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1、会计学1生物化学研究技术生物化学研究技术(jsh) SDSPAGE鉴定鉴定菠萝蛋白酶的纯菠萝蛋白酶的纯第一页,共23页。第1页/共23页第二页,共23页。第2页/共23页第三页,共23页。第3页/共23页第四页,共23页。第4页/共23页第五页,共23页。第5页/共23页第六页,共23页。第6页/共23页第七页,共23页。第7页/共23页第八页,共23页。Gel5%10%15%294566972002945669720029456697200第8页/共23页第九页,共23页。第9页/共23页第十页,共23页。第10页/共23页第十一页,共23页。第11页/共23页第十二页,共23页。第12页/

2、共23页第十三页,共23页。12%分离胶5%浓缩胶 30%凝胶贮液4000l810 l上层胶缓冲液pH6.81250 l下层胶缓冲液pH8.82500lTEMED(四甲基乙二胺)30 l20 l10%SDS100l50ldH2O3270l2820lAP(过硫酸氨)100l50 l第13页/共23页第十四页,共23页。第14页/共23页第十五页,共23页。孔1234567891011加样粗酶标准蛋白过柱1过柱2过柱3体积L304030353535 *微量注射器不可(bk)过低,以防刺破胶体;也不可(bk)过高, 样品下沉时易发生扩散,溢出加样孔第15页/共23页第十六页,共23页。剥胶时要小心剥胶时要小心, ,保持保持(boch)(boch)胶完好无损胶完好无损, ,染色要充分染色要充分第16页/共23页第十七页,共23页。(yngpn)迁移率在曲线上求出其蛋白质的分子量。第17页/共23页第十八页,共23页。蛋白名称 迁移距离 相对迁移率(Y) 蛋白分子量(D) 蛋白分子量对数(X) 兔磷酸化酶B 牛血清白蛋白 牛碳酸酐酶 牛蛋白酶抑制剂 鸡蛋清溶菌酶 过柱的菠萝蛋白酶 指示剂 -第18页/共23页第十九页,共23页。第19页/共23页第二十页,共23页。第20页/共23页第二十一页,共

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