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1、离子交换层析的基本原理离子交换层析的基本原理离子交换介质分类离子交换介质分类离子交换层析的基本操作离子交换层析的基本操作离子交换层析的应用离子交换层析的应用 离子交换层析(IEC)是以离子交换剂为固定相,以含特定离子的溶液为流动相,利用离子交换剂上的可交换离子与溶液中离子发生交换作用,由于不同的溶质离子与离子交换剂上离子化的基团的亲和力和结合条件不同,洗脱液流过时,样品中的离子按结合力的弱强先后洗脱,而将混合物中不同离子进行分离的技术。 离子交换剂亦称离子交换介质,为离子交换层析的的固定相。:一:聚苯乙烯型离子交换树脂。树脂骨架的多孔弹性颗粒.二:多糖类骨架的离子交换树脂。如:离子离子 交换纤
2、维素(交换纤维素(DEAE-纤维素、纤维素、CM-纤维素)纤维素)离子交换葡聚糖离子交换葡聚糖阳离子交换剂阳离子交换剂 强酸型和弱酸型强酸型和弱酸型 磺酸基(-SO3H) 磷酸基(-PO3H2) 羧酸基(-COOH) 酚羟基(-OH) 阴离子交换剂阴离子交换剂强碱型和弱碱型强碱型和弱碱型 伯胺基(-NH2) 仲胺基(-NHCH3 ) 叔胺基(-N(CH3)2) 季胺基(-N+(CH3) 3 )交换树脂的选择交换树脂的选择酸性物质用阴离子交换剂分离碱性物质用阳离子交换剂分离 树脂预处理树脂预处理去除杂质与细小颗粒:保证有较好的均匀度3.平衡平衡:稀酸或稀碱处理,使交换剂带上需要的平衡离稀酸或稀碱
3、处理,使交换剂带上需要的平衡离子。子。使使之成为带之成为带H+或或OH-,至所需的,至所需的pH和离子强和离子强度。度。4.装柱装柱:使用前要排除气泡。使用前要排除气泡。加样与洗脱加样与洗脱(1)样品应与起始缓冲液有相同的样品应与起始缓冲液有相同的PH和离子强度和离子强度(2)可通过改变溶液的可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方或改变离子强度的方 法将结合物洗脱法将结合物洗脱 最好的洗脱方法是最好的洗脱方法是连续梯度洗连续梯度洗脱 6.洗脱液的收集洗脱液的收集 7.离子交换剂的再生与保存离子交换剂的再生与保存 (1)再生剂常用HCl、NaCl、NaOH、乙醇等。 (2)保存离子交换剂时要加防腐剂,如:氯已定(洗必泰),乙基硫柳汞(0.005),0.02叠氮钠产品的浓缩、脱盐产品的浓缩、脱盐 离子交换层析得到的样
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