兽医微生物学

1、199912280021兽医微生物学兽医微生物学199912280022兽医微生物学 ( (多媒体教学课件多媒体教学课件) )天津农学院动科系动物预防医学教研室制作天津农学院动科系动物预防医学教研室制作199912280023绪言绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微生物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。生物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。细菌总论细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态

2、、致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。态、致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。免疫基础免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免疫调节，免疫技术及应用等。免疫调节，免疫技术及应用等。细菌各论细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、微生物学诊断和免疫防治等。微生物学诊断和免疫防治等。真菌真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与防治等。与防治等。病毒病毒

3、 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。病性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。实验实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、备及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测药敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病

4、原菌的认识，真菌与病毒培养测定等定等。内容简介内容简介199912280024第十五章第十五章 革兰氏阳性球菌革兰氏阳性球菌第十六章第十六章 肠杆菌科肠杆菌科第十七章第十七章 弧菌科弧菌科第十八章第十八章 巴氏杆菌科及相关属巴氏杆菌科及相关属第十九章第十九章 革兰氏阴性需氧杆菌革兰氏阴性需氧杆菌第二十章第二十章 革兰氏阴性无芽孢微需氧和厌氧菌革兰氏阴性无芽孢微需氧和厌氧菌第二十一章第二十一章 革兰氏阳性无芽孢杆菌革兰氏阳性无芽孢杆菌第二十二章第二十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌革兰氏阳性产芽孢杆菌第二十三章第二十三章 分支杆菌及相似属分支杆菌及相似属第二十四章第二十四章 螺旋体螺旋体第二十五章第二

5、十五章 霉形体霉形体第二十六章第二十六章 立克次体及衣原体立克次体及衣原体第三篇第三篇细菌学各论细菌学各论199912280025第二十四章第二十四章 螺旋体螺旋体第一节第一节 概述概述第二节第二节 疏螺旋体属疏螺旋体属第三节第三节 蛇形螺旋体属蛇形螺旋体属第四节第四节 密螺旋体属密螺旋体属第五节第五节 细螺旋体属细螺旋体属第三篇第三篇199912280026第一节第一节 概述概述 螺旋体螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、能活是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、能活泼运动的原核单细胞微生物。它的基本结构与细菌泼运动的原核单细胞微生物。它的基本结构与细菌类似，细胞壁中有脂多糖和壁酸，胞浆内含核质

6、，类似，细胞壁中有脂多糖和壁酸，胞浆内含核质，以二分裂繁殖。依靠位于胞壁和胞膜间的以二分裂繁殖。依靠位于胞壁和胞膜间的轴丝轴丝的屈的屈曲和旋转使其运动，这与原虫类似。所以螺旋体是曲和旋转使其运动，这与原虫类似。所以螺旋体是介于细菌和原虫之间的一类微生物。介于细菌和原虫之间的一类微生物。 螺旋体广泛存在于水生环境，也有许多分布在人螺旋体广泛存在于水生环境，也有许多分布在人和动物体内。大部分营自由的腐生生活或共生，无和动物体内。大部分营自由的腐生生活或共生，无致病性，只有一小部分可引起人和动物的疾病。致病性，只有一小部分可引起人和动物的疾病。第第24章章1999122800271. 形态与结构形态

7、与结构 螺旋体细胞呈螺旋状圆柱形，具有多螺旋体细胞呈螺旋状圆柱形，具有多个完整的螺旋。其大小极为悬殊，长可为个完整的螺旋。其大小极为悬殊，长可为5-250um，宽可为宽可为0.1-3um。某些可通过细菌滤器。细胞的螺数、。某些可通过细菌滤器。细胞的螺数、螺间及弧幅各不相同，在分类上有意义。螺间及弧幅各不相同，在分类上有意义。 轴丝轴丝 螺旋体的细胞中心为原生质柱，外有螺旋体的细胞中心为原生质柱，外有2-100根以上的根以上的轴丝，又称轴鞭毛或内鞭毛，现亦简称为轴丝，又称轴鞭毛或内鞭毛，现亦简称为鞭毛鞭毛，沿原生质柱的长轴缠绕其上。轴丝夹在细胞，沿原生质柱的长轴缠绕其上。轴丝夹在细胞壁外鞘和细胞

8、膜之间。螺旋体通过轴丝而运动，主壁外鞘和细胞膜之间。螺旋体通过轴丝而运动，主要有要有3种方式：种方式：沿长轴旋转，快速前进；沿长轴旋转，快速前进；细胞屈细胞屈曲伸缩前进；曲伸缩前进；螺旋状或蛇状前进。螺旋状或蛇状前进。第第24章章199912280028 螺旋体具有不定形的核，无芽孢，核酸兼有螺旋体具有不定形的核，无芽孢，核酸兼有RNA和和DNA，以二等分横分裂法繁殖。，以二等分横分裂法繁殖。 染色特性染色特性 都是革兰氏阴性，多数不易着色。姬都是革兰氏阴性，多数不易着色。姬姆萨氏染色效果较好，可染成姆萨氏染色效果较好，可染成红色红色或或蓝色蓝色。蓝色多。蓝色多属腐生性螺旋体。常用属腐生性螺旋

9、体。常用镀银染色法镀银染色法染色，使之变租染色，使之变租而显黑褐色。也用印度墨汁或刚果红负染，螺旋体而显黑褐色。也用印度墨汁或刚果红负染，螺旋体透明无色，背景衬有颜色，反差明显。以相差和暗透明无色，背景衬有颜色，反差明显。以相差和暗视野显微镜观察螺旋体效果良好。能检查形体又可视野显微镜观察螺旋体效果良好。能检查形体又可分辨运动方式，甚为常用。分辨运动方式，甚为常用。第第24章章1999122800292. 培养特性培养特性 螺旋体的培养有的较为困难，多数需螺旋体的培养有的较为困难，多数需厌氧培养。但有些属种，特别是细螺旋体厌氧培养。但有些属种，特别是细螺旋体(又称又称钩钩端螺旋体端螺旋体)的培

10、养并不难。个别致病性螺旋体可采的培养并不难。个别致病性螺旋体可采用含血液、腹水或其他特殊成分的培养基培养。有用含血液、腹水或其他特殊成分的培养基培养。有些螺旋体尚不能用人工培养基培养。些螺旋体尚不能用人工培养基培养。3. 分类分类 螺旋体目，下分为两个科，即螺旋体科和螺旋体目，下分为两个科，即螺旋体科和细螺旋体科。细螺旋体科只有一个属，即细螺旋体细螺旋体科。细螺旋体科只有一个属，即细螺旋体属（钩端螺旋体属）。螺旋体科又由螺旋体属、脊属（钩端螺旋体属）。螺旋体科又由螺旋体属、脊螺旋体属、密螺旋体属、疏螺旋体属和蛇形螺旋体螺旋体属、密螺旋体属、疏螺旋体属和蛇形螺旋体属五个属组成。其中与兽医有关的主

11、要有属五个属组成。其中与兽医有关的主要有疏螺旋体疏螺旋体属、密螺旋体属、蛇形螺旋体属和细螺旋体属属、密螺旋体属、蛇形螺旋体属和细螺旋体属。第第24章章1999122800210第第24章章1999122800211 第二节第二节 疏螺旋体属疏螺旋体属 本属成员细胞呈螺旋状，长本属成员细胞呈螺旋状，长3-20um，宽，宽0.2-0.5um，每条菌体有每条菌体有3-10个不规则的疏松螺旋，有个不规则的疏松螺旋，有15-20根轴根轴丝。以螺旋状推进方式活泼运动。用姬姆萨氏染液丝。以螺旋状推进方式活泼运动。用姬姆萨氏染液着色良好。易培养，微需氧或厌氧。着色良好。易培养，微需氧或厌氧。伯氏疏螺旋体伯氏疏

12、螺旋体 是是莱姆病莱姆病(Lyme disease)的病原体。莱姆病最早于的病原体。莱姆病最早于1975年在美国的莱姆镇发现，故而得名，现己遍布年在美国的莱姆镇发现，故而得名，现己遍布全世界。此病由全世界。此病由硬蜱硬蜱为传播媒介，感染人和犬、牛、为传播媒介，感染人和犬、牛、马等动物，致关节炎等多种疾病。马等动物，致关节炎等多种疾病。第第24章章19991228002121. 生物学特性生物学特性 菌体细长，长约菌体细长，长约20-30um，直径约，直径约0.2um，有，有4-20个大而宽疏的螺旋。其鞭毛缠绕着菌个大而宽疏的螺旋。其鞭毛缠绕着菌体，位于外膜和胞浆膜之间，称之为轴鞭毛。体，位于外

13、膜和胞浆膜之间，称之为轴鞭毛。2. 致病性致病性 伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体致人、犬、牛和马的关节炎致人、犬、牛和马的关节炎，被被硬蜱硬蜱叮咬的部位呈圆环状疹块，之后表现为游走叮咬的部位呈圆环状疹块，之后表现为游走性关节炎，可见破行、关节肿胀，发热及淋巴结肿性关节炎，可见破行、关节肿胀，发热及淋巴结肿大。大。 硬蜱在吸吮感染动物的血液之后，便可在数年内硬蜱在吸吮感染动物的血液之后，便可在数年内都具有传染性。啮齿动物是伯氏疏螺旋体的天然贮都具有传染性。啮齿动物是伯氏疏螺旋体的天然贮主。主。第第24章章19991228002133. 微生物学检查微生物学检查 蜱叮咬部的附近皮肤、患病关节蜱叮咬部的附

14、近皮肤、患病关节的关节液可用于病原学检测。用暗视野显微镜或作的关节液可用于病原学检测。用暗视野显微镜或作姬姆萨染色等可观察到疏螺旋体。姬姆萨染色等可观察到疏螺旋体。 伯氏疏螺旋体培养困难，可用改良的伯氏疏螺旋体培养困难，可用改良的Kelley氏培氏培养基分离培养，培养物每周用暗视野显微镜检查。养基分离培养，培养物每周用暗视野显微镜检查。 血清学诊断可行。血清学诊断可行。ELISA最为常用。犬在感染最为常用。犬在感染4周后即可测出抗体，周后即可测出抗体，3个月后抗体达高峰，此时犬个月后抗体达高峰，此时犬可持续感染。抗体滴度维持高水平至少可持续感染。抗体滴度维持高水平至少18个月。个月。 PCR、

15、限制性酶切及、限制性酶切及DNA杂交等分子生物学手杂交等分子生物学手段亦用于诊断。段亦用于诊断。第第24章章1999122800214 4. 防治防治 强力霉素或阿莫西林强力霉素或阿莫西林可用于莱姆病的治疗，可用于莱姆病的治疗，但只能一定程度缓解病损，并不能完全消灭伯氏疏螺但只能一定程度缓解病损，并不能完全消灭伯氏疏螺旋体。旋体。 在疫区可预防接种。有两种疫苗，一种是全菌灭活在疫区可预防接种。有两种疫苗，一种是全菌灭活疫苗，有不良反应，效果不好。另一种亚单位疫苗，疫苗，有不良反应，效果不好。另一种亚单位疫苗，为纯化的为纯化的OspA。用它免疫犬可产生抗体，当蜱吸血。用它免疫犬可产生抗体，当蜱吸

16、血时，伯氏疏螺旋体被抗体阻断，不能从蜱的中肠向唾时，伯氏疏螺旋体被抗体阻断，不能从蜱的中肠向唾液腺移行，从而使蜱不再感染新的吮血对象。液腺移行，从而使蜱不再感染新的吮血对象。第第24章章1999122800215第三节第三节 蛇形螺旋体属蛇形螺旋体属 蛇形螺旋体属是一个新属，包括蛇形螺旋体属是一个新属，包括猪痢蛇形螺旋体猪痢蛇形螺旋体和和无害蛇形螺旋体。无害蛇形螺旋体。本属特性本属特性 细胞呈疏松、规则的螺旋形，长细胞呈疏松、规则的螺旋形，长7-9um，宽宽0.3-0.4um。有。有8、9根轴丝，呈屈曲和蛇形运动或根轴丝，呈屈曲和蛇形运动或移位运动。有机营养。可在含移位运动。有机营养。可在含1

17、0胎犊、犊牛或兔血胎犊、犊牛或兔血清的酪蛋白胰酶消化物大豆胨汤清的酪蛋白胰酶消化物大豆胨汤(TSB)或脑心浸液汤或脑心浸液汤(BHIB)，36-42厌氧生长。在厌氧生长。在TSB 血液琼脂平板，血液琼脂平板，38培养培养48-96h形成扁平、半透明的菌落，大小形成扁平、半透明的菌落，大小0.5-3 mm，可呈现微弱或强，可呈现微弱或强溶血。溶血。第第24章章1999122800216 猪痢蛇形螺旋体猪痢蛇形螺旋体1.致病性致病性 猪痢疾猪痢疾又称血痢、黑痢、出血性痢疾、粘膜又称血痢、黑痢、出血性痢疾、粘膜出血性痢疾等，由猪痢蛇形螺旋体引起，最常发生于出血性痢疾等，由猪痢蛇形螺旋体引起，最常发生

18、于8-14周龄幼猪。主要症状是严重的粘膜出血性下痢和周龄幼猪。主要症状是严重的粘膜出血性下痢和迅速减重。特征病变为大肠粘膜发生部液渗出性迅速减重。特征病变为大肠粘膜发生部液渗出性(卡他卡他性性)、出血性和坏死性炎症。、出血性和坏死性炎症。经口传染经口传染，病的传播迅速，病的传播迅速，发病率较高发病率较高(约约75)而致死率较低而致死率较低(5-20) 。2. 形态结构及染色特性形态结构及染色特性 本螺旋体形态结构与其属的本螺旋体形态结构与其属的描述一致，菌体多为描述一致，菌体多为2-4个弯曲，两端尖锐。革兰氏阴个弯曲，两端尖锐。革兰氏阴性，姬姆萨氏和镀银法均能使其较好着色。性，姬姆萨氏和镀银法

19、均能使其较好着色。第第24章章19991228002173. 培养特性培养特性 严格厌氧严格厌氧，一般厌氧环境不易培养成功，一般厌氧环境不易培养成功，必须使用预先还原的培养基，并置于含的必须使用预先还原的培养基，并置于含的H2(或或N2)和和CO2(二者比例为二者比例为80：20)混合气体以及以冷钯为触媒混合气体以及以冷钯为触媒的环境中才能生长。对培养基要求苛刻，通常使用含的环境中才能生长。对培养基要求苛刻，通常使用含10胎牛胎牛(或犊牛或兔或犊牛或兔)血清或血液的血清或血液的TSB或或BHIB培养培养基。在基。在TSB血液琼脂上，血液琼脂上，3848-96min可形成扁平、可形成扁平、半透明

20、、针尖状、强半透明、针尖状、强溶血性菌落。溶血性菌落。4. 抗原与免疫性抗原与免疫性 猪痢疾密螺旋体有两种抗原成分：猪痢疾密螺旋体有两种抗原成分：脂多糖、蛋白质（特异性）脂多糖、蛋白质（特异性） 。该菌有。该菌有8个血清型。自个血清型。自然发病猪康复后，可产生相应的抗体，具有一定的保然发病猪康复后，可产生相应的抗体，具有一定的保护力。护力。第第24章章19991228002185. 微生物学检查微生物学检查（1） 直接镜检直接镜检 有以下有以下3种方法。种方法。 染色镜检：染色镜检：以病猪的新鲜粪便粘液，或病变结肠以病猪的新鲜粪便粘液，或病变结肠粘膜刮取物制成薄涂片，染色镜检。多用姬姆萨氏粘膜

21、刮取物制成薄涂片，染色镜检。多用姬姆萨氏法染色法。也可用印度墨汁作负染或镀银染色法染法染色法。也可用印度墨汁作负染或镀银染色法染色镜检。色镜检。 相差或暗视野显微镜活体检查：相差或暗视野显微镜活体检查：待检样品与适量待检样品与适量生理盐水混合后制成压滴标本片，用相差或暗视野生理盐水混合后制成压滴标本片，用相差或暗视野显微镜下镜检。若每个高倍视野中见有显微镜下镜检。若每个高倍视野中见有2-3个或更个或更多个蛇样运动的较大螺旋体即可确诊。多个蛇样运动的较大螺旋体即可确诊。第第24章章1999122800219 染色组织切片检查：染色组织切片检查：将采集的病变肠组织先用将采集的病变肠组织先用10甲醛

22、缓冲液固定后切片，再用维多利亚蓝染色法甲醛缓冲液固定后切片，再用维多利亚蓝染色法染色。镜检时可见螺旋体大量存在组织表面及粘液染色。镜检时可见螺旋体大量存在组织表面及粘液囊腔内，有时数量多到堆积成网状。囊腔内，有时数量多到堆积成网状。（2）分离培养：）分离培养：分离培养方法。分离培养方法。 过滤培养法：过滤培养法：将样品作将样品作5-10倍稀释，轻度离心，倍稀释，轻度离心，上清用上清用0.8um和和0.45um滤膜依次过滤。取滤液直接滤膜依次过滤。取滤液直接涂布接种于鲜血琼脂平板上，厌氧培养涂布接种于鲜血琼脂平板上，厌氧培养37-38培培养养3-6d，每隔，每隔2d检查检查1次，当观察到平板上出

23、现次，当观察到平板上出现溶溶血现象时，即可挑取可疑菌落，作成悬滴或压滴标血现象时，即可挑取可疑菌落，作成悬滴或压滴标本，用暗视野显微镜检查。本，用暗视野显微镜检查。第第24章章19991228002206. 防治防治 对猪痢目前尚无可靠或实用的免疫制剂以对猪痢目前尚无可靠或实用的免疫制剂以供预防之用。普遍采用抗生素和化学药物控制此病，供预防之用。普遍采用抗生素和化学药物控制此病，培育培育SPF猪，猪，净化猪群净化猪群是防治本病的主要手段。是防治本病的主要手段。第四节第四节 密螺旋体属密螺旋体属 (自学）自学） 第五节第五节 细螺旋体属细螺旋体属 细螺旋体属成员是一大类纤细、螺旋致密，一端细螺旋

24、体属成员是一大类纤细、螺旋致密，一端或两端弯曲呈钩状的螺旋体，故常称或两端弯曲呈钩状的螺旋体，故常称钩端螺旋体，钩端螺旋体，简称钩体简称钩体。大部分营腐生生活，广泛分布于各种水。大部分营腐生生活，广泛分布于各种水生环境中，无致病性。一部分为寄生性和致病性的生环境中，无致病性。一部分为寄生性和致病性的螺旋体，可螺旋体，可引起人和动物的细螺旋体病引起人和动物的细螺旋体病。第第24章章19991228002211. 形态结构与染色特性形态结构与染色特性 呈纤细的圆柱形，长呈纤细的圆柱形，长6-20um，宽，宽0.1-0.2um，螺旋弧度，螺旋弧度0.2-0.3um，至少有，至少有18个弯曲细密规则的

25、螺旋，菌体一端或两端可弯曲个弯曲细密规则的螺旋，菌体一端或两端可弯曲呈呈钩状钩状。其运动形式多样，能翻转和屈曲运动，也。其运动形式多样，能翻转和屈曲运动，也可沿其长轴旋转而快速前进。可沿其长轴旋转而快速前进。 细胞壁结构与革兰氏阴性杆菌相似。外膜位于原细胞壁结构与革兰氏阴性杆菌相似。外膜位于原生质柱和轴丝外层，相当于细菌荚膜。生质柱和轴丝外层，相当于细菌荚膜。 革兰氏染色阴性革兰氏染色阴性。镀银染色法和刚果红负染较好。镀银染色法和刚果红负染较好。用暗视野显微镜较易观察其形态和运动力。用暗视野显微镜较易观察其形态和运动力。第第24章章19991228002222. 2. 培养及生化特性培养及生化

26、特性 需氧，对营养要求不高，较需氧，对营养要求不高，较易人工培养。在含血清和蛋白胨的培养基上生长良易人工培养。在含血清和蛋白胨的培养基上生长良好。钩体某些菌株能产生溶血素。好。钩体某些菌株能产生溶血素。3. 3. 抵抗力抵抗力 钩体钩体pHpH中性湿土和水中可存活数月，中性湿土和水中可存活数月，该病主要经水源传播。对热和酸碱环境抵抗弱，该病主要经水源传播。对热和酸碱环境抵抗弱，4530min4530min，5010min5010min，6010s6010s即可致死。即可致死。44冰冰箱中可存活箱中可存活1-21-2周，周，-70-70可保存可保存2 2年多。对各种化年多。对各种化学消毒剂和青霉

27、素、金霉素、四环素等抗生素敏感学消毒剂和青霉素、金霉素、四环素等抗生素敏感性。性。4. 4. 抗原结构抗原结构 抗原分两种：表面抗原抗原分两种：表面抗原(P(P抗原抗原) )，为，为多糖蛋白复合物，具有型特异性。内部抗原多糖蛋白复合物，具有型特异性。内部抗原( (共同抗共同抗原，原，S S抗原抗原) )，系类脂多糖复合物，具有属特异性。，系类脂多糖复合物，具有属特异性。第第24章章1999122800223 5. 毒力因子毒力因子 本病为动物源性疾病。毒力因子主要本病为动物源性疾病。毒力因子主要有：有：吸附物质、溶血素、内毒素样物质、细胞毒性吸附物质、溶血素、内毒素样物质、细胞毒性因子。因子。

28、6. 感染途径及其所致疾病感染途径及其所致疾病 （1）传染源）传染源 钩体可感染大部分钩体可感染大部分哺乳动物和人哺乳动物和人。已。已从从50多种动物检出钩体，其中多种动物检出钩体，其中鼠类和猪鼠类和猪是钩体的主是钩体的主要贮存宿主和传染来源，排菌期长。要贮存宿主和传染来源，排菌期长。（2）感染途径）感染途径 人和家畜通过直接或间接地接触污人和家畜通过直接或间接地接触污染源而被感染。途径：染源而被感染。途径：(1) 损伤的皮肤黏膜，最为常损伤的皮肤黏膜，最为常见；见；(2) 口腔、咽喉头和肠道粘膜；口腔、咽喉头和肠道粘膜；(3) 动物咬伤或动物咬伤或吸血昆虫的叮咬，引起感染；吸血昆虫的叮咬，引

29、起感染；(4)通过交配或人工授通过交配或人工授精。精。第第24章章1999122800224（3）易感动物及症状）易感动物及症状 在家畜中以在家畜中以牛和羊牛和羊对钩体的对钩体的易感性最高，其次为易感性最高，其次为马、猪、犬、水牛和驴马、猪、犬、水牛和驴等，许等，许多野生动物，特别是鼠类易感。多野生动物，特别是鼠类易感。 钩体病临床表现：急性病例的主要症状为钩体病临床表现：急性病例的主要症状为发热、发热、贫血、出血、黄疸、血红素尿贫血、出血、黄疸、血红素尿及粘膜和皮肤坏死；及粘膜和皮肤坏死；亚急性病例可表现为亚急性病例可表现为肾炎、肝炎、脑膜炎肾炎、肝炎、脑膜炎及产后泌及产后泌乳缺乏症；慢性病

30、例则表现乳缺乏症；慢性病例则表现虹膜睫状体炎、流产、虹膜睫状体炎、流产、死产及不育或不孕死产及不育或不孕。（4）钩体病的病程）钩体病的病程 约持续约持续7-8d的钩体菌血症的钩体菌血症(前期前期发热发热)阶段和持续阶段和持续2-3月或更长时间的钩体菌尿期月或更长时间的钩体菌尿期(后后期无热期无热)阶段。在前期阶段，钩体于阶段。在前期阶段，钩体于血、肝、肾和脑血、肝、肾和脑脊髓液脊髓液中，而后期于中，而后期于肾肾内长期繁殖，经尿排出。内长期繁殖，经尿排出。第第24章章19991228002257. 微生物学诊断微生物学诊断 最后诊断有赖于微生物学检查。最后诊断有赖于微生物学检查。检查病料：即发病

31、检查病料：即发病7-8d内内(菌血症、发热期菌血症、发热期)可采集可采集血、脑脊髓液血、脑脊髓液，剖捡可取，剖捡可取肝和肾肝和肾；发病；发病7-8d后后(退热、退热、菌尿症期菌尿症期) 采集采集尿液尿液，死后为，死后为肾肾。方法：。方法：（1）直接镜检）直接镜检 可分可分2种方法：种方法： 暗视野活菌检查暗视野活菌检查：将病料差速离心集菌压滴标本：将病料差速离心集菌压滴标本片镜检。如在暗视野中见有钧体菌的典型形态与运片镜检。如在暗视野中见有钧体菌的典型形态与运动方式，即可确认为钩体。动方式，即可确认为钩体。 染色镜检染色镜检：多用改良镀银法和媒染法。前者使钩：多用改良镀银法和媒染法。前者使钩体

32、呈深黑色或灰色。后者，钩体呈紫红色。姬姆萨体呈深黑色或灰色。后者，钩体呈紫红色。姬姆萨染色片中钩体呈紫色。染色片中钩体呈紫色。第第24章章1999122800226（2）分离培养）分离培养 钩体的培养基很多，常用的有柯氏钩体的培养基很多，常用的有柯氏培养基等培养基。病料接种后，置培养基等培养基。病料接种后，置28-30温箱内温箱内培养，每培养，每5-7d观察钩体生长情况并取样镜检，连续观察钩体生长情况并取样镜检，连续四周四周 (最多至最多至3个月个月)末检出钩体者可作阴性处理。末检出钩体者可作阴性处理。（3）动物接种试验）动物接种试验 可用于病料内钩体的分离，又可用于病料内钩体的分离，又可作为菌株毒力测定。动物常用体重可作为菌株毒力测定。动物常用体重150-200g幼龄