现代酶工程蛋白质定向进化技术的发展和应用学习教案

1、现代酶工程蛋白质定向进化技术现代酶工程蛋白质定向进化技术(jsh)的的发展和应用发展和应用第一页，共43页。第1页/共43页第二页，共43页。第2页/共43页第三页，共43页。第3页/共43页第四页，共43页。第4页/共43页第五页，共43页。第5页/共43页第六页，共43页。第6页/共43页第七页，共43页。第7页/共43页第八页，共43页。第8页/共43页第九页，共43页。第9页/共43页第十页，共43页。第10页/共43页第十一页，共43页。第11页/共43页第十二页，共43页。第12页/共43页第十三页，共43页。第13页/共43页第十四页，共43页。第14页/共43页第十五页，共43

2、页。第15页/共43页第十六页，共43页。第16页/共43页第十七页，共43页。第17页/共43页第十八页，共43页。第18页/共43页第十九页，共43页。第19页/共43页第二十页，共43页。第20页/共43页第二十一页，共43页。第21页/共43页第二十二页，共43页。文库(Libraries)定向的(Directed)随机的(Random)重组的(Recombination)DNA重排(改组)(DNA shuffling)易错PCR(Error-prone PCR)理性的(Rational)简并的(Saturation)定点突变(Site-specificmutagenesis)第22页

3、/共43页第二十三页，共43页。第23页/共43页第二十四页，共43页。第24页/共43页第二十五页，共43页。第25页/共43页第二十六页，共43页。第26页/共43页第二十七页，共43页。第27页/共43页第二十八页，共43页。第28页/共43页第二十九页，共43页。第29页/共43页第三十页，共43页。酶蛋白质一级结构中相应位置的氨基酸残基二硫键数目相对活性（%）Tm（C）39215497142164野生IleIleThrCysCysThrLeu010041.9假野生IleIleThrThrAlaThrLeu010041.9ACysIleThrThrCysThrLeu19646.7BIl

4、eCysThrThrAlaThrCys110648.3CIleIleCysThrAlaCysLeu1052.9DCysCysThrThrCysThrCys29557.6EIleCysCysThrAlaCysCys2058.9FCysCysCysThrCysCysCys3065.5注：Tm为蛋白质的总体结构(jigu)50%发生变性的温度，用以表征蛋白质的热稳定性。第30页/共43页第三十一页，共43页。第31页/共43页第三十二页，共43页。第32页/共43页第三十三页，共43页。第33页/共43页第三十四页，共43页。第34页/共43页第三十五页，共43页。第35页/共43页第三十六页，共43页。第36页/共43页第三十七页，共43页。第37页/共43页第三十八页，共43页。组频率；如果在片段重组前后采用错误倾向PCR还可引入额外点突变。第38页/共43页第三十九页，共43页。第39页/共43页第四十页，共43页。第40页/共43页第四十一页，共43页。Mox