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文档简介
1、当氯化钠的物质的量浓度为当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol2 molL L时,时,DNADNA的溶解度最的溶解度最大,浓度为大,浓度为 0 014 mol14 molL L时,时,DNADNA的溶解度最低。利用这一的溶解度最低。利用这一原理,可以使原理,可以使DNADNA在盐溶液中在盐溶液中溶解或析出溶解或析出如何经过控制如何经过控制NaClNaCl溶液的浓度使溶液的浓度使DNADNA在在盐溶液中溶解或析出?盐溶液中溶解或析出?, ,没有影响没有影响3 3、适宜的资料:、适宜的资料:2 2、植物细胞、植物细胞植物细胞需求植物细胞需求先用一定的洗涤先用一定的洗涤剂和食盐溶解细剂和食盐溶解细胞膜
2、胞膜 实 例 : 提 取 洋 葱 实 例 : 提 取 洋 葱DNADNA时,在切碎的洋时,在切碎的洋葱中参与一定的洗涤葱中参与一定的洗涤剂和食盐,进展充分剂和食盐,进展充分的搅拌和研磨,过滤的搅拌和研磨,过滤后搜集研磨液后搜集研磨液讨论:假设研磨不充分,会对讨论:假设研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?实验结果产生怎样的影响?详细做法。详细做法。10mL鸡血鸡血20mL蒸馏水蒸馏水同同方向搅拌方向搅拌3层尼龙布过滤层尼龙布过滤滤液滤液方案一、在滤液中参与方案一、在滤液中参与NaClNaCl,使,使NaClNaCl溶液浓度溶液浓度为为2mol/L2mol/L,过滤除去不溶的杂质,再参与蒸馏,
3、过滤除去不溶的杂质,再参与蒸馏水,调理水,调理NaClNaCl溶液浓度为溶液浓度为0.14mol/L0.14mol/L,析出,析出DNADNA,过滤除去溶液中的杂质,在用,过滤除去溶液中的杂质,在用2mol/L2mol/L的的NaClNaCl溶液溶解溶液溶解DNADNA。 方案二、直接在滤液中参与嫩肉粉,反响方案二、直接在滤液中参与嫩肉粉,反响10101515分钟。分钟。方案三、将滤液放在方案三、将滤液放在6060750C750C的恒温水浴箱中保温的恒温水浴箱中保温10101515分钟。分钟。为了纯化提取的为了纯化提取的DNADNA需求将滤液作进一步处置需求将滤液作进一步处置讨论:此步骤获得的
4、滤液中能够含讨论:此步骤获得的滤液中能够含有哪些细胞成分?有哪些细胞成分?详细做法详细做法: :方案一:方案一:30mL30mL滤液滤液35gNaCl35gNaCl同方向搅拌,同方向搅拌,DNADNA溶解溶解参与蒸馏水参与蒸馏水DNADNA析出析出过滤得到过滤物过滤得到过滤物放到放到2mol/LNaCl2mol/LNaCl溶液中溶解溶液中溶解DNA-NaClDNA-NaCl溶解液溶解液方案二:方案二:30mL30mL滤液嫩肉粉木瓜蛋白酶滤液嫩肉粉木瓜蛋白酶静静置置10101515分钟分钟DNADNA滤液滤液方案三:方案三:3030滤液滤液60607575处置处置过滤获得过滤获得DNADNA滤液
5、滤液1、以血液为实验资料时,每、以血液为实验资料时,每100ml血液中需求参与血液中需求参与3g柠檬酸钠,防止柠檬酸钠,防止血液凝固。血液凝固。2、参与洗涤剂后,动作要轻缓、柔、参与洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否那么容易产生大量的泡沫,和,否那么容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。参与酒精不利于后续步骤的操作。参与酒精和玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以和玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧免加剧DNA分子的断裂,导致分子的断裂,导致DNA分子不能构成絮状沉淀。分子不能构成絮状沉淀。3、二苯胺试剂要现配现用,否那么、二苯胺试剂要现配现用,否那么会影响鉴定的效果。会影响鉴定的效果。制备鸡血细胞液制备鸡血细胞液加柠檬酸钠,静置或离心加柠檬酸钠,静置或离心破碎细胞,释放破碎细胞,释放DNA 加蒸馏水,同一方向快速通方向搅拌加蒸馏水,同一方向快速通方向搅拌过滤,除去细胞壁、细胞膜等。过滤,除去细胞壁、细胞膜等。溶解核内溶解核内DNA 参与参与NaCl至至2mol/L,同一方向缓慢搅,同一方向缓慢搅拌拌DNA析出析出加蒸馏水至加蒸馏水至0.14mol/L,过滤,在溶解到,过滤,在溶解到2mol/L溶液中溶液中除去细胞质中的大部分物质。除去细胞质中的大部分物质。DNA初步纯化初步纯化与等体积
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