F5_生物标记检验试剂的制造及应用

1、F5_生物標記檢驗試劑的製造及應用1、專業領域課程課 程 名 稱生物標記檢驗試劑的製造及應用講授課程實驗課程開 課 教 師授課對象學分數授課時數（h）開授系所預估修課人數葉才明、黃溫雅、張權發、張憲彰博、碩士、大學生、醫檢師136成大醫技系15必修/選修無必修課程選修課程授課進度表日期講題時數授課老師(請註明任職單位及職稱)(以上表格不足請自行增列)7/127/137/147/157/1610:00Lecture 1-1(A-3) (B-1)(B-1)(C-2)(B-1)(C-5)(C-7)(B-4)(B-5)11:00Lecture 1-212:00Lunch timeLunch timeL

2、unch timeLunch timeLunch time13:00Lecture 2-1Lecture 3-1(C-3)(C-8)14:00Lecture 2-2Lecture 3-2(A-5)Lecture 4-115:00(A-1)(A-4)Lecture 4-2(D)16:00(A-2)(B-2)(C-4)(B-2)(B-2)(B-3)17:0018:00(C-1)(C-6)A. HybridomaA-1 immunized and bleedingA-2 sacrificed and fusionA-3 fusion observationA-4 brief introduction

3、 of following stepA-5 antibody purificationB. Phage display- peptideB-1 Panning and amplify phageB-2 Titration and phage precipitationB-3 ELISA coatingB-4 ELISA blockingB-5 ELISA detection and color developmentC. Phage display- scFvC-1 IntroductionC-2 total RNA extraction and reverse transcriptionC-

4、3 PCR of VH and VL and Overlap PCRC-4 DNA electrophoresis and gel extractionC-5 Restriction enzyme digest and ligationC-6 TransformationC-7 Plate countingC-8 Sequence analysis (BioEdit free software and VBASE2)D. Conclusion2、課程內容與特色在過去幾年台灣曾經面臨到各種不同的病毒感染及威脅，諸如: 登革病毒、腸病毒71型及SARS-CoV，很多人因此喪生，對於國家發展，經濟成

5、長及社會安定都有很大的影響。為了有效解決這些已知及將來可能發生未知病毒的感染，我們必須發展出更有效的治療或預防的方法。噬菌體表現系統(Phage display library)是一種利用噬菌體表面蛋白表現出各種不同胜肽或蛋白的技術。噬菌體表現系統可以用以篩選對任何分子具有親合力及專一性的噬菌體。噬菌體表現系統的應用將有助於研發出新的辨識分析各種傳染性生物的物質，其應用甚至可以遍及各種腫瘤或任何抗原甚至抗體。由於其便利性及低廉的價格，讓此系統不管是在基礎學術性的研究如蛋白質功能及結構的探討亦或是臨床診斷甚至於藥物開發上都提供了極有用的方法去尋找可能的結合物(ligands)。因此本課程目標為1.使學員瞭解噬菌體表現系統的原理及操作2.使學員瞭解噬菌體表現系統在臨床及基礎免疫學的應用3、課程授課大綱及內容本課程之大綱如下：在第一年我們將以phage-displayed random peptide library 應用於monoclonal antibody epitope selection 為主。我們將利用登革病毒的單株抗體來篩選噬菌體所表現之胜肽並用酵素免疫分析法（Enzyme-linked immunosorbent assay，簡稱ELISA）、免