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1、会计学1植物组织培养的基本原理植物组织培养的基本原理一、植物细胞全能性(Totipotency) 1、植物细胞全能性:1902年由Haberlandt提出,即植物体细胞在适当的条件下,具有不断分裂和繁殖、发育成完整植株的能力。 20世纪80年代,认为每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息,在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息,分化出植物有机体所有不同类型细胞,形成不同类型的器官甚至胚状体,直至形成完整再生植株。 植物细胞全能性的证明是通过1958年Steward等胡萝卜根段细胞体胚发生试验及1964年Guha等进行的曼陀罗花药培养。从一个细胞发育成一个植株2、全能性表达:少数体细胞在发育过
2、程中可能丢失或增加一部分遗传物质,因而失去全能性。如筛管细胞,它在发育过程中失去细胞核,因而没有全能性。 由于目前还无法使所有的离体植物细胞都实现其全能性。多数情况下只是分生组织等的细胞能实现。 离体材料在一定条件下仍将按原有的动态平衡关系进行生命活动,表现其全能性。 决定(Determination):植物体是由各个层次或小系统如基因水平、细胞水平、器官水平构成的生命大系统,系统内和系统间协调运行不仅是维持植物生长的先决条件,而且它们的动态平衡关系还制约着其发育进程。 全能性表达条件之一:细胞的孤立是诱发全能性表达的重要因素。 脱分化(Dedifferentiation):已分化的植物细胞要
3、表达全能性,必需先脱分化,使细胞恢复到胚性阶段。 生长素尤其是2,4-对脱分化具有重要作用。 2,4-浓度高时,诱发不均等分裂;而浓度低时,只诱发均等分裂。一旦发生不均等分裂,细胞就对生长素失去敏感性,在无生长素的条件下能自发形成体细胞胚。l全能相对性的启发在离体培养的选材上,尽可能选取分生组织的部位。l将实验目的与外植体生长发育状态(“决定”状态)相结合,创造良好的离体条件。l合理使用生长调节物质。新种的特征带SSR 谱带变异在DNA水平复制上的差异颖果作外植体. 愈伤组织分化芽一、脱分化(Dedifferentiation) 1、概念: 也称去分化,指离体条件下生长细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或不分化细胞的过程。 如叶柄基部的薄壁细胞成为离层细胞;伤害导致局部细胞形成愈伤组织。黄瓜子房组织经脱分化形成胚性愈伤组织不同部位产生不同脱分化效果 2、影响细胞再分化因素: 从理论上讲,在离体培养条件下经过再分化可获 得各种类型的细胞、组织、器官以及再生植株。但是目前,还不能使所有植物的活细胞都再生植株。主要原因是: (1)不同植物种类再分化的能力差异较大; (2)对某些植物再生条件还没有完全掌握。C白色紧实型愈伤组织;D黄白色松软型愈伤
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