维生素AD胶丸中维生素A的含量测定

1、实验一实验一 维生素维生素AD滴剂中滴剂中维生素维生素A的含量测定的含量测定药物分离分析实验药物分离分析实验 维生素维生素A的结构为具有一个共轭多烯醇侧链的结构为具有一个共轭多烯醇侧链的环己烷，由于其中有多个不饱和键，性质不稳的环己烷，由于其中有多个不饱和键，性质不稳定，易被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂定，易被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂解，并且其对酸不稳定。其醋酸酯比维生素解，并且其对酸不稳定。其醋酸酯比维生素A稳稳定，临床使用一般将本品或棕榈酸酯溶于植物油定，临床使用一般将本品或棕榈酸酯溶于植物油中应用。因此，维生素中应用。因此，维生素A及其制剂除需密封在凉及其制剂除需密封在凉

2、暗处保存外，还需充氮或加入合适的抗氧剂。暗处保存外，还需充氮或加入合适的抗氧剂。 维生素维生素A与氯仿、乙醚、环己烷或石油醚能与氯仿、乙醚、环己烷或石油醚能任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。 药物分离分析实验药物分离分析实验一、实验目的一、实验目的二、主要仪器和试剂二、主要仪器和试剂 紫外分光光度仪，紫外分光光度仪，25ml棕色容量瓶，烧杯棕色容量瓶，烧杯若干个，维生素若干个，维生素AD滴剂（规格滴剂（规格2.0万单位万单位/粒）粒）环己烷，乙醚环己烷，乙醚 掌握掌握UV三点校正法的原理和维生素三点校正法的原理和维生素A含量含量测定的方法。测定的方法。 药

3、物分离分析实验药物分离分析实验三、实验原理三、实验原理 本法是在三个波长处测得吸收度，根据校正公式本法是在三个波长处测得吸收度，根据校正公式计算吸收度计算吸收度A校正值后，再计算含量，故本法称为校正值后，再计算含量，故本法称为“三点校正法三点校正法”。该原理主要基于：。该原理主要基于：（1）杂质的无关吸收在杂质的无关吸收在310nm340nm的波长范围内的波长范围内 几乎呈一条直线，且随波长的增长吸收度下降。几乎呈一条直线，且随波长的增长吸收度下降。（2）物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸）物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸 收曲线上，各波长处的吸收度是维生素收曲线上，各波

4、长处的吸收度是维生素A与杂质吸收与杂质吸收度的代数和，因而吸收曲线也是二者的叠加。度的代数和，因而吸收曲线也是二者的叠加。 药物分离分析实验药物分离分析实验（一）胶丸内容物平均重量的测定（一）胶丸内容物平均重量的测定四、实验过程四、实验过程 取胶丸取胶丸20粒，精密称定，用注射器将内容物抽出，粒，精密称定，用注射器将内容物抽出，再用刀片切开丸壳，用乙醚逐个洗涤丸壳三次，置再用刀片切开丸壳，用乙醚逐个洗涤丸壳三次，置50 ml烧杯中，再用乙醚浸洗烧杯中，再用乙醚浸洗12次，置通风处，使乙醚次，置通风处，使乙醚挥散，精密称定，算出每丸内容物的平均重量。挥散，精密称定，算出每丸内容物的平均重量。 药

5、物分离分析实验药物分离分析实验四、实验过程四、实验过程（二）供试品溶液的制备与测定（二）供试品溶液的制备与测定 取维生素取维生素AD胶丸内容物适量，精密称定，用环胶丸内容物适量，精密称定，用环己烷溶解并定量稀释成每己烷溶解并定量稀释成每1 mL中含中含915单位的溶液。单位的溶液。按照分光光度法，测定其吸收峰的波长，并在下列各按照分光光度法，测定其吸收峰的波长，并在下列各波长处测定吸收度。计算各吸收度与波长波长处测定吸收度。计算各吸收度与波长328 nm处吸处吸收度的比值和波长收度的比值和波长328 nm处的处的E1%1cm值。值。 药物分离分析实验药物分离分析实验维生素维生素A吸收度差值吸收

6、度差值 药物分离分析实验药物分离分析实验 计算计算 求求 ：由：由 A= CL， 求得求得 =A/（CL）。）。 求效价（求效价（IU/g）：效价系指每克供试品中所含）：效价系指每克供试品中所含维生素维生素A的国际单位数（的国际单位数（IU/g）。）。 即即IU/g= 1900。 求维生素求维生素A占标示量的百分含量：占标示量的百分含量： 标示量标示量%=（AD1900W100%）/ （W100L标示量）标示量）100%。 药物分离分析实验药物分离分析实验AA值的选择值的选择 l首先计算吸收度比值（即首先计算吸收度比值（即A Ai i/A/A328328）l如果最大吸收波长在如果最大吸收波长在

7、326nm326nm329nm329nm之间，并之间，并分别计算分别计算5 5个波长下的差值，均不得超过个波长下的差值，均不得超过0.020.02时，则不用校正公式计算吸收度，而直接用时，则不用校正公式计算吸收度，而直接用328nm328nm处测得的吸收度处测得的吸收度A A328328求得。求得。 药物分离分析实验药物分离分析实验AA值的选择值的选择 l如果最大吸收波长在如果最大吸收波长在326nm326nm329nm329nm之间，并分别计算之间，并分别计算5 5个波长下的差值，如有一个或几个超过个波长下的差值，如有一个或几个超过0.020.02，这时，这时应按以下方法判断：应按以下方法判

8、断： 药物分离分析实验药物分离分析实验u若若A328（校正）（校正）与与A328的吸收度相差不超过的吸收度相差不超过3.0%，则不用校，则不用校正吸收度，仍以未经校正的正吸收度，仍以未经校正的A328求得求得 。u 若若A328（校正）（校正）与与A328的吸收度相差在的吸收度相差在 -15%-3%之间，则之间，则以以A328（校正）（校正）得得 。u若若A328（校正）（校正）与与A328的吸收度相差小于的吸收度相差小于-15%或大于或大于+3%，则，则不能用本法测定，而应用第二法（皂化法）测定含量。不能用本法测定，而应用第二法（皂化法）测定含量。第一法校正公式：第一法校正公式：A328(校

9、正校正)=3.52(2A328-A316-A340)l由扫描结果得最大吸收波长为由扫描结果得最大吸收波长为327.7nm（326329nm）l各个差值均不超过各个差值均不超过0.02，不需用校正公式。故直接用，不需用校正公式。故直接用A328进行计算。进行计算。l （328）= A328 /（100ms/D）l =0.746/(1000.0048/100)=155.42l效价效价= 1900=155.421900=295298l标示量标示量%=(AD1900W)/(W100L标示量标示量) 100%=(0.74610019000.08714)/(0.0048l 100125000) 100%=

10、102.9% 药物分离分析实验药物分离分析实验讨讨 论：论：l1、维生素、维生素A具有紫外吸收特征，在具有紫外吸收特征，在325nm328nm的范围内有最大吸收；并且，的范围内有最大吸收；并且，它能与三氯化锑试剂作用，产生不稳定的蓝色。它能与三氯化锑试剂作用，产生不稳定的蓝色。故可利用这些性质对其进行鉴别和含量测定。故可利用这些性质对其进行鉴别和含量测定。l2、维生素、维生素A醋酸酯的吸收度校正公式是用直线醋酸酯的吸收度校正公式是用直线方程式法（即代数法）推导而来；维生素方程式法（即代数法）推导而来；维生素A醇的醇的吸收度校正公式是用相似三角形法（几何法或吸收度校正公式是用相似三角形法（几何法

11、或称称6/7定位法）推导而来。定位法）推导而来。 药物分离分析实验药物分离分析实验l3、在应用三点校正法时，除其中一点在最大吸、在应用三点校正法时，除其中一点在最大吸收波长处测定外，其余两点均在最大吸收峰的收波长处测定外，其余两点均在最大吸收峰的两侧进行测定。如果仪器波长精度不准确时，两侧进行测定。如果仪器波长精度不准确时，会产生较大误差。因此，在测定前务必要校正会产生较大误差。因此，在测定前务必要校正波长，并可用全反式维生素波长，并可用全反式维生素A进行测定，比较测进行测定，比较测定结果和比值是否与对照品相符合，以进一步定结果和比值是否与对照品相符合，以进一步核对仪器波长是否准确。测定的样品

12、应不得少核对仪器波长是否准确。测定的样品应不得少于两份。于两份。 药物分离分析实验药物分离分析实验l4、实验可能失败的原因是：、实验可能失败的原因是：紫外分光光度紫外分光光度计出现了问题，波长不准确，从而导致在相应计出现了问题，波长不准确，从而导致在相应波长下测得的吸收度不准确。可见仪器波长的波长下测得的吸收度不准确。可见仪器波长的准确与否在实验中是致关重要的。准确与否在实验中是致关重要的。整个操作整个操作过程没有进行暗室操作，在光照下暴露了较长过程没有进行暗室操作，在光照下暴露了较长时间，而维生素时间，而维生素A不稳定，见光易变质，所以不稳定，见光易变质，所以导致测定含量不准。导致测定含量不准。 药物分离分析实验药物分离分析实验l另外，在操作中应注意：另外，在操作中应注意： 在含量测定时胶壳要尽量洗干净，避免内容物在含量测定时胶壳要尽量洗干净，避免内容物残留，使粒重尽量准确。残留，使粒重尽量准确。 由于所取的样品量非常小，所以用于收集样品由于所取的样品量非常小，所以用于收集样品的小烧杯一定要用溶剂洗涤多次并合并入容量瓶的小烧杯一定要用溶剂洗涤多次并合并入容量瓶中，容量瓶口也要冲洗使样品全部转入。中，容量瓶口也要冲洗使样品全部转入。 在测定不同波长下的吸收度时每一次都要用空在测定不同波长下的吸收度时每一次都要用空白液进行调零。白液进行调零。 药物分离分析实验药