第3章药剂卫生

1、第三章第三章 药剂卫生药剂卫生6/2/20226/2/2022学习目标 记住常用灭菌方法的含义与特点。 说出主要防腐剂的应用注意问题。 简述药剂卫生的基本要求及药物可能被污染的途径。 叙述无菌操作法、制药环境卫生的基本要求。6/2/20226/2/2022第一节第一节 概述概述一、药剂卫生一、药剂卫生（一）含义：药剂卫生主要论述药剂（一）含义：药剂卫生主要论述药剂微生物方面的要求及达到要求所采取微生物方面的要求及达到要求所采取的措施和方法。的措施和方法。（二）重要性：（二）重要性：1.1.药剂微生物污染导致：药剂微生物污染导致：u药剂变质腐败药剂变质腐败u疗效丧失降低疗效丧失降低u产生有害物质

2、引起机体感染、发热、产生有害物质引起机体感染、发热、中毒、致癌中毒、致癌6/2/20222. 2. 药剂卫生的意义药剂卫生的意义: :u是实行是实行GMPGMP制度的基本保证；制度的基本保证； u保证产品质量；保证产品质量； u作为药剂生产和质量控制的依据之一。作为药剂生产和质量控制的依据之一。6/2/20223. 3. 研究药剂卫生的内容研究药剂卫生的内容: :研究药剂中：研究药剂中：u如何杀菌、除菌的措施；如何杀菌、除菌的措施；u如何防止细菌污染的措施；如何防止细菌污染的措施；u如何抑制细菌生长繁殖（防腐）的如何抑制细菌生长繁殖（防腐）的措施。措施。二、中药制剂的卫生标准：二、中药制剂的卫

3、生标准：1 1、口服给药：、口服给药：1g1g或者或者1ml1ml中不得检测出大肠杆菌，中不得检测出大肠杆菌，含有动物组织及动物类药材原粉含有动物组织及动物类药材原粉（蜂蜜、动物角、阿胶除外）的药（蜂蜜、动物角、阿胶除外）的药品同时不得检出沙门菌品同时不得检出沙门菌6/2/2022（1 1）不含药材原粉的制剂：）不含药材原粉的制剂：（2 2）含药材原粉的制剂：）含药材原粉的制剂：（3 3）含豆豉、神曲等发酵原粉的制剂：）含豆豉、神曲等发酵原粉的制剂：(上图)显微镜下，放大100倍的头螨。(下图)头螨有8只脚，是一种嗜脂性的微小动物。 活螨活螨用于口服、创伤、粘膜和腔道的药品，不得检出活螨。6/

4、2/2022二、中药制剂的卫生标准：二、中药制剂的卫生标准：2 2、局部给药制剂：、局部给药制剂：外用药品每克或每毫升不得检出外用药品每克或每毫升不得检出绿脓杆菌绿脓杆菌和和金金黄色葡萄球菌黄色葡萄球菌；用于阴道、溃疡面以及破创面的药品不得检出用于阴道、溃疡面以及破创面的药品不得检出破伤风杆菌破伤风杆菌。2 2、局部给药制剂：、局部给药制剂：（1 1）用于）用于手术、烧伤或严重创伤手术、烧伤或严重创伤的局部给药的局部给药制剂应符合无菌检查法无菌的规定。制剂应符合无菌检查法无菌的规定。（2 2）用于）用于表皮或黏膜不完整表皮或黏膜不完整的含的含中药原粉中药原粉的的局部给药制剂：局部给药制剂：细菌

5、数细菌数: :每每1g1g或或10cm10cm2 2不得过不得过l000l000个个; ;每每lmllml不不得过得过l00l00个。个。霉菌和酵母菌数霉菌和酵母菌数: : 每每1g1g、1ml1ml或或10cm10cm2 2不得过不得过100100个。个。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌: :每每1g1g、1ml1ml或或10cm10cm2 2不得检出。不得检出。（3 3）用于表皮或黏膜完整的含中药原粉的局部给）用于表皮或黏膜完整的含中药原粉的局部给药制剂药制剂： 细菌数细菌数: :每每1g1g或或10cm10cm2 2不得过不得过l0000l0000个个; ;每每1

6、ml1ml不不得过得过100100个。个。霉菌和酵母菌数霉菌和酵母菌数: :每每1g1g、1ml1ml或或10cm10cm2 2不得过不得过100100个。个。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌: :每每1g1g、1ml1ml或或10cm10cm2 2不得检出。不得检出。（4 4）眼部给药制剂：）眼部给药制剂：细菌数细菌数: :每每1g1g或或1ml1ml不得过不得过l0l0个。个。霉菌和酵母菌数霉菌和酵母菌数: : 每每1g1g或或1ml1ml不得检出。不得检出。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌: :每每1g1g或或1ml

7、1ml不得检出。不得检出。（5 5）耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂：）耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂： 细菌数细菌数: :每每1g1g、1ml1ml或或10cm10cm2 2不得过不得过l00l00个。个。霉菌和酵母菌数霉菌和酵母菌数: :每每1g1g、1ml1ml或或10cm10cm2 2不得过不得过1010个。个。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌: :每每1g1g、1ml1ml或或10cm10cm2 2不得检出。不得检出。大肠埃希菌大肠埃希菌: :鼻及呼吸道给药的制剂鼻及呼吸道给药的制剂, ,每每1g1g、1ml1ml或或10cm10cm2 2不得检出。不得检出。（6 6）

8、阴道、尿道给药制剂：）阴道、尿道给药制剂：细菌数细菌数: :每每1g1g或或1ml1ml不得过不得过l00l00个。个。霉菌和酵母菌数霉菌和酵母菌数: : 每每1g1g或或1ml1ml应小于应小于1010个。个。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、梭菌金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、梭菌: :每每1g1g或或1ml1ml不得检出。不得检出。（7 7）直肠给药制剂：）直肠给药制剂： 细菌数细菌数: :每每1g1g不得过不得过l000l000个；每个；每1ml1ml不得过不得过l00l00个。个。霉菌和酵母菌数霉菌和酵母菌数: :每每1g1g或或1ml1ml不得过不得过100100个。个。金黄色葡萄球菌、

9、铜绿假单胞菌、大肠杆菌金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌: :每每1g1g或或1ml1ml不得检出。不得检出。6/2/2022三、中药制剂可能被微生物污染的途径及处理三、中药制剂可能被微生物污染的途径及处理措施：措施：1. 药物原料药物原料2. 辅料材料辅料材料3. 制药器械制药器械4. 环境条件环境条件5. 操作人员操作人员6. 包装材料包装材料（一）原辅料和包装材料的选择与处理（一）原辅料和包装材料的选择与处理: :1 1、原料原料: :中药制剂的原料主要是：中药制剂的原料主要是：植物的根植物的根、根茎、叶、花、果实根茎、叶、花、果实和动物组织或和动物组织或其脏器等。其脏器等。原中药不

10、仅本身带有大量的：原中药不仅本身带有大量的： 微生物微生物、 虫卵及杂质。虫卵及杂质。而且在采集而且在采集、贮藏贮藏、运输过程中还会受到各种运输过程中还会受到各种污染。污染。原中药（原料）的洁净处理原中药（原料）的洁净处理, ,应根据中药不同应根据中药不同的性质的性质, ,分别采取适当的方法分别采取适当的方法。一般：一般：耐热而质地坚硬的中药耐热而质地坚硬的中药可采用水洗干燥、可采用水洗干燥、流通蒸气灭菌等综合处理方法流通蒸气灭菌等综合处理方法; ;对含热敏性成分的中药对含热敏性成分的中药可采用酒精喷洒可采用酒精喷洒处理处理, ,也可采用环氧乙烷气体灭菌或也可采用环氧乙烷气体灭菌或射线辐射线辐

11、射灭菌的方法处理。射灭菌的方法处理。 这些方法的运用以既不影响中药的外观和这些方法的运用以既不影响中药的外观和有效成分含量有效成分含量, ,又能杀灭微生物为最佳。又能杀灭微生物为最佳。2 2、辅料辅料: : 中药制剂制备过程中常会使用各种辅料（如中药制剂制备过程中常会使用各种辅料（如各类型生产用各类型生产用水水, ,蜂蜜蜂蜜、蔗糖蔗糖等）等）, ,都应有相应的都应有相应的质量标准以保证清洁质量标准以保证清洁。饮用水应符合卫生部生活饮用水标准；饮用水应符合卫生部生活饮用水标准；纯化水纯化水、注射用水应符合中国药典注射用水应符合中国药典标准；标准；其他来源的天然水因含有各种微生物其他来源的天然水因

12、含有各种微生物或杂质或杂质, ,不经处理不能作为药剂用水使用。不经处理不能作为药剂用水使用。其它辅料（又如蜂蜜其它辅料（又如蜂蜜、蔗糖、淀粉、糊精等蔗糖、淀粉、糊精等）, ,也可能含有一定数量的微生物也可能含有一定数量的微生物, ,使用使用前应严格按标准进行选择并作适当处前应严格按标准进行选择并作适当处理理, ,以防止微生物带入制剂以防止微生物带入制剂。3 3、包装材料、包装材料: : 中药制剂的包装材料中药制剂的包装材料, ,种类众多种类众多, ,材料的性材料的性质各异且一般与药品直接接触质各异且一般与药品直接接触, ,故如果包装材料故如果包装材料本身的质量不佳或者保管不当本身的质量不佳或者

13、保管不当, ,均有造成中药制均有造成中药制剂污染微生物的可能。因此剂污染微生物的可能。因此, ,应采用适当的方法应采用适当的方法清洗、洁净清洗、洁净, ,并作相应的灭菌处理。并作相应的灭菌处理。清洗。清洗。热力灭菌。热力灭菌。环氧乙烷灭菌。环氧乙烷灭菌。4 4、环境卫生和空气的净化环境卫生和空气的净化: : 不洁的环境使空气中含有大量的微生物不洁的环境使空气中含有大量的微生物, ,从从而污染药物原辅料、制药用具和设备而污染药物原辅料、制药用具和设备, ,最终导致最终导致中药制剂的污染。对不同制剂的生产厂房应根中药制剂的污染。对不同制剂的生产厂房应根据据药品生产质量管理规范药品生产质量管理规范所

14、规定的要求所规定的要求, ,达达到相应的洁净级别到相应的洁净级别, ,使尘埃粒子和菌落数控制在使尘埃粒子和菌落数控制在限度范围内限度范围内. .5 5、制药设备和用具的处理、制药设备和用具的处理: :制药设备与用具一般制药设备与用具一般直接同药物接触直接同药物接触, ,其表面带有的微生物其表面带有的微生物, ,会直接污会直接污染药品。因此染药品。因此, ,制药设备和用具制药设备和用具, ,必须采用适当的必须采用适当的方法方法, ,及时进行洁净与灭菌处理及时进行洁净与灭菌处理。制药设备和用制药设备和用具使用后具使用后, ,也应尽快清洗干净也应尽快清洗干净, ,保持洁净和干燥状保持洁净和干燥状态。

15、必要时态。必要时, ,临用前还应消毒灭菌。临用前还应消毒灭菌。消毒剂应轮消毒剂应轮流使用，防止产生微生物耐药菌株。流使用，防止产生微生物耐药菌株。6、操作人员的卫生管理:药品生产过程中,操作人员是最主要的微生物污染源。人体携带的微生物可能给药品生产造成污染。为防止污染：操作人员必须注意个人卫生操作人员必须注意个人卫生, ,严格执行卫生管严格执行卫生管理制度理制度, ,穿戴专用的工作衣物穿戴专用的工作衣物, ,并定时换洗。并定时换洗。不得化妆和佩带装饰物，不得化妆和佩带装饰物，1OO1OO级洁净厂房内的级洁净厂房内的生产操作人员不得裸手操作。生产操作人员不得裸手操作。建立健康档案，每年至少体检一

16、次，传染病建立健康档案，每年至少体检一次，传染病患病、体表有伤口者、皮肤病患者及药物过敏患病、体表有伤口者、皮肤病患者及药物过敏者等不得从事直接接触药品的生产。者等不得从事直接接触药品的生产。 6/2/2022四、制药环境的卫生要求四、制药环境的卫生要求一、制药环境的总体要求1、厂址选择 药品生产企业必须有整洁的生产环境，生产区的地面、路面及运输等不应对药品的生产造成污染；2、厂区规划布置 厂房必须按生产工艺和产品质量的要求划分洁净级别。 厂房应按生产工艺流程及所要求的洁净级别合理布局。同一厂房和邻近厂房进行的各项生产操作不得相互妨碍。（1）在建厂或改造时，应将厂区总平面按建筑物的使用性质进行

17、全厂性的归类分区布置（按生产、行政、生活和辅助区划分）。（2）非生产区和生产区要严格分开。厂区内的洁净区域应位于上风侧 中药材的前处理、提取、浓缩以及动物脏器、组织的洗涤或处理等生产操作，必须与其制剂生产严格分开。制剂厂房应位于污染源主导风的上侧。中药材的蒸、炒、炙、煅等炮制操作应有良好的通风、除烟、除尘、降温设施。筛选、切片、粉碎等操作应有有效的除尘、排风设施。 实验动物房应与其他区域严格分开，应建在偏僻处，位于，并要有专用的排水、排污和空调设备 洁净室（区）内各类管道应安装在夹层内，室内表面应平整光滑、无裂缝、接口严密、无颗粒物脱落，并能耐受清洗和消毒，墙壁与地面的交界处宜成弧形或采取其他

18、措施，以减少灰尘积聚和便于清洁。 洁净室（区）与非洁净室（区）之间必须设置缓冲设施， 人、物流走向合理。二、制药环境的空气净化。 概念：空气洁净技术：是指采用各种技术与方法，将空气中漂浮的灰尘、纤维、细菌等微粒除去，达到控制空气中尘埃的数量，减低细菌污染的可能性，从而使生产药品的环境符合药品洁净度要求的技术。它的任务是研究并采取有效的空气调节措施,达到控制生产场所中尘粒浓度和细菌数量以及适当的温度、湿度,以防止其影响产品质量。 常用的空气洁净技术：非层流型空调系统常用的空气洁净技术：非层流型空调系统与层流洁净技术。与层流洁净技术。（一）非层流型空调系统：（一）非层流型空调系统： 非层流型洁净空

19、调系统：净化厂房采用封非层流型洁净空调系统：净化厂房采用封闭式建筑，室内空气经净化空调装置送入。闭式建筑，室内空气经净化空调装置送入。这这样，既能保证空气的洁净，达到一定洁净级别，样，既能保证空气的洁净，达到一定洁净级别，而且有适宜的温度和湿度，创造一个舒适的生而且有适宜的温度和湿度，创造一个舒适的生产环境。但非层流型净化空调装置送入的空气产环境。但非层流型净化空调装置送入的空气呈错乱状态，属于紊流。紊流状气流可使空气呈错乱状态，属于紊流。紊流状气流可使空气中夹带的混悬粒子迅速混合，由小粒子聚结成中夹带的混悬粒子迅速混合，由小粒子聚结成大粒子，也可使室内静止的微粒重新飞扬，而大粒子，也可使室内

20、静止的微粒重新飞扬，而且室内死角处的部分空气出现停滞状态，因而且室内死角处的部分空气出现停滞状态，因而不易将粒子除净，净化效果较差。不易将粒子除净，净化效果较差。最多使洁净最多使洁净度达到万级标准。度达到万级标准。1、效果：不易将粒子除净，净化效果较差。2、原因：非层流型净化空调装置送入的空气呈错乱状态，属于紊流。（二）非层流型空调系统（二）层流洁净技术：（二）层流洁净技术：1 1、层流洁净技术的特点：、层流洁净技术的特点：层流是一种粒子流层流是一种粒子流体连续稳定的运动形式，是一切粒子保持在层体连续稳定的运动形式，是一切粒子保持在层流层中的运动。这样，粒子不易聚结，空气流流层中的运动。这样，

21、粒子不易聚结，空气流速相对提高，粒子在空气中浮动，不会聚积和速相对提高，粒子在空气中浮动，不会聚积和沉降。另外室内空气也不会出现停滞状态。沉降。另外室内空气也不会出现停滞状态。6/2/20222 2、水平层流洁净室：、水平层流洁净室：3、垂直层流洁净室：6/2/2022GMP相关规定 第十五条规定：进入洁净室（区）的空气必须净化，并根据生产工艺划分空气洁净度级别。 第十七条规定：洁净室（区）的温度和相对湿度应与药品生产工艺要求相适应。无特殊要求时，温度应控制在1826，相对湿度控制在45%65%。二、空气洁净技术与应用6/2/2022第三节 灭菌法与无菌操作有关概念：有关概念：1.1. 灭菌法

22、：灭菌法：杀死或除去所有微生物的繁殖体和杀死或除去所有微生物的繁殖体和芽芽孢孢的技术方法。的技术方法。2.2. 灭菌：灭菌：用物理或化学方法将所有致病菌和非致用物理或化学方法将所有致病菌和非致病菌的微生物、细菌的芽孢全部杀死的操作。病菌的微生物、细菌的芽孢全部杀死的操作。3. 3. 消毒：消毒：用物理或化学方法将病原微生物杀死用物理或化学方法将病原微生物杀死4.4. 防腐（抑菌）：防腐（抑菌）：用低温或化学方法防止和抑制用低温或化学方法防止和抑制微生物的生长繁殖。微生物的生长繁殖。5. 5. 灭菌原则：灭菌原则：(1).(1). 以完全杀死芽胞为标准以完全杀死芽胞为标准(2). (2). 而且

23、要与药物性质相结合，保证药剂中药物而且要与药物性质相结合，保证药剂中药物的稳定性。的稳定性。6/2/2022恶劣环境下，一个细菌产生一个芽孢，条件适宜恶劣环境下，一个细菌产生一个芽孢，条件适宜时重新成为一个细菌，数量没有增加，因此芽孢时重新成为一个细菌，数量没有增加，因此芽孢不是细菌的繁殖体，是休眠体不是细菌的繁殖体，是休眠体。物理灭菌法物理灭菌法：利用蛋白质或核酸具有遇热和：利用蛋白质或核酸具有遇热和对射线不稳定的特性，采用加热、辐射和过滤对射线不稳定的特性，采用加热、辐射和过滤等物理手段达到灭菌目的的方法。等物理手段达到灭菌目的的方法。包括：包括：干热灭菌法干热灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法

24、 紫外线灭菌法紫外线灭菌法 辐射灭菌法辐射灭菌法 微波灭菌法微波灭菌法 滤过除菌法滤过除菌法（一）干热灭菌法：（一）干热灭菌法：是利用火焰或干热空气进行灭是利用火焰或干热空气进行灭菌的方法。菌的方法。1 1、火焰灭菌法、火焰灭菌法：将被灭菌物品：将被灭菌物品置于火焰上直接灼烧。适宜于不易置于火焰上直接灼烧。适宜于不易被火焰损伤的被火焰损伤的瓷器、玻璃和金属制品瓷器、玻璃和金属制品等器具的灭菌。等器具的灭菌。 特点：特点：简便，灭菌效果可靠简便，灭菌效果可靠。6/2/2022利用高温（火焰、干热空气）灭菌。利用高温（火焰、干热空气）灭菌。特点：特点：高温使细菌原生质凝固、细菌的高温使细菌原生质凝

25、固、细菌的酶系统破坏。酶系统破坏。1.1. 火焰灭菌法火焰灭菌法: : 灼烧，最迅速、可靠、灼烧，最迅速、可靠、简便、应急的灭菌方法。简便、应急的灭菌方法。物品迅速通过火焰物品迅速通过火焰3-43-4次加热次加热2020秒以上秒以上. .6/2/2022接种环接种环l2 2、干热空气灭菌法：、干热空气灭菌法：在干热灭菌器或高温烘在干热灭菌器或高温烘箱中利用高温箱中利用高温干热空气灭菌干热空气灭菌。因干热空气穿透。因干热空气穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，故力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，故只适用于只适用于l耐高温玻璃制品、瓷制品耐高温玻璃制品、瓷制品l金属制品金属制品l油脂类（

26、某些软膏基质、油、）油脂类（某些软膏基质、油、）l湿热灭菌无效的非水性物质（甘湿热灭菌无效的非水性物质（甘 油、液体石油、液体石蜡等）蜡等） l耐高温的粉末化学药品耐高温的粉末化学药品6/2/2022（1 1）设备）设备: : 电热烘箱、高温烘房；电热烘箱、高温烘房； 真空干燥灭菌箱；真空干燥灭菌箱；（2 2）灭菌条件）灭菌条件: :l 180 180 ， 1 h1 h以上；以上；l 160 160170 170 ， 2h2h以上；以上；l 140 140 ，3h3h6/2/2022（4 4） 缺点：缺点：l要求温度高、时间长：因为干热无水穿要求温度高、时间长：因为干热无水穿透力弱、比热值低，

27、细菌无水蛋白质在透力弱、比热值低，细菌无水蛋白质在170 170 加热也难凝固加热也难凝固 ； l温度不易均匀温度不易均匀 不适用于橡胶、塑料制品、大部分药不适用于橡胶、塑料制品、大部分药物物6/2/2022（5 5）操作注意：）操作注意：l灭菌前被灭菌器具包严灭菌前被灭菌器具包严l药物要封装密封药物要封装密封l空安瓿置于密盖的金属盒中灭菌物空安瓿置于密盖的金属盒中灭菌物品四面不靠壁品四面不靠壁l油类、软膏基质、粉末铺成薄层油类、软膏基质、粉末铺成薄层l灭菌后缓慢降温后再取出灭菌后缓慢降温后再取出6/2/20226/2/2022（二）湿热灭菌法：利用饱和水蒸气或沸水进行灭菌（二）湿热灭菌法：利

28、用饱和水蒸气或沸水进行灭菌的方法。的方法。1. 1. 原理：原理： 热力破坏蛋白质和核酸中的氢热力破坏蛋白质和核酸中的氢键，键， 导致核酸破坏，蛋白质变性或凝导致核酸破坏，蛋白质变性或凝固，酶失去活性，微生物因而死亡。固，酶失去活性，微生物因而死亡。2.2. 特点：特点： (1). (1). 蒸气比热大，穿透力强，蒸气比热大，穿透力强， 所以灭所以灭菌效力高于干热灭菌法。菌效力高于干热灭菌法。 (2). (2). 灭菌效果可靠灭菌效果可靠, ,简便、经济、易控简便、经济、易控制制 (3). (3). 制剂生产中广泛可靠的灭菌方法。制剂生产中广泛可靠的灭菌方法。6/2/20223.3.适用范围：

29、适用范围： 对热敏感的药物不适用对热敏感的药物不适用 ; ; 其他药物均可选用。其他药物均可选用。4. 4. 方法种类：方法种类：l热压灭菌法热压灭菌法l流通蒸气灭菌流通蒸气灭菌l低温间隙灭菌低温间隙灭菌影响湿热灭菌的因素：影响湿热灭菌的因素：微生物的种类和数量：繁殖期的微生物抗热能微生物的种类和数量：繁殖期的微生物抗热能力小，细菌的芽胞耐热性强。微生物数量多，需力小，细菌的芽胞耐热性强。微生物数量多，需要的灭菌时间长。要的灭菌时间长。药物与介质的性质：制剂中的营养物质对微生药物与介质的性质：制剂中的营养物质对微生物有一定的保护作用；微生物在中性环境中耐热物有一定的保护作用；微生物在中性环境中

30、耐热性最大，碱性环境次之，酸性环境则不利微生物性最大，碱性环境次之，酸性环境则不利微生物生长。生长。蒸气的性质：饱和蒸气热含量高，穿透力强，蒸气的性质：饱和蒸气热含量高，穿透力强，灭菌效果好，故热压灭菌应采用饱和蒸气。灭菌效果好，故热压灭菌应采用饱和蒸气。灭菌时间：达到灭菌要求的前提下，适当降灭菌时间：达到灭菌要求的前提下，适当降低温度和缩短时间。低温度和缩短时间。6/2/2022分类：分类：1、热压灭菌法（高温高压，公认最为肯定）、热压灭菌法（高温高压，公认最为肯定） 2、流通蒸汽灭菌法与煮沸灭菌法（温度低，操、流通蒸汽灭菌法与煮沸灭菌法（温度低，操作简便，时间短）作简便，时间短） 3、低温

31、间歇灭菌法（温度低，适用于）、低温间歇灭菌法（温度低，适用于） 特点：特点： 湿热蒸气比热大，穿透力强，湿热蒸气比热大，穿透力强，易使蛋白质凝固易使蛋白质凝固； 细菌在湿热条件下菌体因吸收水分而易膨胀破裂；细菌在湿热条件下菌体因吸收水分而易膨胀破裂；水蒸气与物品接触而凝结成水，放出液化热，提高温水蒸气与物品接触而凝结成水，放出液化热，提高温度，加速细菌死亡。度，加速细菌死亡。效果较效果较干热灭菌好干热灭菌好，操作又很简便。故应用广泛，是，操作又很简便。故应用广泛，是目前药物制剂最常用灭菌方法。目前药物制剂最常用灭菌方法。6/2/2022(1).(1).热压灭菌法：热压灭菌法： 在热压灭菌器内，

32、利用大于常压的在热压灭菌器内，利用大于常压的高压水蒸气灭菌的方法。高压水蒸气灭菌的方法。 特点：特点：灭菌作用强、最可靠灭菌作用强、最可靠; ; 适用于耐热药物及水溶液、外科敷适用于耐热药物及水溶液、外科敷料、手术器械及用具等物品灭菌。料、手术器械及用具等物品灭菌。 6/2/2022 灭菌条件灭菌条件: : 大于常压的水蒸气：大于常压的水蒸气： 压力：压力：饱和蒸气压（表压：饱和蒸气压（表压： 0.7kg/cm0.7kg/cm 2 2）； 温度：温度：115115 ； 时间：时间：30min30min； 能杀灭所有细菌（增殖体）和芽孢。能杀灭所有细菌（增殖体）和芽孢。6/2/2022热压灭菌器

33、热压灭菌器 组成：组成：排气口、安全阀，压力表、温度计、排气口、安全阀，压力表、温度计、密封圈盖、夹层等部件。密封圈盖、夹层等部件。 高压设备高压设备，必须严格按操作规程，必须严格按操作规程 操作、操作、用前检查；用前检查；6/2/2022灭菌器种类：灭菌器种类：l手提式热压灭菌器：科研、检验、手提式热压灭菌器：科研、检验、医务室医务室 l卧式热压灭菌柜：大型灭菌器，卧式热压灭菌柜：大型灭菌器，生产、生产、 制剂室、制剂室、 医院消毒医院消毒 l真空卧式热压灭菌柜（立式）真空卧式热压灭菌柜（立式）卧式热压灭菌柜示意图：热压灭菌器操作应注意问题：热压灭菌器操作应注意问题：（1 1）使用前应认真检

34、查灭菌器的主要部件是否正常）使用前应认真检查灭菌器的主要部件是否正常完好。完好。（2 2）灭菌时，必须首先将灭菌器内的）灭菌时，必须首先将灭菌器内的冷空气排出冷空气排出。（3 3）灭菌时间必须从全部待灭菌物品达到）灭菌时间必须从全部待灭菌物品达到预定的温预定的温度度时算起，并维持规定的时间。时算起，并维持规定的时间。（4 4）灭菌柜内物品摆放不能太挤，以免妨碍蒸气流灭菌柜内物品摆放不能太挤，以免妨碍蒸气流通。通。灭菌完毕后停止加热，放出锅内蒸气，灭菌完毕后停止加热，放出锅内蒸气，锅内外锅内外压力相等压力相等后，开启灭菌器，待被灭菌物品温度下降后，开启灭菌器，待被灭菌物品温度下降至约至约8080

35、时，才可以把灭菌器的门全部打开，这样时，才可以把灭菌器的门全部打开，这样可有效避免内外压相差太大或冷空气突然进入而造可有效避免内外压相差太大或冷空气突然进入而造成锅内玻璃瓶炸裂、药液冲出锅外的事故发生。成锅内玻璃瓶炸裂、药液冲出锅外的事故发生。6/2/2022（2 2）流通蒸气灭菌法）流通蒸气灭菌法 无压力、不密闭容器无压力、不密闭容器, 100, 100蒸气蒸气灭菌或将药物密闭容器放在水中煮灭菌或将药物密闭容器放在水中煮沸沸 ，30min30min或或60min60min 。 适用于一些注射剂生产，尤其是适用于一些注射剂生产，尤其是1 12ml2ml注射剂及不耐高热的品种。注射剂及不耐高热的

36、品种。此法不能保证杀灭芽孢，因此制备过此法不能保证杀灭芽孢，因此制备过程要避免污染。程要避免污染。6/2/2022（3 3） 低温间歇灭菌法：低温间歇灭菌法： 将被灭菌药物用将被灭菌药物用60608080加热加热1h1h 先杀先杀死细菌繁殖体后室温放置死细菌繁殖体后室温放置24h 24h ，让芽孢发，让芽孢发育成繁殖体，再第二次加热将其消灭，连育成繁殖体，再第二次加热将其消灭，连续三次。续三次。特点：特点： 适用于必须热压灭菌，但又不耐较高温度适用于必须热压灭菌，但又不耐较高温度的制剂或药品。的制剂或药品。 时间长、功效低，消灭芽孢效果差；时间长、功效低，消灭芽孢效果差； 本法灭菌的药品除本身

37、具有抑菌作用，本法灭菌的药品除本身具有抑菌作用，还须添加适量抑菌剂增强灭菌效果。还须添加适量抑菌剂增强灭菌效果。（三）紫外线灭菌：利用紫外线和因其照射空（三）紫外线灭菌：利用紫外线和因其照射空气所产生的微量臭氧来灭菌的方法。气所产生的微量臭氧来灭菌的方法。应用：紫外线的穿透能力弱，仅能穿透清洁的紫外线的穿透能力弱，仅能穿透清洁的空气和纯净的水，因而广泛用于空气灭菌与表空气和纯净的水，因而广泛用于空气灭菌与表面灭菌。面灭菌。条件：灭菌波长：灭菌波长：220290nm 灭菌力最强：灭菌力最强：254257nm适宜温度：适宜温度：1055 相对湿度：相对湿度：45%60%灭菌时间：灭菌时间：0.51

38、h6/2/2022（三）、紫外线灭菌法（三）、紫外线灭菌法1 1、作用机理：、作用机理：主要作用细菌核酸及蛋白使其变性。主要作用细菌核酸及蛋白使其变性。 空气紫外线照射，产生臭氧发挥共空气紫外线照射，产生臭氧发挥共同杀菌作用。同杀菌作用。主要用于主要用于空气灭菌空气灭菌和和表面灭菌表面灭菌6/2/20222 2、特点：、特点： 灭菌紫外线灭菌紫外线 波长是波长是200200300nm300nm，最强是，最强是254nm254nm 直线传播，其强度与距离的平方成比例地直线传播，其强度与距离的平方成比例地减弱，可被不同的表面反射减弱，可被不同的表面反射 ，固需短距离灭，固需短距离灭菌。菌。 穿透力

39、弱但易穿透清洁空气和水，广泛应用穿透力弱但易穿透清洁空气和水，广泛应用于空气和表面灭菌；于空气和表面灭菌；普通玻璃吸收紫外线普通玻璃吸收紫外线 ，故玻璃容器中药物不，故玻璃容器中药物不用此法灭菌；用此法灭菌；紫外线人体照射过久紫外线人体照射过久 能产生结膜炎和皮肤烧能产生结膜炎和皮肤烧灼现象，灼现象，6/2/2022 3 3、使用方法：、使用方法：一般一般6 615m15m3 3、装、装30w30w紫外灯一只；紫外灯一只；灯距地面灯距地面2.53m2.53m，温度，温度10105555，湿度湿度45456060。 应在操作前照射应在操作前照射1 12h,2h,操作时关闭。操作时关闭。保持灯管清

40、洁保持灯管清洁 注意有效使用期限注意有效使用期限6/2/2022以及无菌操作室以及无菌操作室（四）微波灭菌法：利用频率在300MHz到300kMHz之间的电磁波进行灭菌的方法。应用：因热的产生来自被加热物体的内部物体的内部，故具有升温升温快速、高效、均匀快速、高效、均匀的特点。适用水性药液的灭菌，对含少量水分少量水分的药材饮片及固体制剂也有灭菌作用。条件：频率范围：300MHz300kMHz灭菌时间：36min。被灭菌物体必须含水，被灭菌物体必须含水，含水量越多灭菌效果越好含水量越多灭菌效果越好。（五）辐射灭菌法：是利用-射线射线或-射线射线进行照射，穿透物品杀灭微生物而达到灭菌目的的方法。特

41、点：不升高灭菌产品的温度，穿透性强。适不升高灭菌产品的温度，穿透性强。适用于较厚样品，特别是已包装密封物品的灭菌，用于较厚样品，特别是已包装密封物品的灭菌，灭菌效果可靠，并可有效地防止灭菌效果可靠，并可有效地防止“二次污染二次污染”。缺点：设备费用高，有些药物灭菌后疗效可能设备费用高，有些药物灭菌后疗效可能降低，同时还要注意安全防护问题。降低，同时还要注意安全防护问题。( (六六) )滤过除菌法：利用物理阻流的作用，通滤过除菌法：利用物理阻流的作用，通过无菌的特定滤器去除介质中活的和死的微过无菌的特定滤器去除介质中活的和死的微生物的方法。主要用于不耐热的低黏度药物生物的方法。主要用于不耐热的低

42、黏度药物溶液和相关气体物质的洁净除菌处理。溶液和相关气体物质的洁净除菌处理。原理：繁殖期微生物大小约为1m，芽胞大小约0.5m或者更小。直径直径m m长度长度m m直径直径m m长度长度m m大肠杆菌大肠杆菌0.40.4- -0.70.71.01.0- -3.03.0普通变形杆菌普通变形杆菌0.50.5- -1.01.01.01.0- -3.03.0枯草杆菌枯草杆菌0.50.5- -0.80.81.61.6- -4.04.0枯草杆菌芽孢枯草杆菌芽孢0.50.5- -1.01.00.90.9- -1.61.6绿脓杆菌绿脓杆菌0.30.3- -1.01.01.01.0- -2.02.0痢疾杆菌痢疾

43、杆菌0.50.5- -1.01.02.02.0- -3.03.0肺炎杆菌肺炎杆菌0.50.5- -1.651.651.01.0- -2.02.0金葡菌金葡菌0.80.8- -1.01.0 2.0 2.0- -3.03.0所选滤材由多种材料制成，这些材料上均具有网状微孔结构，主要通过毛细管阻留毛细管阻留、筛孔阻留筛孔阻留和静电吸附静电吸附三种主要方式综合起来发挥作用。分类：常用的滤器为 微孔薄膜滤器微孔薄膜滤器 垂熔玻璃滤器垂熔玻璃滤器 砂滤棒砂滤棒（一）微孔薄膜滤器：是目前应用最广泛的滤过除菌器，一般应选用0.22m以下孔径的滤膜作滤材。6/2/2022砂芯抽滤装置砂芯抽滤装置（二）垂熔玻璃滤

44、器：垂熔玻璃化学性质稳（二）垂熔玻璃滤器：垂熔玻璃化学性质稳定，不受药液影响也不影响药液定，不受药液影响也不影响药液pHpH值，制剂值，制剂生产中常用于滤除杂质和细菌。生产中常用于滤除杂质和细菌。 垂熔玻璃滤器的滤板孔径有多种规格，垂熔玻璃滤器的滤板孔径有多种规格，上海玻璃厂的上海玻璃厂的6 6号号( (孔径孔径2m2m以下以下) )、长春玻璃、长春玻璃总厂的总厂的G G6 6号号( (孔径孔径1.5m1.5m以下以下) )和天津滤器厂和天津滤器厂的的IGIG6 6号号( (孔径孔径2m2m以下以下) )三种规格滤板制成的三种规格滤板制成的垂熔玻璃滤器可以作为滤过除菌器使用。垂熔玻璃滤器可以作

45、为滤过除菌器使用。（三）砂滤棒：目前在生产中已很少用于除（三）砂滤棒：目前在生产中已很少用于除菌目的，主要作为注射剂生产的预滤器。菌目的，主要作为注射剂生产的预滤器。6/2/20226/2/2022三、化学灭菌法三、化学灭菌法：化学灭菌法是使用化学药品杀灭微生物，达到灭菌目的的方法。注意杀菌剂(消毒剂)与抑菌剂（防腐剂）之间有时没有严格界限，同一种化学药品在低浓度时呈现抑菌作用，而在高浓度时则能起杀菌作用。化学灭菌法一般包括化学气体灭菌法化学气体灭菌法 和 消毒剂消毒法消毒剂消毒法。化学药品杀菌或抑菌的机制：使病原体蛋白质变性，发生沉淀；使病原体蛋白质变性，发生沉淀；与细菌的酶系统结合，影响其

46、代谢功能；与细菌的酶系统结合，影响其代谢功能；降低细菌的表面张力，增加菌体胞浆膜的通透降低细菌的表面张力，增加菌体胞浆膜的通透性，使细胞破裂或溶解。性，使细胞破裂或溶解。（一）化学气体灭菌法（一）化学气体灭菌法： 气体灭菌指用化学药品的气体或蒸气对所需灭菌的药品或物料进行灭菌的方法。适用于不能不能采用加热灭菌采用加热灭菌和滤过除菌滤过除菌的固体药物或辅助材料的灭菌。6/2/20221 1、环氧乙烷灭菌法：环氧乙烷分子杀、环氧乙烷灭菌法：环氧乙烷分子杀菌力强，可杀死细菌的菌力强，可杀死细菌的繁殖体和芽胞繁殖体和芽胞。易穿透塑料、粉末等固体物质，可用于易穿透塑料、粉末等固体物质，可用于不耐热的散剂

47、等固体药料及其他固体器不耐热的散剂等固体药料及其他固体器具的灭菌。但含氯物品及能吸附环氧乙具的灭菌。但含氯物品及能吸附环氧乙烷的物品不宜采用本法灭菌。烷的物品不宜采用本法灭菌。另外环氧乙烷易燃另外环氧乙烷易燃3%3%浓度浓度爆炸，对人的皮肤、爆炸，对人的皮肤、眼粘膜有损害，应用时要眼粘膜有损害，应用时要小心。小心。6/2/20226/2/2022塑料塑料橡胶橡胶纸板纸板6/2/20222 2、甲醛蒸气熏蒸灭菌法：、甲醛蒸气熏蒸灭菌法：比环氧乙烷杀菌力强，但穿透力差，只能用于比环氧乙烷杀菌力强，但穿透力差，只能用于空气灭菌。一般用于药厂操作室的灭菌。空气灭菌。一般用于药厂操作室的灭菌。3 3、其

48、他蒸气熏蒸灭菌法：、其他蒸气熏蒸灭菌法：丙二醇、三甘醇、过氧醋酸、丙二醇、三甘醇、过氧醋酸、-丙内酯等，丙内酯等，可用于操作室的灭菌。可用于操作室的灭菌。 消毒：指杀死物体上病原微生物的方法。消毒：指杀死物体上病原微生物的方法。消毒剂：以化学药品配成有效浓度的液体，采用消毒剂：以化学药品配成有效浓度的液体，采用喷雾、涂抹、浸泡等方法达到消毒目的。喷雾、涂抹、浸泡等方法达到消毒目的。特点：能够杀死细菌繁殖体，减少微生物数量，特点：能够杀死细菌繁殖体，减少微生物数量，但不能杀死芽孢；浓度过高会产生一定的腐蚀作但不能杀死芽孢；浓度过高会产生一定的腐蚀作用。适用物料、地面、墙面、器具、皮肤。用。适用物

49、料、地面、墙面、器具、皮肤。（二）浸泡与表面消毒法：（二）浸泡与表面消毒法：6/2/2022常用消毒剂：包括醇类、酚类、包括醇类、酚类、表面活表面活性剂性剂、氧化剂等、氧化剂等，常用的有，常用的有75%75%的乙醇、的乙醇、0.1%0.1%0.2%0.2%新洁尔灭溶液、新洁尔灭溶液、3%3%5%5%煤酚煤酚皂溶液等皂溶液等。特点：消毒剂大多只能杀死微生物的繁消毒剂大多只能杀死微生物的繁殖体而对芽胞无效。用于物体表面灭菌，殖体而对芽胞无效。用于物体表面灭菌，可减少微生物数量。可减少微生物数量。6/2/2022消毒，杀菌，清洁，增溶消毒，杀菌，清洁，增溶洗洁精的去污原理？洗洁精的去污原理？6/2/

50、2022 指指在药品生产的某几个或全过程控制在无在药品生产的某几个或全过程控制在无菌条件下进行操作的方法。应用较多的是注射菌条件下进行操作的方法。应用较多的是注射剂、滴眼剂、输液剂等。剂、滴眼剂、输液剂等。1 1、无菌操作室的灭菌：、无菌操作室的灭菌：无菌操作室的空气应无菌操作室的空气应定期灭菌，常用甲醛、丙二醇等蒸气熏蒸。用定期灭菌，常用甲醛、丙二醇等蒸气熏蒸。用具、墙面等均需用消毒剂消毒。具、墙面等均需用消毒剂消毒。2 2、无菌操作：操作人员衣、鞋、帽、手等均无菌操作：操作人员衣、鞋、帽、手等均需消毒并严格按操作规范生产。需消毒并严格按操作规范生产。二、无菌操作法二、无菌操作法6/2/20

51、22缓冲室紫外杀菌6/2/20226/2/2022四、无菌操作法四、无菌操作法 指药剂生产的整个过程均控制在指药剂生产的整个过程均控制在无条件下进行的一种操作方法。无条件下进行的一种操作方法。目的目的: : 防止药品在操作过程中污染防止药品在操作过程中污染. . ( (一一) )、无菌操作室的灭菌：、无菌操作室的灭菌：1.1. 气体灭菌，工作前开启紫外灯气体灭菌，工作前开启紫外灯2.2. 采用空气层流洁净空气净化采用空气层流洁净空气净化; ;3.3. 室内空间、用具、地面、墙壁消毒剂室内空间、用具、地面、墙壁消毒剂擦拭擦拭 。 6/2/2022（二）、无菌操作（二）、无菌操作无菌操作室外布局：

52、无菌操作室外布局：准备室准备室浴室浴室更衣室更衣室缓冲间缓冲间传送传送柜柜无菌室无菌室1. 1. 人员要求：洗澡人员要求：洗澡灭菌工作服、鞋灭菌工作服、鞋帽帽进无菌室；进无菌室；2. 2. 用具要求用具要求: : 干热灭菌干热灭菌 或热压灭菌；或热压灭菌；( (三三) )、无菌操作柜、无菌操作柜、小型或联合无菌操小型或联合无菌操作柜作柜6/2/2022无菌检查法无菌检查法目的目的: : 无菌制备的药物需经无菌检验，无菌制备的药物需经无菌检验，以证实是否有活微生物存在。以证实是否有活微生物存在。1. 1. 无菌检查法：无菌检查法： 按按中国药典中国药典附录附录中中“无菌检查法无菌检查法”项下项下 : :l 试管接种法试管接种法l 薄膜过滤法：细菌在滤膜上集中，薄膜过滤法：细菌在滤膜上集中，直接接种于培养基中又可直接在显微直接接种于培养基中又可直接在显微镜下观察。镜下观察。l检验合格方可应用。检验合格方可应用。 知识 回顾 层流型洁净净化技术包括哪些类型？ 什么是芽孢？ 物理灭菌法包括哪些类型？ 滤过除菌法有哪些？ 干热空气灭菌法有什么特点？ 哪个波长的紫外线除菌能力最强？6/2/20226/2/2022三、防腐法意义：使药剂免受微生物污