、化学和计算数学等多学科交叉的,以结构(特别是三维结构)测定为手段,以结构与功能关系研究为内容,以阐明生物学功能机制为目的的前沿学科。这门学科的核心内容是蛋白

3、质及其复合物、组装体和由此形成的细胞各类组分的三维结构、运动和相互作用,以及它们与正常生物学功能和异常病理现象的关系。分子发育生物学也是当前分子生物学中的一个重要前沿学科。第2,3章 核酸及基因的结构和功能 习题一 选择题1.一分子DNA核苷酸可能有下列哪一项组成:BA 核糖, 磷酸基团, 和 腺嘌呤. B 磷酸基团, 脱氧核糖, 和胞嘧啶.C 尿嘧啶, 磷酸基团和脱氧核糖. D 胸腺嘧啶, 脱氧核糖,和羟基2. 下列哪一项最准确地代表了细胞中遗传信息的组织水平  DA 基因 核苷酸染色体 基因组 B 基因组 基因核苷酸染色体. C 染色体基因 核苷酸 基因组  

4、 D 核苷酸基因染色体基因组3. 真核细胞和原核细胞的差别在于只有前者含有 DA 核糖体 B 细胞质 C DNA. D 细胞核4. 下面那种原核生物是多种遗传学研究的研究对象? CA 酿酒酵母 B 粗糙脉孢菌 C 大肠杆菌 D 果蝇5.下列哪一元素不会在DNA分子中发现?BA C. B S. C N. D O. 6.下列哪一项只在RNA中存在,而不会在DNA分子中出现?CA P. B腺嘌呤. C 核糖. D  胞嘧啶. 7. DNA分子中的两条多核苷酸链是依赖于哪一种类型的化学键结合在一起的? DA 磷酸二酯键. B 磷酸盐. C 肽键. D&

5、#160;氢键. 8. 组成细菌染色体的DNA形态是 BA 单链. B 环状和超螺旋. C 和组蛋白组合在一起. D 上面全是. 9. 下面哪一种是DNA分子碱基对? AA A-T. B T-C. C A-U. D G-T. 10. 下面哪一种是RNA分子碱基对? DA A-T. B A-C. C U-C. D U-A. 11.在真核生物的染色体中,DNA和组蛋白组成的结构称为 BA proteosomes.蛋白体 B nucleosomes.核小体 C telomeres.端粒 D centromeres.着丝粒12.在转化试验过程中,弗雷德里克格里菲斯观察到致病的肺炎荚

6、膜链球菌菌株形成_A_菌落A光滑,有光泽的 B粗燥, 干燥 C 异常大的 D 不寻常的颜色13. 病毒基因组的可能组成是 CA 仅由RNA组成. B 仅由DNA组成. C RNA 或DNA. D RNA和DNA.14. Hershey 和 Chase利用混合实验得出的主要结论是 BA单基因指导单个多肽的合成. B DNA 是遗传物质C DNA是双螺旋链. D 遗传物质定位在细胞核内15. 在活细胞中最普遍存在的DNA构型是 BA A. B B. C C. D Z16. 基因位于真核生物染色体_C_ 区域时最有可能被转录?A 着丝粒. B端粒. C 常染色质 D 异染色质17. 核苷的基本组成是

7、 AA 戊糖和含N碱基. B 磷酸基团 和含N碱基.C 戊糖和磷酸基团. D 戊糖, 磷酸基团和含N碱基18.  原核生物染色体大多包含 AA只有DNA单一序列. B 只有DNA重复序列C DNA单一序列或DNA重复序列 D DNA单一序列或DNA重复序列19. 制备某生物染色体组, _C_ 时期的染色体被铺在载玻片上并染色. A 间期. B 末期. C 分裂中期 D 后期20 研究发现一条从一未知微生物中发现的染色体中只含有单一序列DNA, 那么这一未知生物最有可能是 B A 病毒 B 细菌. C 真菌 D 原生动物.    21. 在真核生物中,遗传

8、物质存在于什么细胞器?  BA核糖体 B 细胞核 C 内质网. D 细胞质   22.格里菲斯通过实验将死细菌与活细菌提取物混合后注射到老鼠体内是为了证明 CA DNA是双螺旋连 B 真核生物的mRNA和原核生物不同C 某种因子可以将一种细菌类型转变为另外一种 D 如果帮助细胞存在, 细菌可以从热处理中复苏23. 罗莎琳德富兰克林获得的X射线衍射图像的数据表明(选择正确的答案)AA DNA是双螺旋结构,每3.4nm重复一次.B 嘌呤通过氢键和嘧啶连接Purines are hydrogen bonded to pyrimidinesC DNA左手螺旋结构D DNA被组装成核

9、小体24.格里菲斯将不同类型的细菌注射到老鼠体内,请根据注射的细菌类型,判断老鼠是存活还是死亡?Ca. type R b. type S c. heat-killed S d. type R + heat-killed S A 活 活 死 死B 死 活 死 活 C活 死 活 死D 死 死 活 活 二 填空题1基因敲除(Gene knock-out)即是(将特定基因失活的过程),它是研究(基因功能)的一种反向遗传学方法。2(假基因pseudogene)是与有功能的基因在基因结构的组成上非常相似,却不具表达功能的基因。3在原核生物的基因表达调控中,因为没有核膜,(转录)和(转录)是耦联的。4一个核

10、小体由两拷贝的(H2A),(H2B),(H3),(H4)组蛋白,一拷贝组蛋白(H1),and (200)bp of DNA.三 简答题1 从化学(键)的角度,说明双链DNA比较稳定的原因 答案: 碱基之间的氢键以及疏水的碱基堆积力。2 Chargaff规则的内容是什么? 答案:在双螺旋DNA结构中,A%=T% 和 G%=C%. 腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相等,即A=T;鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔数相等,即G=C;含氨基的碱基(A和C)总数等于含酮基的碱基(G和T)总数,即A+C=G+T;嘌呤的总数等于嘧啶的总数,即A+G=C+T。3 使DNA超螺旋化需要能量,并可使生物学事件有序进行。超螺旋中的能量的

11、主要用于哪两种生化作用? 答案:超螺旋中的能量可以使双链分开,用于以下DNA复制和DNA转录两种反应4 You have isolated a plasmid DNA that is a closed circular molecular 1050 bp in length with 5 negative supercoils. What are the linking number, helical turns, writhe, and superhelical density? 你分离出的质粒DNA为1050 bp长度的共价闭合环状分子,具5个负超螺旋。请问这个DNA分子的连接数(L)、螺

12、旋数(缠绕数T)、扭曲数(W)、以及超螺旋密度是多少? 答案:Writhe = W = -5;helical turns = T = 1050/10.5 = 100;L = T + W = 100 +(-5)= 95Superhelical density = = W/T = -5/100 = -0.055 什么是假基因?你如何识别出假基因? 答案:假基因是指与正常基因结构相似,但丧失正常功能的DNA序列,即不能翻译出有功能蛋白质的基因。 can be recognized by the occurrence of one or more mutations that obviously re

13、nder them non-functional.可以利用补偿其功能的突变体而区分出假基因。6. 在真核细胞中,DNA被包装成染色质,其重复单元为核小体。(1)每个核小体单元是由什么组成的?(2)DNA被包装后,对转录会产生怎样的影响后果?答案: (1)每个核小体单元由146 bp核心DNA和各两分子的组蛋白H2A、H2B、H3、H4组成的八聚体构成。(2)DNA被包装成染色质结构后,会抑制转录。因为这一结构能够阻止转录机构及转录因子与DNA之间的相互接近。7在核小体中,每个组蛋白二聚体分别由哪几种组蛋白组成?答案:H 组蛋白H3 和H4 形成一个二聚体;组蛋白H2A 和 H2B形成另一个二聚

14、体。8通过对DNA晶体的X-射线衍射分析,鉴定出了DNA的不同形式。DNA分子的二级结构存在三种不同的构型即A-DNA、B-DNA、Z-DNA,每一种构型各有其独特的分子特征。(1)在活的生物细胞中,普遍存在的分子构型是哪一种?(2)Z-DNA与B-DNA相比,每圈螺旋含有较多的碱基对数,请进一步说明Z-DNA的结构特点,在活的生物细胞中,Z-DNA具有怎样的功能?(3)在活的生物细胞中,哪一种构型没被发现。答案:(1)B-DNA是活细胞中DNA的普遍存在形式。(2)与B-DNA相比,双螺旋链Z-DNA比较长而且细,并且是左手螺旋结构。 轴贯穿小沟,每个螺旋有12个碱基,和轴的垂直平面呈8.8

15、°夹角;相比较,B-DNA 的轴贯穿碱基,每个螺旋只有10个碱基,和轴的垂直平面呈2°夹角. Z-DNA的大沟不太明显,因为沟很细而且和较平,但B-DNA 的大沟很宽而且较深(介于A-DNA和Z-DNA之间)。 Z-DNA 的小沟及其窄且深,B-DNA的小沟较窄且深度中等。推测含有Z-DNA 的区域将提供左手螺旋的伸展,可以参与到DNA的复制,重组和转录。左手螺旋的伸张将帮助在这些过程中B-DNA区域解螺旋。 Z-DNA 在极端的环境条件下能够更加稳定。 A-DNA只在DNA处于脱水状态下才被发现。所以在活细胞中不会被发现。9Benzer用一般遗传学方法测出T4噬菌体r突变

16、型的一个cistron中含有许多个突变子(或重组子)并且指出一个突变子的大小是1-3个核苷酸,后来证明这是科学上的一个惊人的预见。请回答:(1)他的工作对基因概念的发展有何意义?(2)你能说出在当时的条件下(没有DNA序列分析技术,遗传密码还没发现)用什么样的研究方案能得出一个突变子是13个核苷酸的结论。答案:基因是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。基因内可以较低频率发生基因内的重组,交换。通过大量的成对突变型的杂交,测得其最小的重组频率为0.02%,即0.02个遗传图距。已知T4噬菌体的基因组是1.8×105bp,其长度为1500个图距单位。因

17、此可求算出0.02个遗传图距相当于多少核苷酸:1.8×105÷1500×0.02 = 2.4 bp因此指出一个突变子是1-3个核苷酸,暗示了三联体密码的存在。10比较基因组的大小和基因组复杂性的不同:一个基因组有两个序列,一个是A,另一个是B,各有2000 bp 长。其中一个是由400 bp 的序列重复5次而组成,另一个则由50 bp 的序列重复40次而组成,请问:(1)这个基因组的大小怎样?(2)这个基因组的复杂性如何?答案:基因组的大小是指在基因组中DNA的总量。复杂性是指基因组中所有单一序列的总长度。(1)这个基因组的大小为4000bp;(2)这个基因组的复

18、杂性为450bp11我们有什么证据表明在DNA分子的螺旋构型中,在每一个碱基对中都含有一个嘌呤碱基和一个嘧啶碱基? 答案:. 有两方面的证据支持在DNA分子的螺旋构型中,每一个碱基对中都含有一个嘌呤碱基和一个嘧啶碱基(1)化学成分分析:当Chargaff对多种有机体的双螺旋DNA链的化学成分进行定量分析时发现,嘌呤碱和嘧啶键的含量相同;进一步分析发现腺嘌呤和胸腺嘧啶的含量相等;鸟嘌呤和胞嘧啶的含量相等。解释这一发现的最简单的假说是互补碱基配对的存在,即一条链上的A 和另一条链上的 T 配对, G和 C配对. (2)X-衍射分析:更直接的证据来自于X-衍射分析。通过分析建立了DNA双螺旋结构的外

19、形尺寸,可以来分析已知大小碱基的配对关系。 双螺旋结构的直径是2 nm ,刚好容纳一个嘧啶和一个嘌呤配对, 而对于嘌呤-嘌呤配对则太小,对嘧啶-嘧啶配对则太大。12 Watson 和Crick在其他研究者成果的基础上提出了DNA双螺旋模型,这些研究成果可以划分为两类即DNA的化学组成与DNA的物理结构。请详细阐述这两类研究成果的具体结论。 答案:化学组成即DNA碱基组成的Chargaff规则:腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相等,即A=T;鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔数相等,即G=C;含氨基的碱基(A和C)总数等于含酮基的碱基(G和T)总数,即A+C=G+T;嘌呤的总数等于嘧啶的总数,即A+G=C+T。DNA

20、的碱基组成具有生物种的特异性。物理结构:DNA分子是由核苷酸组成,核苷酸有含氮的碱基、戊糖、磷酸构成。根据富兰克林和威尔金斯的x射线衍射图像表明:DNA分子是一个十分有序的双螺旋结构,每两个相邻碱基平面的垂直距离是3.4Å,每个螺旋包含10个碱基对。13 Hershey-Chase所做的噬菌体转染实验中,为什么32 P只标记在DNA分子中,而35S只标记在蛋白质的外壳上?如果用35S标记的噬菌体去感染细菌,那么在子代病毒中是否会出现带35S标记的病毒?如果是用32 P标记的噬菌体重复实验,那么在子代病毒中是否可以找到带32 P标记的病毒? 答案:因为DNA分子中含大量磷酸基团,不含硫

21、;而蛋白质中部分氨基酸含硫,但都不含磷,所以32 P只标记在DNA分子中,而35S只标记在蛋白质的外壳上。如果用35S标记的噬菌体去感染细菌,那么在子代病毒中不会出现带35S标记的病毒。因为噬菌体感染细菌时其蛋白质外壳并不进入细菌体内,子代噬菌体的蛋白质外壳是在细菌体内新合成的,因此不带标记。如果用32 P标记的噬菌体去感染细菌,那么在子代病毒中会出现带35P标记的病毒。因为噬菌体感染细菌时其核酸部分进入细菌体内,并作为遗传物质传给子代噬菌体,因此在子代噬菌体可以找到带35P标记的病毒。第4章 DNA复制 习题一 选择题1.以大肠杆菌DNA为研究对象,Meselson和Stahl通过实验证明D

22、NA复制是BA 全保留. B 半保留. C 加倍 D  分散.2.已知DNA的复制方式,那么组成DNA双螺旋的两条链分别是AA 一条母链和一条子链.B两条母链和两条子链.C 新合成的两条子链间隔分布着母链strands. D 两条新合成的链 3. DNA聚合酶的功能是AA 以DNA为模板合成DNA B以DNA为模板合成RNA C以RNA为模板合成DNA D以RNA为模板合成RNA 4.为了能够起始DNA的复制,一段短的_B_引物必须预先合成A DNA B RNA C多肽 D组蛋白5. 在大肠杆菌中,哪一种DNA聚合酶对新合成的DNA具有校正功能,能把错配的碱基移去?DA 只

23、有DNA聚合酶I B 只有DNA 聚合酶 III C DNA 聚合酶 I 和III D 所有三种DNA 聚合酶都含有校正功能6. 在DNA合成过程中, 所有DNA聚合酶以什么方向添加核苷酸? CA 从左到右 B 从 3到 5 C 从 5到 3 D 每次合成不止一个方向7. 在真核生物中, DNA复制在细胞周期的哪一期? AA S B G1 C G2 D M8. 下面那一项对DNA合成反应不是必须的?DA dCTPs B 模板DNA C DNA 聚合酶 D钙离子9. DNA 聚合酶催化下面哪两个基团间形成磷酸二酯键CA 5磷酸and a 5羟基基团. B 3磷酸 and a 5羟基基团.C 5磷

24、酸 and a 3羟基基团. D 3磷酸and a 3羟基基团.10. 如果一条链上的核苷酸序列为5-C C A C T G G-3, 则另一条互补链上的DNA序列是? D A 5-C C A C T G G-3 B 3-C C A C T G G-5 C 5-G G T C A C C -3 D 3-G G T G A C C-5 11. 在如大肠杆菌的原核生物中,染色体的复制是AA半不连续和双向的 B 间断,不连续和单向的.C 连续和双向的 D 半不连续和单向的12. DNA聚合酶附带的3 5外切酶活性可以使复制的错误频率下降到DA 1/10. B 1/1,000. C 1/1,000,0

25、00. D 1/1,000,000,00.13. DNA聚合酶的校正活性 将错误的核苷酸从DNA链的_A_ .切除A 3 端 B 5 端 C 3 和 5 端 D 中间14. 在大肠杆菌的染色体上, oriC CA 编码DNA 聚合酶I. B 是结合组蛋白的位点 是DNA复制的起始点. D 编码RNA引物15. 能够解开双螺旋DNA,促进复制的酶是BA 3 5 核酸外切酶. B DNA解旋酶 C DNA 聚合酶.D 拓扑异构酶.16. 当DNA双螺旋链复制时,新合成的5 3 的链被称为AA前导链 B后随链 C模板 D不连续17. 后随链的以什么形式合成?CA连续地. B 保守地. C不连续地 D

26、半不连续地. 18. 下面那种类型的DNA是以滚环复制的形式复制的?DA 噬菌体 B 质粒DNA C 噬菌体 X174 D 上面都是19. 很多类型的哺乳动物癌症细胞有着共同的突出特征是AA 端粒酶活性 B端粒酶活性缺乏 C缺少端粒 D 端粒数目增加20.为了确定大肠杆菌DNA复制起点的位置以及复制的方向是单向的还是双向的,你调查了两种不同实验结果。在这两个实验过程中,大肠杆菌均生长在含有放射性标记的胸腺嘧啶。在你的实验中加入放射性标记的胸腺嘧啶的作用是什么?BA 区分前导链和后随链的不同 B 区分发生复制和没发生复制的不同DNA区段C区分RNA引物和新合成的DNA D区分复制叉和新和成的DN

27、A21.根据放射性实验的结果,关于大肠杆菌DNA复制的描述,下列那一项是正确的?DA 复制发生在染色体上的单一位点 B 复制是双向的C 复制发生在模板链上的特定位点上 D以上全对. 22. 在复制过程中,新合成DNA的校正功能由下面那种酶完成?DA RNA 聚合酶 B 逆转录酶 C 拓扑异构酶 D DNA聚合酶23. 尿嘧啶糖苷酶的功能是CA 去除嘧啶二聚体 B 切除RNA分子中的尿嘧啶C 切除DNA分子中的尿嘧啶 D 切除DNA分子中的尿苷酸 E 切除RNA分子中的尿苷酸24. DNA复制需要一系列的蛋白质促进复制叉的移动,大肠杆菌DNA在体外的复制至少需要那些蛋白质?DA DNA聚合酶、引

28、发酶、SSB和连接酶 B SSB、解链酶、和拓扑异构酶C 连接酶、DNA聚合酶和 D DNA聚合酶、解链酶、SSB和引发酶E 拓扑异构酶、解链酶和DNA聚合酶25. 参与DNA复制的几种酶的作用次序是BA DNA解链酶引发酶DNA聚合酶DNA连接酶切除引物的酶B DNA解链酶引发酶DNA聚合酶切除引物的酶DNA连接酶C 引发酶DNA解链酶DNA聚合酶DNA连接酶切除引物的酶D DNA解链酶引发酶切除引物的酶DNA连接酶DNA聚合酶E DNA聚合酶引发酶DNA解链酶DNA连接酶切除引物的酶26. 将两段寡聚脱氧核苷酸片段5-ACCACGTAACGGA-3和5-GTTAC-3与DNA聚合酶一起加到

29、含有dATP、dGTP、dCTP和dTTP的反应混合物之中,预测反应的终产物被参入的各碱基的比例是CA 2C1T B 1G1T C 3G2T D 3G3T2C E 5T4G3C1A27. 噬菌体x174的基因组是一个由5386个碱基组成的单链DNA,该基因组编码有11种不同的蛋白质,这些蛋白质约有2380个氨基酸残基。这种病毒基因组编码的蛋白质似乎超过了它能编码的能力。对这种现象最好的解释是AA 它的基因组含有重叠基因 B 氨基酸由二联体密码编码C 细胞核糖体翻译它的每一个密码子不止一个 D 蛋白质在使用后即被后加工 二 填空题1DNA复制的方向是从(5)端到(3)端展开。2维持DNA复制的高

30、度忠实性的机制主要有(DNA聚合酶的高度选择性)、(DNA聚合酶的自我校正功能)和(错配修复)。3端粒酶由(RNA)和(蛋白质)两个部分组成,它的生理功能是(维持端粒的完整)。4染色体中参与复制的活性区呈Y型结构,称为(复制叉)。三 简答题1请解释下列术语或概念:(1)前导链和滞后链;(2)因子与全酶。答:(1)前导链是指随着亲本双螺旋的解开而按照5 3方向连续合成的DNA子链,以35方向的亲本链为模板。滞后链是指以53方向的亲本链为模板,不连续合成一系列5 3方向冈崎片断,然后连接成一条完整的子链DNA。滞后链的合成需要若干次引发事件的发生。(2)因子是RNA聚合酶全酶的一个组成成分,RNA

31、聚合酶全酶是由核心酶和因子组成。因子负责对启动子的识别,并起始转录。RNA核心酶负责RNA的合成。是一种特异性因子,能够指导核心酶转录特异的基因。2端粒酶在向染色体末端添加寡聚重复单元时,以什么为模板? 答:端粒酶以自身携带的RNA为模板,聚合端粒的DNA重复单元。因此端粒酶是一种反转录酶,依赖RNA的DNA聚合酶。3在利用飞船进行科学实验过程中,当飞船着陆后,你的任务是确定某一细菌样品DNA复制的方式。你首先使细菌在没有标记的培养基上生长几代,然后转到15N标记的培养基中准确地繁殖一代。你提取细菌样品的DNA并进行CsCl梯度离心,你获得了如下结果: 根据这一结果,你认为DNA是以半保留方式

32、进行复制,但你的观点是不正确的,为什么?请你设计另一个实验方案(用同样的样品和相同的技术手段即CsCl梯度离心)能够有效地将半保留复制和弥散复制这两种复制方式区分开来。Control15N15NExperimental sample14N14N 答: CsCl梯度离心的结果虽然排除了全保留复制的可能性,但不能根据这一结果就可证明DNA的复制是半保留复制,因为弥散复制也会出现同样的结果。用同样的样品和相同的技术手段即CsCl梯度离心将半保留复制和弥散复制区分开来的方法是将DNA样品变性,然后利用碱性CsCl梯度离心技术对单链DNA进行离心,半保留复制会出现两条带,而若是弥散复制则出现一条带,如下

33、图所示:半保留复制弥散复制变性后离心变性后离心变性后离心变性后离心4 科恩伯格从大肠杆菌中分离出了DNA聚合酶,在DNA复制过程中具有一个基本的功能,DNA聚合酶在DNA复制过程中具有什么功能? 答:. DNA聚合酶具有切除在起始DNA复制时合成的RNA引物的功能,并合成一段DNA以取代RNA。执行DNA聚合功能的DNA聚合酶在遇到RNA引物时,就会从DNA链上脱离下来,DNA聚合酶利用自身具有的5,3核酸外切酶的功能切除RNA引物,然后按53方向合成DNA。5 请描述DNA连接酶的分子作用机制。请你推测一下,如果DNA连接酶基因发生温度敏感型突变,则大肠杆菌突变株会产生怎样的表型效应? 答:

34、DNA连接酶可以催化单链DNA两端的3-OH 和5-单磷酸基团之间形成磷酸二酯键 ,封闭缺口。 温度敏感性连接酶突变体在极端温度条件下可能能封闭缺口,使后随链片段化,最终导致细胞死亡。如果以这种突变体为研究对象进行生化实验,DNA复制过程中,细菌细胞被转移至高温条件下,这样在细菌细胞中会有大量的冈崎片段的积累,这将为DNA一条链采取不连续复制提供额外的证据。6. 什么是DNA聚合酶的进行性?如何测定一种DNA聚合酶的进行性? 答:DNA聚合酶的进行性是指某一种DNA聚合酶在催化聚合反应中,从酶与模板结合到与解离的这段时间内,催化了多少脱氧核苷酸的掺入。测定某一DNA聚合酶的进行性,可先让酶与模

35、板结合并进行聚合反应,然后迅速加入大量的非特异性DNA,当DNA聚合酶从模板上解离下来后,由于大量的非特异性DNA稀释了原来的DNA模板,使得DNA聚合酶很难再与原来的模版结合,这样就得到了新合成的DNA片段,通过凝胶电泳可大概知道片段的长度。7尽管DNA聚合酶催化聚合反应既需要模板,又需要引物。但下面的单链DNA却可以直接作为DNA聚合酶的有效的底物。试解释其中的原因,并写出由DNA聚合酶催化而形成的终产物的结构。3- OH-TGGCTCATAGCCGGAGCCCTAACCGTAGACCACGAATAGCATTAGGp -5答:由于此链DNA特殊的碱基组成,使得该DNA能够形成如图所示的茎环

36、结构: GAGCCCTAACCGTAGACCACGAATAGCATTAGGp 5 CTCGGT- OH3GCCGATADNA聚合酶能以该结构的3-OH为引物,以5-端的序列为模板催化聚合反应的进行,但对于DNA聚合酶来讲,在催化聚合反应之前,会通过其35的外切酶活性将末端错配的T水解掉而引入正确的G,然后再进行延伸反应,最终得到的产物是:GAGCCCTAACCGTAGACCACGAATAGCATTAGGp 5 CTCGGGATTGGCATCTGGT GCTTATCGTA ATCC- OH3GCCGATA8 简述维持DNA复制的高度忠实性的机制。 答:维持DNA复制的高度忠实性的机制主要包括:D

37、NA聚合酶的高度选择性;DNA聚合酶所具有的35外切酶活性能够进行自我校正,以切除复制过程中错误掺入的核苷酸;错配修复机制;使用RNA引物也能提高DNA复制的忠实性,因为当DNA在刚开始复制的时候,由于缺乏协同性,所以错误的机会很大,但因为RNA引物最终要被被切除,所以降低了在开始阶段所发生的错误。9 在冈崎提出DNA复制的不连续性观点以后,对于DNA复制过程中两条链都是不连续复制,还是仅仅是后随链才是不连续复制,存在着很大争议。显然前导链的合成不需要不连续复制,但是许多研究者发现经脉冲标记的冈崎片段可以和亲代DNA的两条链杂交,这似乎意味着亲代DNA的两条链都可以作为冈崎片段的模板。试提出一

38、种机制解释前导链的复制也可能产生冈崎片段,并设计一个实验证明你提出的机制。答:前导链似乎也形成小的片断,是因为在一个细胞中,含有微量的dUTP,它在DNA复制过程中有可能代替dTTP掺入到新合成的子链中,由于脱氧尿苷酸不是DNA分子中的正常核苷酸,所以体内修复系统会将它除去。去除的机制是先在尿嘧啶糖苷酶的作用下切除DNA链上的尿嘧啶,然后AP核酸内切酶在AP位点将DNA链切开,然后核酸外切酶将包括AP位点在内的一段DNA链切除,再由DNA聚合酶和连接酶完成修复。AP核酸内切酶的作用必然导致前导链形成小的DNA片断。筛选AP核酸内切酶缺失的大肠杆菌突变株,观察上述现象是否发生。10 端粒是一类特

39、殊的重复序列。端粒序列存在于DNA链的什么部位?具有怎样的功能? 答:端粒是真核生物线性染色体末端的特有的异染色质序列。对大多数有机体而言,端粒是染色体末端简单的高度重复序列,具有种的特异性。这一序列由端粒酶合成,靠近染色体末端而不是最末端序列是端粒相关序列。在不同有机体中,端粒的组成很不相同。在果蝇中,端粒由转座因子LINE家族序列组成。端粒在DNA复制和维持染色体稳定性方面起重要作用。11 端粒解决了线性染色体末端DNA复制的问题。请简要描述这一机制。 答:端粒是短串联重复序列,几乎不编码基因。端粒的复制由端粒酶催化,DNA聚合酶不参与,所以没有复制末端问题。端粒通过与DNA复制完全不同的

40、机制进行复制和维持端粒的长度。 12 请描述端粒酶的结构与功能,包括端粒酶的每一个分子成分。 答:端粒为核糖核蛋白体。由蛋白和RNA成分组成。蛋白部分用于催化T,G 富集的端粒DNA的合成;RNA组分作为C,A富集的模板。 端粒酶是逆转录酶,作为反应模板的RNA是酶的一部分。第五章 突变与修复一 选择题1. GC碱基对突变为AT碱基对,这一突变称为_B_ 突变.A颠换 transversionB转换 transitionC转座 transpositional D 转位translocation2. AT碱基对突变为TA碱基对,这一突变为 _A_ 突变A颠换 transversionB 转换tr

41、ansition C转座 transpositionalD转位 translocation3. 下面哪一突变为无义突变?CA ACG 突变为 ACCB AUG 突变为 UUGC UAC 突变为 UAGD AAA 突变为 UUU4. 一个突变使一个密码子从亮氨酸密码子变为异亮氨酸密码子,这一突变为 B A无义突变B错义突变 missenseC 致死突变lethalD 中性突变neutral5. 一个突变发生使AUU 密码子转变为AUC 密码子. 这两个密码子均编码亮氨酸,这一突变为 C .A 无义突变nonsenseB 错义突变missenseC沉默突变 silent D 中性突变neutral

42、6. AAA 密码子编码赖氨酸,这一密码子被突变为AGA,这一密码子编码赖氨酸类似氨基酸精氨酸,这一突变为_D_ 突变.A 无义突变nonsenseB 错义突变missenseC沉默突变 silent D 中性突变neutral7.核苷酸的缺失或插入会导致 _C_突变的发生。.A 无义突变nonsenseB错义突变 missenseC移码突变 frameshift D中性突变 neutral8. 一个氨基酸合成途径相关基因的突变可以使这一细菌重新合成这一氨基酸,这是 A 突变 A 回复突变reversionB 错义突变missenseC 中性突变neutralD 移码突变frameshift9

43、. 在大肠杆菌细胞中,抑制突变多定位于编码 C 基因内? A 代谢基因metabolic enzymesB 启动子promoters C tRNA 基因D DNA聚合酶.10. 下面哪种突变可以同时发生在细胞?DA 脱氨基B 脱嘌呤depurinationC 脱嘧啶depyrimidinationD 以上所有all of the above11.下面哪些试剂可以诱导DNA突变? DA紫外线辐射 ultraviolet radiationB gamma射线辐射C 5-溴尿嘧啶bromouracil D以上全是12.紫外线造成DNA突变发生的主要形式是 B A 碱基替代a base substit

44、utionB胸腺嘧啶二聚体的形成 creation of thymine dimmersC互变异构D 碱基脱氨基deamination of a base13. 5-溴尿嘧啶是哪一碱基的类似物?AA胸腺嘧啶 thymineB尿嘧啶 uracilC胞嘧啶 cytosineD 腺嘌呤adenine14. 下面哪一碱基的脱氨基作用会在DNA中产生错配的胸腺嘧啶.CA 腺嘌呤adenineB 尿嘧啶uracil C 5-甲基胞嘧啶methylcytocineD 5-溴尿嘧啶bromouracil  15. 一氧化氮可以诱发DNA碱基发生 _B_ 作用A 脱嘌呤depurinationB 脱氨

45、基deaminationC 烷化作用alkylationD 羟基化hydroxylation16. 下面哪种化学试剂通过烷基化DNA的哪种特定碱基?DA 5-溴尿嘧啶B 一氧化氮nitrous oxideC 羟胺hydroxylamineD 乙烷磺基methylmethane sulfonate17.溴化乙锭是一 C 试剂.A 烷基化alkylatingB 脱氨基deaminatingC插入 intercalatingD 羟基化hydroxylating18. 突变是 (选择正确答案)BA由基因重组造成B遗传信息上的可遗传改变C遗传密码的有错误的转录D通常对发生突变的个体的发育有益二 简答题1

46、 在大肠杆菌的一种突变株中,编码tRNA的一个基因发生突变,使tRNA的反密码子由原来的5-GUA-3变为5-UUA-3,这种突变将会产生怎样的效应?请加以解释。 答:正常tRNA识别密码子5-UAC-3,装载酪氨酸。发生突变后,tRNA识别终止密码子5-UAA-3,这会导致mRNA 链上处在核糖体A的无义密码子UAA发生通读(在终止释放因子还没有结合到终止密码子上时),这样,在蛋白质的C末端就会增添多余的氨基酸,mRNAs链上的终止密码子UAG和UGA 不受影响。2.由诱变剂引起的DNA损伤会在DNA复制时带来严重的后果。失去特定的碱基互补配对,复制酶系就不能合成模板链的互补链,而是在经过复

47、制叉后留下一个裂口。(1)大肠杆菌进化形成了怎样的反应来应对因诱变剂而引起的大量DNA损伤?这种反应是如何协同调控的?(2)为什么说这一反应自身是一个错误潜伏的系统,易导致DNA的突变?(3)在recA或 lexA功能丧失的突变体中将会对这个反应体系产生怎样的影响?答:(1) 为了应对大量DAN的损伤,大肠杆菌进化形成了一种应急反应即SOS修复系统。当损伤发生时,RecA蛋白被激活而具有蛋白酶活性,引起LexA蛋白的降解。LexA蛋白作为一种阻遏蛋白能够抑制uvrA、uvrB、uvrC等大约十七个基因的表达,这些基因的产物都是DNA损伤修复过程中所必须的。这些基因是协同被转录的。当这些蛋白因子

48、将损伤的DNA修复后,DNA合成转入正常,RecA蛋白又失去蛋白酶活性,LexA蛋白又得以控制SOS系统的基因表达,从而使SOS系统处于关闭状态。(2)SOS修复系统是一个错误潜伏的系统,在某些情况下会引起DNA的突变,例如,SOS修复系统在修复由紫外线引起的胞嘧啶二聚体时,由于错配,修复系统的酶系在二聚体位点发生延宕,致使形成二聚体的胞嘧啶有足够的时间发生脱氨反应而形成尿嘧啶,从而发生转换突变,由CG变为TA。(3)recA和 lexA基因的产物阻遏参与SOS反应的基因的转录。如果recA和 lexA功能丧失或仅lexA功能丧失,则这些突变体就不能产生有功能的LexA蛋白, SOS反应就处于

49、一种组成型激活状态。如果只是recA失活,那么,即使DNA损伤较为严重也不能激活RecA蛋白,因而LexA蛋白不能被水解,作为阻遏蛋白继续阻遏参与SOS反应的基因的表达。所以recA功能丧失而lexA正常的大肠杆菌突变株缺失SOS修复系统,对紫外线敏感。3在进行琼脂糖凝胶电泳时,随着溴化乙锭量的增加,质粒DNA的迁移速率会发生怎样的变化?请简要说明。答:因为 EtBr局部使DNA的缠绕数下降,获得正超螺旋。起初会使负超螺旋降低,质粒迁移会减慢。如果添加足够的EtBr, 质粒会正超螺旋化并迁移到超螺旋DNA的位置。4 试比较切除修复和光复活机制是如何清除由紫外线诱导形成的嘧啶二聚体的?你可使用什

50、么方法区分这两种机制?答:切出修复需要将嘧啶二聚体切除,换上正常的胸腺嘧啶核苷酸,而光复活机制是通过光复活酶直接破坏嘧啶二聚体的环丁烷从而逆转为正常的胸腺嘧啶核苷酸。可使用3H标记胸腺嘧啶核苷追踪修复过程,如果3H出现在修复的DNA分子上,则修复的方式是切除修复,否则就是光复活机制。5 在DNA中的尿嘧啶是通过那种主要途径形成的,这种改变会产生怎样的有害结果?答:对胞嘧啶的氧化脱氨基作用使 CU,这样转换突变会发生,因为U和A配对,但C和G配对。6 . 阐述尿嘧啶修复系统修复的主要步骤,并列出这一修复系统所需要的酶。答:(1)尿嘧啶糖基化酶去除尿嘧啶,留下完整的糖-P-DNA骨架(2)AP核酸

51、内切酶识别AP(无嘧啶碱基)位点, 并在AP位点两侧切割DNA。 核苷酸切除修复完成修复,即解螺旋酶去除一小段APDNA,DNA聚合酶催化合成新链,连接酶连接缺口。7 由紫外线造成的嘧啶二聚体有多少种修复机制?答:核苷酸切除修复,碱基切除修复,重组修复或者DNA损伤跨越修复等第7,8章 RNA转录及加工一 选择题1. 下列哪一项最能代表转录过程?CA DNA 蛋白质.B RNA蛋白质.C DNA RNA. D DNA DNA. 2. 依赖DNA催化合成RNA的酶是 AA RNA 聚合酶 B逆转录酶 C ATP 合成酶.D DNA聚合酶3. 在所有细胞类型中,主要RNA分子有几类?.CA

52、0;1 . B 2.C 3.D 4.   4. 转录的主要产物是BA DNA B RNA C protein. D phospholipid.5.转录和翻译发生在细胞周期是哪一个时期?DA S B G1 C G2 D 在整个细胞周期中6. 将不同 种类的RNA和其功能配对,每种答案只用一次A_ mRNA a. 帮助氨基酸结合到核糖体上 _ tRNA b. 核糖体的结构组成_ rRNA c. 蛋白编码基因的转录本 _ snRNA d. 在RNA剪接中起作用 A mRNA (c); tRNA (a); rRNA (b); snRNA (d)B mRNA (d); tRNA (b); rR

53、NA (c); snRNA (a)C mRNA (c); tRNA (b); rRNA (d); snRNA (a) D mRNA (a); tRNA (b); rRNA (c); snRNA (d) 8. 转录过程中,RNA聚合酶聚合核苷酸的方向为AA 从5到3 B 从左到右. C 从3到 5 D从右到左9. 下面那种核苷酸不组成RNA? DA ATP B GTP C CTP D TTP10. 下面哪一项不是转录起始所必须的?BA NTPs B引物RNA序列 C RNA 聚合酶 D 模板DNA链11. RNA分子是CA 环状的.B 双链的 C 单链的 D双螺旋链12. 一个基因的DNA序列是 3 -C C A T G C T A- 5,那么从这一基因转录来的mRNA序列为: DA 5-C C A T G C T A- 3 B 3-G G T A C G A T- 5 C 3-A T C G T A C C-5 D 5-G G U A C G A U-3 13.转录起始时RNA聚合酶结合的DNA序列称作:AA启动子.B 操作子.C 起始子 D 终止子14.大肠杆菌基因启动子的-35区的共有序列

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