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文档简介
1、编辑课件生物梅里埃生物梅里埃真菌培养、鉴定及药敏真菌培养、鉴定及药敏全面解决方案全面解决方案生物梅里埃华东区技术支持生物梅里埃华东区技术支持 李峰李峰深部真菌感染 深部真菌感染是一种重症感染,死亡率为40-90% 真菌病的发病率呈上升趋势,尤其对重症监护病房和免疫缺陷患者、以及癌症患者, 8%的院内感染由真菌引起 白色假丝酵母、热带假丝酵母、光滑假丝酵母、隐球菌等是最常见的感染病原菌 真菌感染的早期诊断、尽早开始治疗,是挽救患者生命的最重要的手段真菌培养及鉴定药敏的全面解决方案最快可实现48 小时内从接种到药敏结果报告标本采集如FA血培养COPAN采集的阴道拭子标本直接镜检分离培养+鉴定Chr
2、omID Candida , 37c,24-48小时粉色菌落白色菌落鉴定Vitek 2 YST约15小时ATB ID 32C30C 24-48小时API 20C AUX30C, 24-48小时API Candida37C 24-48小时兰色菌落白色假丝酵母药敏ATB FUNGUS 335C 24-48小时Vitek YBC30C 24-48小时Vitek 2 AST-YS01约14-22小时编辑课件ChromID Candida酵母菌产色鉴定培养基此培养基含有: 提供酵母菌生长的营养物质 抑制细菌生长的抗菌物质 用于检测标本中特定真菌的特异性酶的产色底物ChromID Candida Chro
3、mID Candida 与传统培养基相比: 更易监测到标本中感染相关菌种 对白色假丝酵母直接鉴定,无需再次确认 对热带假丝酵母、葡萄牙假丝酵母及乳酒假丝酵母做初步鉴定 比传统培养基更快得到鉴定结果白色假丝酵母白色假丝酵母被氨基己糖苷酶产色底物特异水解,显现兰色热带/葡萄牙/乳酒假丝酵母配方中另一种底物水解,初步区分某些特定酵母菌种,显现粉色其他酵母菌其他酵母菌呈白色ChromID Candida对手工及自动鉴定系统均无影响与传统沙保弱培养基(SGC)相比,ChromID Candida 对API 20C、ID 32C、VITEK YBC、VITEK 2 ID-YST的鉴定结果无影响。Poste
4、r, RICAI,2003注:1.准确鉴定; 2.低水平鉴定; 3.未做出鉴定; 4.不正确鉴定ChromID Candida对ATB FUNGUS3药敏测定结果无影响无论肉眼判读与机器判读,在+/-一个滴度范围内,结果与标准MIC值100%一致,故Candida 对药敏结果判读无影响。Poster, RICAI,20030 01 12 23 34 45 56 67 78 89 91010-3-3-2-2-1-10 01 12 23 3330 01 12 23 34 45 56 67 78 89 91010-3-3-2-2-1-10 01 12 23 3335-氟胞嘧啶5-氟胞嘧啶两性霉素B两
5、性霉素B氟康唑氟康唑异曲康唑异曲康唑肉眼判读结果机器自动判读结果菌 株 数滴度差异范围滴度差异范围真菌药敏真菌药敏 简便如简便如ATB FUNGUS 3Ref 14204真菌鉴定及药敏的意义近年,真菌感染的显著增加与某些治疗习惯及疾病密切相关,包括: 更多地使用免疫抑制性药物更频繁地应用广谱抗菌药物更普遍地使用静脉留置设备慢性免疫抑制性病毒感染的出现,比如AIDS这些因素使从未出现过的某些机会性感染发生,导致了更高的感染率,并与高致病率与病死率相关。同时,抗真菌药物的耐药率也显著上升,使治疗选择更为复杂。由于深部真菌感染的有效治疗选择有限,使得利用真菌耐药监测来观察耐药发展趋势及警示是否要拓展
6、抗真菌药物谱显得尤为重要血液血液骨髓骨髓中枢神中枢神经系统经系统眼眼呼吸系统呼吸系统皮肤和皮肤和 黏膜黏膜全身全身尿液尿液假丝酵母菌假丝酵母菌X XX XX XX XX XX XX X新型隐球菌新型隐球菌X XX XX XX XX XX XX XX X霉菌霉菌X XX XX XX XX XX X双相型真菌双相型真菌X XX XX XX XX XX XX X多组织系统均存在真菌源性感染Source:E. Musial, et al, Clinical Microbiology Reviews, Oct 1988, Vol 1 No. 4, p. 349-346真菌检测的适用对象最需要实施真菌检测
7、的, 主要是免疫力下降的患者: 肿瘤患者 (肿瘤医院或肿瘤科、血液科) 艾滋病患者 (关爱医院) 老年患者 (高干病区) 器官移植患者 长时间大剂量注射抗菌药物的患者(ICU、感染科、呼吸科、术后感染治疗)其他需要开展真菌检测的单位/科室 皮肤科/皮防所/性防所 等 口腔科 泌尿科 妇科快速抗真菌药敏结果提供了更确切的信息,对治疗方案起决定性作用,并有助于临床真菌感染的管理有利于节省患者医疗费用提升医院护理水平,加速病床周转率抗真菌敏感性试验的必要性ATB FUNGUS 3标准标准: 遵循EUCAST 和 CLSI标准判读方便判读方便: 可肉眼判读,也可ATB自动判读全面全面: 涵盖抗真菌感染
8、治疗常用药物药物药物mg/l5 FC5-氟胞嘧啶4, 16AMB两性霉素 B0.5, 1, 2, 4, 8, 16FCA氟康唑1, 2, 4, 8, 16, 32, 64, 128ITR伊曲康唑0.125, 0.25, 0.5, 1, 2, 4VRC伏立康唑0.0625, 0.125, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8ATB FUNGUS 3与ATB FUNGUS 2的区别 伏立康唑: 新增抗真菌药物,含 8 个 MIC浓度5-氟胞嘧啶: 减少了 MIC值 保留折点浓度,可报 S/I/R 结果氟康唑: 保留 8 个 MIC浓度,减少 0.25mg/l 和 0.5mg/l两性霉素 B
9、and 伊曲康唑: 未做改动,含 6 个 MIC浓度ATB FUNGUS 3 试条的接种 API 0.85%氯化钠培养基氯化钠培养基 API 悬浮液培养基悬浮液培养基2 McF24-48 小时小时 : 假丝酵母菌属假丝酵母菌属48小时小时 : 新型隐球菌新型隐球菌 35 +/- 2C20lATB F2 培养基培养基如何判读 ATB FUNGUS 3与对照孔相比,观察每个孔的生长情况 = 给每孔打分 黑色背景下确认得分在测试孔周边的生长迹象应判为 0 或 1 但 对两性霉素B 应判为 1 判分标准得分和生长对照完全一样4比生长对照有轻微减少3比生长对照有明显减少2非常微弱的生长1无生长0结果自动
10、判读: 结果以 MIC 和 S/I/R 显示 ATB NEW软件可自动进行判读 英文软件需升级至INT0 05 或 G0L0 05 expert肉眼判读: 请参考包装说明书中提供的折点判读 两性霉素B 的结果两性霉素 B:MICMIC值为得分为值为得分为“0 0”的最小浓度的最小浓度0.5 1 2 4 8 16AMB得分得分 = 0 : MIC 0.5氟康唑, 伊曲康唑, 伏立康唑 : MICMIC值为得分为值为得分为“2, 1 2, 1 或或 0 0”的最小浓度的最小浓度1 2 4 8得分得分 = 1 : MIC = 16 32 64 128FCA判读 唑类 结果结果只有结果只有 S/I/R
11、生长得分结果判读分类cCcC0/1/20/1/2-S (敏感)3/40/1/2+-I (中介)3/43/4+R (耐药)5FC16 4结果结果 = I判读 5-氟胞嘧啶 结果对 假丝酵母菌属 的结果解释SIR 5-氟胞嘧啶 48-16 32 两性霉素 B未定义未定义未定义 氟康唑 816- 32 64 伊曲康唑 0.1250.25 0.5 1 伏立康唑 12 4CLSI 折点折点:SIR 5-氟胞嘧啶 48-16 32 两性霉素 B未定义未定义未定义 氟康唑 48 16 伊曲康唑未定义未定义未定义 伏立康唑未定义未定义未定义目前没有官方推荐,文献提供如下信息目前没有官方推荐,文献提供如下信息对
12、 新型隐球菌 的结果解释判读难点拖尾生长在唑类药物孔中的微弱生长 (得分 = 1 或 2) 导致对 MIC值高估可能被误判为耐药Control例如: 在如下所有氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑 孔中都有拖尾生长 1 2 4 8 0.125 0.25 0.5 0.06 0.125 0.25 0.5 16 32 64 128 1 2 4 1 2 4 8FCA ITR VRCMIC 1MIC 0.125MIC 0.06边缘生长AMB: 应得分 1FCA, ITR 或 VRC: 应得分 0 或 1例如: 孔 0.5 和 1 = 得分=10.5 1 2 4 8 16AMB得分得分 =0 : MIC = 2判读
13、难点结果及时: 24小时获得 假丝酵母菌属 结果48小时获得 新型隐球菌 结果即用 + 易用标准化微量稀释法,复现性好遵循 CLSI 和 EUCAST 推荐方法能很好检测获得性耐药两种判读方法可灵活选择:肉眼 或 机读ATB FUNGUS 3真菌培养及鉴定药敏的全面解决方案最快可实现48 小时内从接种到药敏结果报告标本采集如FA血培养COPAN采集的阴道拭子标本直接镜检分离培养+鉴定Candida ID2, 37c,24-48小时粉色菌落白色菌落鉴定Vitek 2 YST约15小时ATB ID 32C30C 24-48小时API 20C AUX30C, 24-48小时API Candida37C 24-48小时兰色菌落白色假丝酵母药敏ATB FUNGUS 335C 24-48小时Vitek YBC30C 24-48小时Vitek 2 AST-YS01约14-22小时相关产品信息 标本采集: 血培养: BacT/ALERT FA 中和抗生素需氧培养瓶 Ref.259791 COPAN拭子: 尿道用 Ref. 501CS01; 阴道用 Ref. 509CS01, 511CS01 培养: 产色鉴定培养基: chromID Candida Ref. 43631, 43639 普通真菌培养:沙保弱庆大霉素氯霉素平板 Ref. 43171 鉴
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