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文档简介
1、生化鉴定生化鉴定检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质P18P18实验原理:实验原理:实验材料:实验材料:方法一方法一: :花生种子匀浆花生种子匀浆+3+3滴苏丹滴苏丹染液染液_方法二方法二: :取材取材: :花生种子花生种子( (浸泡浸泡, ,去掉种皮去掉种皮),),将子叶切成薄片将子叶切成薄片制片制片观察观察: :先在先在_下寻找已着色颗粒下寻找已着色颗粒, ,再用高倍显微镜观察再用高倍显微镜观察结论结论: :圆形小颗粒呈圆形小颗粒呈_,_,说明有脂肪存在说明有脂肪存在取最薄的切片,放在载玻片中央取最薄的切片,放在载玻片中央滴滴2 23 3滴滴_染液染液( (
2、染色染色3 min)3 min)去浮色去浮色(1(12 2滴体积分数为滴体积分数为50%50%的酒精溶液的酒精溶液) )制成临时装片制成临时装片( (滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片) )橘黄色橘黄色苏丹苏丹低倍显微镜低倍显微镜橘黄色橘黄色1.(20121.(2012广东卷广东卷) )分析下表,可推测分析下表,可推测 注:注:“+”“+”显色,显色,“+”“+”显色更深;显色更深;“-”“-”不显色不显色. .A.A.甲溶液含有淀粉甲溶液含有淀粉 B. B.乙溶液含有还原糖乙溶液含有还原糖C.C.混合溶液不含淀粉混合溶液不含淀粉 D. D.混合溶液含有淀粉酶混合溶液含有淀粉酶生
3、物组织中脂肪的鉴定生物组织中脂肪的鉴定分离结果分离结果滤纸上色带的排列顺序如何?宽窄如何?说明什么?滤纸上色带的排列顺序如何?宽窄如何?说明什么?2 2(2012(2012上海卷上海卷) )图图6 6表示叶绿体色素提取分离表示叶绿体色素提取分离实验中纸层析的结果,据图判断用作实验材料实验中纸层析的结果,据图判断用作实验材料的叶片颜色为的叶片颜色为A A红色红色 B B黄色黄色 C C绿色绿色 D D紫色紫色3 3(2013(2013江苏江苏) )关于叶绿体中色素的提取和分离实验的操关于叶绿体中色素的提取和分离实验的操作作, ,正确的是正确的是A A使用定性滤纸过滤研磨液使用定性滤纸过滤研磨液
4、B B将干燥处理过的定性滤纸条用于层析将干燥处理过的定性滤纸条用于层析C C在划出一条滤液细线后紧接着重复划线在划出一条滤液细线后紧接着重复划线2323次次 D D研磨叶片时研磨叶片时, ,用体积分数为用体积分数为70%70%的乙醇溶解色素的乙醇溶解色素注意问题(1)有关蛋白质的鉴定若用蛋清进行蛋白质鉴定时,需将鸡蛋清用水稀释,通常是0.5 mL蛋白液加入5 mL水,搅拌均匀。如果蛋白液稀释程度不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不容易刷洗干净。鉴定蛋白质时,向样液中加入2 mL双缩脲试剂A摇匀,再向样液中加入34滴双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂B不
5、能过量,因为过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,从而掩盖生成的紫色。(2)叶绿体中色素的提取和分离区分色素提取和分离的原理:色素提取的原理无水乙醇提取法;色素分离的原理纸层析法。注意事项:a.滤液细线要画得细且直,以防止色素带重叠而影响分离效果;待滤液干燥后要再画一两次,目的是积累更多的色素,使分离后的色素带明显。b.分离色素时,层析液不能没及滤液细线,以防止色素溶解于层析液中而无法分离。(1 1)科学性原则)科学性原则(2 2)平行重复原则)平行重复原则(6 6)单一变量原则)单一变量原则(4 4)随机性原则)随机性原则(5 5)简便性原则)简便性原则(3 3)可行性原则)可行性
6、原则(7 7)对照原则)对照原则分析下列实验对照的类型:分析下列实验对照的类型:解题的简要思路:本实验是验证胰岛素是否具有降低血糖含解题的简要思路:本实验是验证胰岛素是否具有降低血糖含量的作用,因而量的作用,因而有无胰岛素应该是实验中的唯一变量有无胰岛素应该是实验中的唯一变量,也就,也就是说,对照组中没有胰岛素,而实验组中应该有胰岛素,且是说,对照组中没有胰岛素,而实验组中应该有胰岛素,且注射胰岛素后血糖浓度应该与实验前发生变化。实验的操作注射胰岛素后血糖浓度应该与实验前发生变化。实验的操作步骤应该是:给对照组注射一定量的生理盐水,给实验组注步骤应该是:给对照组注射一定量的生理盐水,给实验组注
7、射等量的用生理盐水溶解的胰岛素溶液;一段时间后观察两射等量的用生理盐水溶解的胰岛素溶液;一段时间后观察两组小鼠的症状表现,可见对照组小鼠正常,而实验组小鼠出组小鼠的症状表现,可见对照组小鼠正常,而实验组小鼠出现血糖降低的症状,再给实验组小鼠注射一定浓度的葡萄糖现血糖降低的症状,再给实验组小鼠注射一定浓度的葡萄糖溶液,可见实验鼠的症状得以恢复。溶液,可见实验鼠的症状得以恢复。 答案答案:A A 研究发现,当土壤干旱时,根细胞会迅速合成某种化学物质研究发现,当土壤干旱时,根细胞会迅速合成某种化学物质X X。有人推。有人推测根部合成的测根部合成的X X运输到叶片,能调节气孔的开闭。他们做了如下实验:
8、从同运输到叶片,能调节气孔的开闭。他们做了如下实验:从同一植株上剪取大小和生理状态一致的一植株上剪取大小和生理状态一致的3 3片叶,分别将叶柄下部浸在不同浓度片叶,分别将叶柄下部浸在不同浓度X X的培养液中。一段时间后,测得的有关数据如下表所示。(注:气孔导度越的培养液中。一段时间后,测得的有关数据如下表所示。(注:气孔导度越大。气孔开启程度越大)大。气孔开启程度越大) 培养液中培养液中X X的浓度的浓度/molm/molm-3-35 51010-5-55 51010-4-45 51010-3-3叶片中叶片中X X的浓度的浓度/molg/molg-1-1(鲜重)(鲜重)2 247472 297
9、979 92828叶片中的气孔导度叶片中的气孔导度/molm/molm-2-2aa-1-10 054540 043430 02727以上方案有不完善的地方,请指出来并加以修正。以上方案有不完善的地方,请指出来并加以修正。 答案:答案:a a样本量太小。应样本量太小。应“取叶片若干,等分为三组取叶片若干,等分为三组”。b b缺乏空白对照。增加缺乏空白对照。增加1 1组,将叶片的叶柄下浸在不含组,将叶片的叶柄下浸在不含X X的培养液中。的培养液中。 某同学由温度能影响酶的活性联想到温度能否影响甲状腺激素的活性。为某同学由温度能影响酶的活性联想到温度能否影响甲状腺激素的活性。为了探索这一问题,他做了
10、一个实验。实验步骤如下:了探索这一问题,他做了一个实验。实验步骤如下: 取三只相同的洁净玻璃缸,编号为取三只相同的洁净玻璃缸,编号为l l、2 2、3 3,分别装上等量的蒸馏水、河,分别装上等量的蒸馏水、河水、自来水。水、自来水。 取发育状况不同的取发育状况不同的1515只蝌蚪,分成三等份,分别放人只蝌蚪,分成三等份,分别放人1 1、2 2、3 3号玻璃缸中,号玻璃缸中,三只玻璃缸放在相同的适宜外界条件下培养。三只玻璃缸放在相同的适宜外界条件下培养。 每天同时向每天同时向l l、2 2、3 3号玻璃缸中分别投入普通饲料、常温号玻璃缸中分别投入普通饲料、常温(25)(25)下的甲状下的甲状腺激素
11、制剂拌匀的饲料、用腺激素制剂拌匀的饲料、用6060温水处理温水处理1 1小时的甲状腺激素制剂拌匀的饲料。小时的甲状腺激素制剂拌匀的饲料。 每隔一段时间测量、记录,并比较蝌蚪的发育状况。每隔一段时间测量、记录,并比较蝌蚪的发育状况。(1)(1)在实验步骤的叙述中,存在一些不妥或不严密之处,请指出并加以改正;在实验步骤的叙述中,存在一些不妥或不严密之处,请指出并加以改正;(2)(2)预测实验现象及结论。预测实验现象及结论。参考答案参考答案:(1):(1)改正:蒸馏水、河水、自来水改为河水,改正:蒸馏水、河水、自来水改为河水,“发育状发育状况不同况不同”改为改为“相同相同”,“投入投入”后加后加“等
12、量的等量的”。(2)(2)预测实验现预测实验现象及结论:若象及结论:若2 2号玻璃缸内蝌蚪发育最快,而号玻璃缸内蝌蚪发育最快,而l l、3 3号玻璃缸内蝌蚪发号玻璃缸内蝌蚪发育状况相同,说明高温使用甲状腺激素制剂失活。若育状况相同,说明高温使用甲状腺激素制剂失活。若2 2号玻璃缸内蝌号玻璃缸内蝌蚪发育最快,蚪发育最快,3 3号玻璃缸内次之,号玻璃缸内次之,l l号玻璃缸最慢,说明高温使甲状腺号玻璃缸最慢,说明高温使甲状腺激素制剂的活性降低。若激素制剂的活性降低。若2 2、3 3号玻璃缸内蝌蚪发育状况相同,而号玻璃缸内蝌蚪发育状况相同,而1 1号号玻璃缸内较慢,说明高温未影响甲状腺激素制剂的活性
13、。玻璃缸内较慢,说明高温未影响甲状腺激素制剂的活性。( (或增加一项:或增加一项:若三个玻璃缸中的蝌蚪发育状况为:若三个玻璃缸中的蝌蚪发育状况为:l l号快于号快于2 2号,号,2 2号快于号快于3 3号,说明号,说明高温增强了甲状腺激素制剂的活性。高温增强了甲状腺激素制剂的活性。) ) 归纳:一些实验条件的控制方法(1)增加水中氧气 (2)减少水中氧气(3)除去容器中CO2(4)除去叶中原有淀粉(5)除去叶中叶绿素(6)除去光合作用对呼吸作用的干扰(7)得到单色光(8)获得单一的细胞器(9)动物细胞破裂(10)杀灭细菌(11)控制容器的温度 (1)增加水中氧气 (2)减少水中氧气 (3)除去
14、容器中CO2 (4)除去叶中原有淀粉 (5)除去叶中叶绿素 (6)除去光合作用对呼吸作用的干扰 泵入空气;吹气;放入绿色植物容器密封;油膜覆盖;用凉开水NaOH溶液置于黑暗环境中酒精水浴加热给植株遮光(7)得到单色光棱镜色散;彩色玻璃(薄膜)滤光(8)获得单一的细胞器(9)动物细胞破裂(10)杀灭细菌(11)控制容器的温度用保温瓶或绒棉来隔热,避免生物所产生的热会散失至四周。或用水浴加热、恒温箱保温。细胞匀浆超速离心蒸馏水渗透胀破;搅拌;离心煮沸;烘烤;酒精;高浓度NaCl;含青霉素培养基放射性元素标记法的应用一般常用的放射性元素有:15N、3H、2H、32P、 14C、18O、35S放射性元
15、素标记法的应用 一般常用的放射性元素有:15N、3H、2H、32P、 14C、18O、35S用放射性因素35S、 32P分别标记噬菌体,可验证 噬菌体侵染细菌的过程,DNA分子能保持连续 性,从而说明DNA是生物的遗传物质。用放射性元素15N标记研究DNA的复制过程,可 说明DNA具有半保留复制的特点用4H标记氨基酸,可以研究氨基酸在细胞内合成 分泌蛋白所经途径:氨基酸核糖体内质网高 尔基体经细胞膜分泌到细胞外(10年天津高考题) 在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”实验中,以下操作和结论正确的是A. 剪取5cm根尖, 用酒精和吡罗红混合液解离染色B. 右图是高倍显微镜下调节细准焦螺旋看到的视
16、野C. 持续观察, 视野中的K细胞将分裂成两个子细胞D. 视野中, N细胞的染色体数目是M细胞的一半(10年天津高考题) 3. 在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”实验中,以下操作和结论正确的是A. 剪取5cm根尖, 用酒精和吡罗红混合液解离染色B. 右图是高倍显微镜下调节细准焦螺旋看到的视野C. 持续观察, 视野中的K细胞将分裂成两个子细胞D. 视野中, N细胞的染色体数目是M细胞的一半(2010年四川卷)2、下列对实验的相关叙述,正确的是A. 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的专一性作用时, 可用碘液替代斐林试剂进行鉴定B. 纸层析法分离叶绿体色素的实验结果表明, 叶绿素b在层析液中溶解度最低C.
17、调查人群中某种遗传病的发病率时,应选择 有遗传病史的家系进行调查统计D. 鉴定蛋白质时,应将双缩脲试剂A液和B液混 合以后再加入待检组织样液中(2010年四川卷)2、下列对实验的相关叙述,正确的是A. 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的专一性作用时, 可用碘液替代斐林试剂进行鉴定B. 纸层析法分离叶绿体色素的实验结果表明, 叶绿素b在层析液中溶解度最低C. 调查人群中某种遗传病的发病率时,应选择 有遗传病史的家系进行调查统计D. 鉴定蛋白质时,应将双缩脲试剂A液和B液混 合以后再加入待检组织样液中(2010年四川卷)2、下列对实验的相关叙述,正确的是A. 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的专一性作用时, 可用碘液替代斐林试剂进行鉴定B. 纸层析法分离叶绿体色素的实验结果表明, 叶绿素b在层析液中溶解度最低C. 调查人群中某种遗传病的发病率时,应选择 有遗传病史的家系进行调查统计D. 鉴定蛋白质时,应将双缩脲试剂A液和B液混 合以后再加入待检组织样液中灵活分析原理(2010年福建卷) 3. 下列关于低温诱导染色体加倍实
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