第七章 微生物的分类命名及鉴定.

1、郑州牧专动物医药郑州牧专动物医药系微生物教研室系微生物教研室第七章第七章 微生物的分类命名及鉴定微生物的分类命名及鉴定 。（四）（四） 细菌的命名细菌的命名 （二）动物病毒分类的依据（二）动物病毒分类的依据（一）动物病毒分类的发展（一）动物病毒分类的发展 （一）细菌的分离鉴定的一般程序（一）细菌的分离鉴定的一般程序细菌分离鉴定的一般程序细菌分离鉴定的一般程序（二）细菌的分离与鉴定（二）细菌的分离与鉴定1、病料的采集、病料的采集 2 2、染色镜检、染色镜检3、分离培养及培养特性检查、分离培养及培养特性检查4、生化特性检查、生化特性检查 各种细菌所具有的酶系统各不相同，对营养物质的利用能力各异，因

2、而在代谢过程中所产生的合成或分解产物也不同。应用生物化学方法检测细菌的代谢产物，有助于细菌种、属鉴定。这种利用生化方法来鉴别细菌的试验，统称为细菌的生化试验或生化反应，是识别细菌的重要方法之一。应用生物化学的方法来检测这些物质的存在与否，有助于细菌的鉴别诊断。5、细菌血清型鉴定及血清学试验、细菌血清型鉴定及血清学试验 6、动物实验检查法和毒力测定、动物实验检查法和毒力测定 7、分子生物学技术在细菌鉴定中的应用、分子生物学技术在细菌鉴定中的应用 （一）病毒分离鉴定的一般程序（一）病毒分离鉴定的一般程序 （3）保存与运送保存与运送 病毒对外界因素特别是热很敏感。因此，必须将病料放在灭菌的保存液中（

3、一般用50甘油磷酸盐缓冲液），液体病料可加适量的抗生素以防污染。盛有病料的器皿应封口，再放入冰瓶内（内放冰块和食盐或干冰和酒精），在此低温条件下保存和送检病料。 （4）防止病料污染防止病料污染采集病料时，必须无菌操作。为防止液体病料被污染，有的可在其中加入适量的青霉素和链霉素或其他抗生素，如庆大霉素；若防止霉菌污染，还可加制霉菌素、二性霉素B等。供抗体检测的血清可加入防腐剂。 （1）动物接种）动物接种（2）鸡（禽）胚培养）鸡（禽）胚培养 卵黄囊胚体羊膜囊绒毛尿囊腔气室A A 绒毛尿囊膜接种绒毛尿囊膜接种 主要用于痘病毒和疱疹病毒的分离、增殖。因它们在鸡胚绒毛尿囊膜上形成主要用于痘病毒和疱疹病毒

4、的分离、增殖。因它们在鸡胚绒毛尿囊膜上形成痘斑或病斑。一般用痘斑或病斑。一般用10-1210-12日龄的鸡胚。日龄的鸡胚。B B 尿囊腔接种尿囊腔接种 C C 卵黄囊接种卵黄囊接种 D D 羊膜腔接种羊膜腔接种 羊膜腔接种 （3）组织培养）组织培养 组织培养是分离培养病毒及进行病毒实验研究简便而有效的工具和手段。组织培养是分离培养病毒及进行病毒实验研究简便而有效的工具和手段。近年来近年来,许多新的动物病毒就是通过组织培养方法而发现的许多新的动物病毒就是通过组织培养方法而发现的,组织培养也用于生产组织培养也用于生产病毒抗原及制备病毒疫苗。病毒抗原及制备病毒疫苗。 组织块培养组织块培养 就是将动物

5、组织切成小块在固定或悬浮状态下培养。是最早的组织培养方法。就是将动物组织切成小块在固定或悬浮状态下培养。是最早的组织培养方法。 器官培养器官培养 取器官薄片（如一小段器官或一小块鼻粘摸）进行培养，如某些呼吸道病毒就取器官薄片（如一小段器官或一小块鼻粘摸）进行培养，如某些呼吸道病毒就是应用器官培养才分离出来的。是应用器官培养才分离出来的。（4）细胞培养）细胞培养 （1）形态学检查-电镜技术（2 2）检查包涵体）检查包涵体（3）生物学特性鉴定生物学特性鉴定（4）病毒理化特性的测定）病毒理化特性的测定（5）病毒的血清学鉴定）病毒的血清学鉴定病毒的血清学鉴定病毒的血清学鉴定中和试验中和试验补体结合试验补体结合试验血凝抑制试验血凝抑制试验琼脂扩散试验等琼脂扩散试验等免疫荧光抗体技术免疫荧光抗体技术酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（ELISA）金标抗体技术金标抗体技术 应用荧光抗体技术、免疫组化染色技术应用荧光抗体技术、免疫组化染色技术 应用金标