超低温冷冻保存种质

1、精选ppt第十章第十章 植物种质的超低温保存植物种质的超低温保存精选ppt种质保存种质保存 是指利用天然或人工创造的适宜环是指利用天然或人工创造的适宜环境保存种质资源，使个体中所含有境保存种质资源，使个体中所含有的遗传物质保持其完整性，有高的的遗传物质保持其完整性，有高的活力，能通过繁殖将其遗传特性传活力，能通过繁殖将其遗传特性传递下去。递下去。精选ppt按保存类型分类按保存类型分类 按保存类型分类按保存类型分类可分为两种类型可分为两种类型非原生境保存非原生境保存 原生境保存原生境保存精选ppt亚马逊热带雨林亚马逊热带雨林精选ppt精选ppt精选ppt精选ppt离体保存离体保存种植保存种植保存

2、种子保存种子保存超低温冷冻保存超低温冷冻保存常用的种质保存方法常用的种质保存方法精选ppt抑抑制制外外植植体体生生长长n降降低低环环境境中中的的氧氧含含量：量：低低气气压压处处理、理、低低氧氧分分压压处处理理n使使用用生生长长延延缓缓剂：剂：多多效效唑、唑、矮矮壮壮素素n其其他他方方法：法：精选ppt种子保存种子保存 优点：优点：占用空间少，保存期较长，易干占用空间少，保存期较长，易干燥，易包装和运输。燥，易包装和运输。 缺点：缺点：不适用于无性繁殖的植物种类，不适用于无性繁殖的植物种类，随着时间的延长，种子的生活力逐渐下随着时间的延长，种子的生活力逐渐下降，同时易受到病虫害的侵袭。降，同时易

3、受到病虫害的侵袭。精选ppt种植保存种植保存w自然保护区，植物园，森林公园自然保护区，植物园，森林公园w缺点：缺点：占地多，需要大量的人力物力，占地多，需要大量的人力物力，费用高，易受到自然灾害的影响费用高，易受到自然灾害的影响精选ppt离体保存离体保存w优点：优点：占用空间少，无病虫害以及自然灾害占用空间少，无病虫害以及自然灾害的影响，不受季节限制。短时间可实现大量的影响，不受季节限制。短时间可实现大量植物的增殖，无病毒。植物的增殖，无病毒。w缺点：缺点：连续不断的继代培养可能会引起染色连续不断的继代培养可能会引起染色体和基因型的变异。体和基因型的变异。精选ppt精选ppt超低温冰箱超低温冰

4、箱精选ppt离体植物材料的超低温冰冻保存技术离体植物材料的超低温冰冻保存技术植物材料的选取植物材料的选取材料的预处理材料的预处理冰冻保护剂预处理冰冻保护剂预处理降温冷冻操作降温冷冻操作化冻操作化冻操作化冻材料的活力检测化冻材料的活力检测精选ppt材材料料材材料料l愈愈伤伤组组织、织、悬悬浮浮细细胞、胞、原原生生质质体体l花花粉粉和和花花粉粉胚胚l茎茎尖、尖、胚、胚、幼幼龄龄植植株株精选pptv材料的低温材料的低温预处理预处理v材料的预培养材料的预培养精选ppt精选ppt 所使用的冷冻保护剂所使用的冷冻保护剂应具有以下特性：应具有以下特性： 分子质量较小分子质量较小 易于与溶剂混合易于与溶剂混合

5、 快速渗入细胞快速渗入细胞 无毒或毒性小无毒或毒性小 易洗脱易洗脱 常用的是常用的是DMSO。精选ppt保保护护剂剂培培养养基基里，里，或或者者是是溶溶解解在在有有糖糖或或无无糖糖的的水水中。中。n保保护护剂剂应应当当缓缓慢慢加加入。入。n使使用用复复合合冰冰冻冻保保护护剂剂比比单单独独使使用用更更为为有有效。效。精选ppt降降温温冰冰法法n干干燥燥冷冷冻冻法法n包包埋埋脱脱水水法法n玻玻璃璃化化法法精选ppt1、快速冷冻法、快速冷冻法 指将植物材料从指将植物材料从0或者其他预处理温度直接或者其他预处理温度直接投入液氮中保存的方法，降温速度投入液氮中保存的方法，降温速度1000/min。 2、

6、慢速冷冻法、慢速冷冻法将处于将处于0或其他预处理温度的材料以或其他预处理温度的材料以12/min的降温速度从起始温度降到的降温速度从起始温度降到-100，稳定稳定1h后，投入到液氮保存或以此降温速度连后，投入到液氮保存或以此降温速度连续降温至续降温至-196的方法。的方法。 精选pptc、预冷冻法、预冷冻法 指将植物保存材料放入液氮前，需经过短指将植物保存材料放入液氮前，需经过短暂时间的低温锻炼的方法。暂时间的低温锻炼的方法。d、干燥冷冻法、干燥冷冻法 将材料置于将材料置于2729烘箱内降低植物含水烘箱内降低植物含水量，再投入液氮中保存的方法。量，再投入液氮中保存的方法。 精选ppt( (e包

7、埋冻存法包埋冻存法精选ppt精选ppt化冻操作化冻操作wa、快速解冻法、快速解冻法w指将液氮中保存的材料直接投入到指将液氮中保存的材料直接投入到3740温水浴中进行解冻的方法。解冻的升温速度温水浴中进行解冻的方法。解冻的升温速度为为500750/min。wb、慢速解冻法、慢速解冻法w将液氮中保存的材料先置于将液氮中保存的材料先置于0低温下解冻，低温下解冻，再逐渐升至室温下进行解冻的方法。再逐渐升至室温下进行解冻的方法。精选ppt化冻材料的活力检测化冻材料的活力检测 检验化冻后材料的生活力和存活率的最检验化冻后材料的生活力和存活率的最根本方法是再培养。根本方法是再培养。 FDAFDA、TTCTT

8、C等染色的方法进行快速检测，等染色的方法进行快速检测，只能作为生活力的预测指标只能作为生活力的预测指标精选ppt精选ppt 超低温保存技术的发展超低温保存技术的发展精选ppt超低温保存种质技术的应用前景超低温保存种质技术的应用前景 悬浮细胞和愈伤组织的保存悬浮细胞和愈伤组织的保存 生长点冷冻保存生长点冷冻保存 胚状体（体细胞胚、花粉胚）冷冻保存胚状体（体细胞胚、花粉胚）冷冻保存 原生质体冷冻保存原生质体冷冻保存精选ppt小结小结w生物细胞的低温冻存是防止生物种质灭绝的生物细胞的低温冻存是防止生物种质灭绝的重要途径重要途径w低温冻存技术的应用取决于冻存技术和在培低温冻存技术的应用取决于冻存技术和在培养技术的成熟程度养技术的成熟程度w根据细胞类型选择冻存和解冻方法是再培养根据细胞类型选择冻存和解