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文档简介

1、长期食用乙烯利含量超标的番茄长期食用乙烯利含量超标的番茄对大鼠生殖系统造成的影响对大鼠生殖系统造成的影响组员:徐婧、郑组员:徐婧、郑茗予、郭远方茗予、郭远方演讲人:郭远方演讲人:郭远方组号:组号:592592一、研究背景一、研究背景乙烯利(乙烯利(ETHETH)作为应)作为应用最为广泛的植物生用最为广泛的植物生长调节剂之一,主要长调节剂之一,主要用于提高植物产量和用于提高植物产量和采摘后果实的采摘后果实的催熟催熟。近年来,过量使用和近年来,过量使用和滥用乙烯利的现象越滥用乙烯利的现象越来越严重,导致乙烯来越严重,导致乙烯利中毒事件的发生也利中毒事件的发生也逐渐增多。逐渐增多。临床医学研究表明,

2、一定浓度的乙烯利可引起局部及临床医学研究表明,一定浓度的乙烯利可引起局部及头脑肾损害,导致中枢麻痹,服用大量乙烯利的患者头脑肾损害,导致中枢麻痹,服用大量乙烯利的患者除恶心、呕吐、腹痛、消化道腐蚀外,还会产生神志除恶心、呕吐、腹痛、消化道腐蚀外,还会产生神志模糊、意识障碍、血压降低、消化道出血等症状,严模糊、意识障碍、血压降低、消化道出血等症状,严重时意识丧失、脑水肿,甚至死亡。重时意识丧失、脑水肿,甚至死亡。有专家怀疑有专家怀疑 其其广泛应用与儿广泛应用与儿童青春期发育童青春期发育提前有关提前有关,但,但目前这只限于目前这只限于一种猜测。一种猜测。番茄是反季节蔬番茄是反季节蔬菜的主要品种之菜

3、的主要品种之一,并且广泛存一,并且广泛存在过量使用乙烯在过量使用乙烯利的情况,此外利的情况,此外番茄果肉为酸性,番茄果肉为酸性,乙烯利在酸性条乙烯利在酸性条件下比较稳定,件下比较稳定,因此我们选择番因此我们选择番茄为喂食对象茄为喂食对象。现在检测乙烯利在果蔬中残留量的方法现在检测乙烯利在果蔬中残留量的方法有衍生化、顶空法、薄层色谱法、离子有衍生化、顶空法、薄层色谱法、离子色谱法等。色谱法等。本实验方案采用静态顶空气相色谱法本实验方案采用静态顶空气相色谱法作为检测分析的主要方法,来检测番作为检测分析的主要方法,来检测番茄中乙烯利的残留量。茄中乙烯利的残留量。该方法能简便快速并具有分离效能好和灵该

4、方法能简便快速并具有分离效能好和灵敏度高及无需衍生前处理等优点。敏度高及无需衍生前处理等优点。二、实验步骤二、实验步骤1.1.不同不同ETHETH浓度食物的处理浓度食物的处理2.2.实验动物的处理实验动物的处理3.3.检测指标和方法检测指标和方法(1 1)标准曲线的绘制)标准曲线的绘制(2 2)不同剂量组初始处理浓度的确定)不同剂量组初始处理浓度的确定(3 3)不同剂量组番茄的处理)不同剂量组番茄的处理2020个转色期的青熟番茄个转色期的青熟番茄随机均匀分成随机均匀分成4 4组组4000mg/kg4000mg/kg乙乙烯利溶液烯利溶液6000mg/kg6000mg/kg乙乙烯利溶液烯利溶液80

5、00mg/kg8000mg/kg乙烯利溶液乙烯利溶液浸泡浸泡1 1分钟后取出放在分钟后取出放在20-2520-25。C C,相对湿度,相对湿度45%-55%45%-55%环境下静置环境下静置7272小时小时取出按取出按1:11:1比例混合淀粉磨成匀浆,采用静态顶空比例混合淀粉磨成匀浆,采用静态顶空气相色谱法检测其各自浓度组的气相色谱法检测其各自浓度组的ETHETH残留量残留量建立乙烯利残留量随初始处理浓建立乙烯利残留量随初始处理浓度变化的标准曲线度变化的标准曲线(1)绘制标准曲线)绘制标准曲线(2 2)不同剂量组浓度的确定)不同剂量组浓度的确定用半数用半数致死剂致死剂量量(LD(LD5050)

6、 )法进行法进行剂量选剂量选择择(LD(LD5050=3=3400mg/k400mg/kg,g,大鼠大鼠经口)经口)分别选择分别选择1/10LD50浓度浓度1/50L1/50LD D5050浓浓度度1/1001/100LDLD5050浓浓度度MRL(MRL(允许最允许最大残留剂量,大残留剂量,采用国内标采用国内标准准2mg/kg)2mg/kg)浓度浓度0浓度浓度对照对照每天将足量转色期的青熟番茄每天将足量转色期的青熟番茄随机均匀分成随机均匀分成5 5组组1/50LD1/50LD5050残留残留浓度对应初始浓度对应初始ETHETH浓度溶液浓度溶液MRLMRL残留浓度残留浓度对应初始对应初始ETH

7、ETH浓度溶液浓度溶液浸泡浸泡1 1分钟后取出放在分钟后取出放在20-2520-25。C C,相对湿度,相对湿度45%-55%45%-55%环境下静置环境下静置7272小时小时取出按取出按1:11:1比例混合淀粉磨成匀浆比例混合淀粉磨成匀浆随机抽取一组随机抽取一组采用静态顶空采用静态顶空气相色谱法检测其气相色谱法检测其ETHETH残留量,残留量,以验证喂食前乙烯利残留浓度以验证喂食前乙烯利残留浓度的正确性。的正确性。1/100LD1/100LD5050残留残留浓度对应初始浓度对应初始ETHETH浓度溶液浓度溶液分别以各自浓度分别以各自浓度ETHETH处理的食处理的食物灌胃喂食,每天两次,按物灌

8、胃喂食,每天两次,按体重体重11%11%剂量灌胃喂食剂量灌胃喂食(3 3)不同剂量组)不同剂量组番茄的处理番茄的处理2.2.实验动物处理实验动物处理 5 5周龄周龄WistarWistar大鼠雌雄各大鼠雌雄各5050只,各随机分成对只,各随机分成对照组、照组、1/10LD1/10LD 50 50浓度组、浓度组、1/50LD1/50LD 50 50浓度组、浓度组、1/100LD1/100LD 50 50浓度组、浓度组、MRLMRL浓度组,每组雌雄各浓度组,每组雌雄各1010只。只。分别以各自浓分别以各自浓度度ETHETH处理的处理的食物灌胃喂食,食物灌胃喂食,每天两次,按每天两次,按体重体重11

9、%11%剂量剂量灌胃喂食,连灌胃喂食,连续处理续处理9090天。天。整个实验期间整个实验期间大鼠(除喂食大鼠(除喂食前后前后1h1h)自由)自由饮水,室温控饮水,室温控制在制在22-2522-25。C C,相对湿度为相对湿度为45-55%45-55%,通风,通风良好。良好。检测指标和方法检测指标和方法每天记录每天记录各组各组喂食前体重,比较各浓度组大鼠喂食前体重,比较各浓度组大鼠 体重之间及与对照组体重之间有无显著性差异体重之间及与对照组体重之间有无显著性差异记录比记录比较各组较各组记录比记录比较各组较各组雌性大鼠阴道开口时间和动情周期的变化雌性大鼠阴道开口时间和动情周期的变化雄性大鼠精子数、

10、精子运动率、精子畸雄性大鼠精子数、精子运动率、精子畸形率的变化形率的变化雌性大鼠子宫过氧化物酶活性的变化雌性大鼠子宫过氧化物酶活性的变化雄性大鼠血清中激素雄性大鼠血清中激素T T、E E水平的变化水平的变化雌性大鼠子宫重量、子宫雌性大鼠子宫重量、子宫/ /体重、体重、卵巢卵巢/ /体重的变化;肝脏、卵巢、体重的变化;肝脏、卵巢、子宫进行组织切片观察子宫进行组织切片观察雄性大鼠睾丸重量、睾丸雄性大鼠睾丸重量、睾丸/ /体重、体重、前列腺前列腺/ /体重的变化;肝脏、前体重的变化;肝脏、前列腺、精囊腺进行组织切片观察列腺、精囊腺进行组织切片观察每隔每隔1515天在各天在各组大鼠中随机组大鼠中随机抽

11、取一只剖检抽取一只剖检(第(第9090天全部天全部剖检),记录剖检),记录比较各组比较各组3.3.统计和分析统计和分析 预期结果预期结果大剂量的乙烯利大剂量的乙烯利腐蚀消化道,并腐蚀消化道,并伴有恶心呕吐等伴有恶心呕吐等症状症状预预 测测随时间的增加,随时间的增加,同组雌雄大鼠同组雌雄大鼠的体重呈下降的体重呈下降趋势,并随乙趋势,并随乙烯利残留量增烯利残留量增加各组体重呈加各组体重呈下降趋势增加。下降趋势增加。预预 测测可能具有弱的雌激素样作可能具有弱的雌激素样作用,导致未成年雌性大鼠用,导致未成年雌性大鼠性发育提前,影响未成年性发育提前,影响未成年雄性大鼠生殖器官的发育雄性大鼠生殖器官的发育

12、可能具有类似有可能具有类似有机磷农药的神经机磷农药的神经毒性,但毒性表毒性,但毒性表现较弱现较弱随时间的增加,随时间的增加,同组雌雄大鼠生同组雌雄大鼠生殖器官组织各种殖器官组织各种病理学损伤情况病理学损伤情况越来越明显,并越来越明显,并随乙烯利残留量随乙烯利残留量的增加而加重的增加而加重同组雌性大鼠子宫过氧化物酶活性、子同组雌性大鼠子宫过氧化物酶活性、子宫重、子宫宫重、子宫/ /体重、卵巢体重、卵巢/ /体重呈上升趋体重呈上升趋势;同组雄性大鼠精子数、精子运动率、势;同组雄性大鼠精子数、精子运动率、血清中激素血清中激素T T、E E水平、睾丸重、睾丸水平、睾丸重、睾丸/ /体重、前列腺体重、前

13、列腺/ /体重呈下降趋势,体重呈下降趋势,精子精子畸形率呈上升趋势畸形率呈上升趋势 。并随乙烯利残留。并随乙烯利残留量增加,同期雌性大鼠的阴道开口时间量增加,同期雌性大鼠的阴道开口时间和动情周期提前,各组其他差异呈加重和动情周期提前,各组其他差异呈加重趋势。趋势。预预测测随时间的增加随时间的增加参考文献参考文献11杨治峰杨治峰, ,薄存香薄存香, ,谢玉林谢玉林. .乙烯利急性毒性的实验研究乙烯利急性毒性的实验研究J.J.中国工业医学杂中国工业医学杂志志,2013,26(1):41-42.,2013,26(1):41-42.22张先慧张先慧. .乙烯利对大鼠生殖和行为发育的影响及机制探讨乙烯利

14、对大鼠生殖和行为发育的影响及机制探讨D.D.山东山东: :山东山东大学大学,2006.,2006.33张先慧张先慧, ,李军李军, ,刘岚铮刘岚铮. .乙烯利对青春期雌性大鼠生殖发育的影响乙烯利对青春期雌性大鼠生殖发育的影响J.J.预防预防医学论坛医学论坛,2008,14(12):1147-1149.,2008,14(12):1147-1149.44赵尔成赵尔成, ,王祥云王祥云, ,江树人江树人. .常用植物生长调节剂残留分析研究进展常用植物生长调节剂残留分析研究进展J.J.安徽安徽农业科学农业科学,2005,33(9):1709-1711.,2005,33(9):1709-1711.55周

15、立国周立国. .药物毒理学药物毒理学M M 北京北京: :中国医药科技出版社中国医药科技出版社,2008.,2008.66郭潇郭潇. .果蔬中乙烯利残留量的分析及应用研究果蔬中乙烯利残留量的分析及应用研究D.D.河北河北: :河北农业大学河北农业大学,2008.,2008.77李晓娜李晓娜, ,刘龙腾刘龙腾, ,陈钟等陈钟等. .气相色谱法测定番茄中乙烯利的残留量气相色谱法测定番茄中乙烯利的残留量J.J.农药农药科学与管理科学与管理,2013,34(6):32-35.,2013,34(6):32-35.88君桂豪君桂豪, ,党玉丽党玉丽, ,刘茵刘茵. .番茄中乙烯利残留量测定的新方法番茄中乙烯利残留量测定的新方法N.N.河南农业大河南农业大学学报学学报,2006,40(6):611-613.,2006,

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