实验九 酶的特性ppt课件

1、实验九：酶的特性实验九：酶的特性实验目的：加深对酶的性质的认识。实验内容：温度对酶活力的影响pH对酶活力的影响酶的激活及抑制剂酶的专一性温度对酶活力的影响温度对酶活力的影响一、原理：一、原理： 酶的催化作用受温度的影响，在最适温酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为最适温度为3740，植物酶的最适温度为，植物酶的最适温度为5060 。 酶对温度的稳定性与其存在形式有关。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。由些酶的干燥制剂，虽加热到由些酶的干燥制剂，虽加热到100，其活，其活性并无明显改变，但在性并无明显改变，但在1

2、00的溶液中却很的溶液中却很快地完全失去活性。快地完全失去活性。 低温能降低或抑制酶的活性，但不能使低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。酶失活。二、器材：二、器材：试管及试管架试管及试管架恒温水浴恒温水浴冰浴冰浴沸水浴沸水浴三、试剂和材料：三、试剂和材料：含含0.2淀粉的淀粉的0.3NaCl溶液溶液150ml，需新鲜，需新鲜配制配制 稀释稀释200倍的唾液倍的唾液50ml：用蒸馏水漱口，以清：用蒸馏水漱口，以清除事物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使除事物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释其流入量筒并稀释200倍，混匀备用。倍，混匀备用。KI碘溶液碘溶液50ml：将：将KI2

3、0g及碘及碘10g溶于溶于100ml水中。使用前稀释水中。使用前稀释10倍。倍。四、操作方法：四、操作方法： 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。合物遇碘呈现的颜色来判断。取三支试管，编号后按下表加入试剂：取三支试管，编号后按下表加入试剂：管号管号1

4、23淀粉溶液（淀粉溶液（ml）1.51.51.5稀释唾液（稀释唾液（ml）11煮沸过的稀释煮沸过的稀释唾液（唾液（ml）1 摇匀后，将摇匀后，将1号、号、3号两试管放入号两试管放入37 恒恒温水浴中，温水浴中，2号试管放入冰中，号试管放入冰中，10min后去后去处，（将处，（将2号管内液体分为两半用号管内液体分为两半用KI碘碘溶液来检验溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果，将水解的程度。记录并解释结果，将2号管剩号管剩下的一半溶液放入下的一半溶液放入37水浴中继续保温水浴中继续保温10min后，再用碘液实验，结果如何？后，再用碘液实验，结果如何

5、？pH对酶活性的影响对酶活性的影响一、原理一、原理 酶的活力受环境酶的活力受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适的影响极为显著。不同酶的最适pH值不值不同。本实验观察同。本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pH约为约为6.8。二、器材二、器材试管及试管架试管及试管架吸管吸管滴管滴管50ml锥形瓶锥形瓶恒温水浴恒温水浴三、试剂和材料三、试剂和材料新配制的溶于新配制的溶于0.3NaCl的的0.5淀粉溶液淀粉溶液 250ml稀释稀释200倍的新鲜唾液倍的新鲜唾液 100ml0.2mol/L磷酸氢二钠溶液磷酸氢二钠溶液 600ml0.1mol/

6、L柠檬酸溶液柠檬酸溶液 400mlKI碘溶液碘溶液 50mlpH试纸：试纸： pH=5、 pH=5.8、 pH=6.8、 pH=8四种四种四、操作方法：四、操作方法： 取四个标有号码的取四个标有号码的50ml锥形瓶。用吸管按下表锥形瓶。用吸管按下表添加添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和磷酸氢二钠溶液和0.1柠檬酸溶液以制柠檬酸溶液以制备备pH5.08.0的四种缓冲液。的四种缓冲液。 从四个锥形瓶中各取缓冲液从四个锥形瓶中各取缓冲液3ml，分别注入，分别注入4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5淀粉溶液淀粉溶液2ml和稀释和稀释200倍的唾液倍

7、的唾液2ml。向各试管中加。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为入稀释唾液的时间间隔各为1min。将各试管内容物。将各试管内容物混匀，并依次置于混匀，并依次置于37 恒温水浴中保温。恒温水浴中保温。 第四管加入唾液第四管加入唾液2min后，每隔后，每隔1min由第由第3管取出管取出一滴混和液，置于白瓷板上，加一滴混和液，置于白瓷板上，加1小滴小滴KI碘溶液，碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时，向检验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时，向所有试管依次添加所有试管依次添加12滴滴KI碘溶液。添加碘溶液。添加KI碘碘溶液的时间间隔从第一管起，亦均为溶液的时间间隔从第一管起，亦均为1m

8、in。 观察各试管内容物呈现的颜色，分析观察各试管内容物呈现的颜色，分析pH对唾对唾液淀粉酶活性的影响。液淀粉酶活性的影响。锥形瓶锥形瓶号码号码0.2mol/L磷酸氢二磷酸氢二钠（钠（ml）0.1 mol/L柠柠檬酸（檬酸（ml）pH15.154.855.026.053.955.837.722.286.849.720.288.0唾液淀粉酶的活化和抑制唾液淀粉酶的活化和抑制一、原理一、原理 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。二、器材：二、器材：恒温水浴恒温水浴试管及试管架试管

9、及试管架三、试剂和材料：三、试剂和材料：0.1的淀粉溶液的淀粉溶液 150ml稀释稀释200倍的新鲜唾液倍的新鲜唾液 150ml1NaCl溶液溶液 50ml1硫酸铜溶液硫酸铜溶液 50ml1硫酸钠溶液硫酸钠溶液 50mlKI碘溶液碘溶液 100ml 四、操作方法：四、操作方法：管号管号12340.1的淀粉溶液（的淀粉溶液（ml）1.51.51.51.5稀释唾液（稀释唾液（ml）0.50.50.50.51硫酸铜溶液（硫酸铜溶液（ml）0.51NaCl溶液（溶液（ml）0.51硫酸钠溶液（硫酸钠溶液（ml）0.5蒸馏水（蒸馏水（ml）0.537 恒温水浴、保温恒温水浴、保温10minKI碘溶液（滴

10、）碘溶液（滴）23232323现象现象注：保温时间可根据各人唾液淀粉酶活力调整解释说明，说明本实验第3管的意义酶的专一性酶的专一性一、原理一、原理 酶具有高度的专一性。本实验以唾液酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶的作用为例，来说明酶的淀粉酶和蔗糖酶的作用为例，来说明酶的专一性。专一性。 淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成由还原性的麦芽糖，但不能催解淀粉生成由还原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉生还原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉的水解。用的水解。

11、用Benedict试剂检查糖的还原性。试剂检查糖的还原性。二、器材：二、器材：恒温水浴恒温水浴沸水浴沸水浴试管及试管架试管及试管架三、试剂和材料：三、试剂和材料：2蔗糖溶液蔗糖溶液 150ml溶于溶于0.3NaCl的的1淀粉溶液需新鲜配制）淀粉溶液需新鲜配制） 150ml稀释稀释200倍的新鲜唾液倍的新鲜唾液 100ml蔗糖酶溶液蔗糖酶溶液 100ml 将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤23次离次离心），然后放在滤纸上自然干燥。取干酵母心），然后放在滤纸上自然干燥。取干酵母100g，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细沙，用力研磨，提取约沙，用力

12、研磨，提取约1h，再加蒸馏水使总体，再加蒸馏水使总体积约为原体积的积约为原体积的10倍。离心，将上清液保存于倍。离心，将上清液保存于冰箱中备用。冰箱中备用。Benedict氏试剂氏试剂 200ml 无水硫酸铜无水硫酸铜1.74g溶于溶于100ml热水中，冷却热水中，冷却后稀释至后稀释至150ml。取柠檬酸钠。取柠檬酸钠173g，无水碳酸钠，无水碳酸钠100g和和600ml水共热，溶解后冷却并加水至水共热，溶解后冷却并加水至850ml。再将冷却的。再将冷却的150ml硫酸铜溶液倾入。本硫酸铜溶液倾入。本试剂可长久保存。试剂可长久保存。四、操作方法：四、操作方法：淀粉酶的专一性：淀粉酶的专一性：管号管号1234561淀粉溶液（滴）淀粉溶液（滴）4442蔗糖溶液（滴）蔗糖溶液（滴）444稀释唾液（稀释唾液（ml）11煮沸过的稀释唾液煮沸过的稀释唾液（ml）11蒸馏水（蒸馏水（ml）1137 恒温水浴恒温水浴15minBenedict试剂（试剂（ml）111111沸水浴沸水浴23min现象现象 解释实验结果提示：唾液除含淀粉酶外还含有少量麦芽糖酶）解释实验结果提示：唾液