CA1500操作要点及操作经验介绍

1、CA1500操作要点及经验介绍 周炳烨01概述Part One概述f1.使用目的：全自动血凝分析仪CA-1500用于凝血、抗凝和纤溶系统功能的检测，为出血性和血栓性疾病的诊断与鉴别诊断、溶栓及抗凝治疗的监测与疗效观察提供有价值的指标。f2.检测原理：凝固法、发色底物法和免疫分析法。概述f2.1.凝固法（散射比浊法加百分比终点法）f2.1.1散射比浊法CA-1500采用光学检测法，将血浆凝固过程中的浊度变化转变为散射光的变化后，通过光电二极管将光信号转变为电信号，处理器据此绘制出凝固曲线，用百分比检测法来确定凝固时间。 光源为发出660nm的卤素灯， 散射光信号为900直角方向 的散射光。概述f

2、2.1.2 百分比检测法：仪器把加入试剂后最初的散射光量设为0%，把反应结束后不再变化的散射光量设为100%。将与50%散射光量相对应的时间作为凝固终点报告，因为50%的部位单位时间内散射光量的变化最为显著，纤维蛋白单体的聚合速度最快。这种方法称为“百分比终点法”。f2.2 发色底物法酶化学比色法：显色物质（对硝基联苯胺 PNA）+底物+酶检测物或酶活性相关检测物。CA-1500透射光源只有405nm、575nm和800nm三种滤光片。概述f2.3 免疫分析法免疫透射比浊法：抗体包被大小均一、直径15-60nm的乳胶颗粒，包被后的抗体与相应抗原结合后形成复合物体积增大，引起透射光的变化，由吸光

3、度的变化推算出所检测物质的含量。光源同上。f3.检测参数f3.1 凝固法：PTAPTTFbgTT，外源性凝血因子（2、5、7、10），内源性凝血因子（8、9、11、12）等。f3.2 发色底物法：ATIII、2PI、Plg、PC等。f3.3 免疫分析法：D二聚体，P-FDP,vWF。概述f4.检测性能 PT: CV2% APTT: CV2% Fbg： CV4% TT: CV10% PC： CV10% DD等其它： CV5%02CA1500血凝仪日常操作流程Part TwoCA1500血凝仪日常操作流程一、开机：按下机器右边的POWER按钮 开机后机器进行自检，当屏幕右上角显示“Ready:”时

4、 可以进行试验二、洗针：在主屏幕上选Rinse Probe 键，然后按Execute进 行洗针三、检查消耗品：f1、准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量，不足时，需及时添加。（一次性最多可放300个杯子）f2、准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把每一项的试剂准备好，放到仪器内相应位置（主菜单下选择Set reagent），注意查看试剂的量和有效期。例如：Clean放在RINSE的位置。f3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶CA1500血凝仪日常操作流程四、准备标本：将样本离心好，放入样本架，再将样本架放到仪器进样器上。样本离心要求 3000转15分钟五、输入检测项目：主菜单上的按下W

5、ork List键，进入工作菜单。 f输入项目，直接点击相应的实验项目键。如：按下PT键菜单由“”变为“ ”（其他项目输入方法相同）。f重复：按屏幕下菜单的Repeat键，在屏幕弹出的键盘上输入相应测试数，仪器会自动重复与光标所在位置相同的测试信息。屏幕右侧的光标移动键，（按NEXT或Pre表示翻到下一个界面，按“”表示向上移动光标，“ 或 ”显示下一个界面试验项目）f输入样本号： 按屏幕下菜单的ID No.Entry按顺序输入样本的序号或病人的病历号。f开始检测：录入完所有测试信息，按下屏幕右上角STAR键，开始检测f查看结果：返回到主屏幕，检测的项目如果由“”变为“”表明此试验已经完成。f

6、按下Stored Date（储存结果）键，出现已存储结果界面，屏幕显示已完成的测试的信息。如果查看反应曲线，按下边菜单第一项Graph查看凝集趋势、吸光度、错误信息等。CA1500血凝仪日常操作流程六、洗针： 当做完一批标本以后，需要洗针，按下“Rinse Probe” 然后按下“Execute”进行洗针。七、关机： 回到主屏幕下，在洗完针以后方可关机，切断电源。 每24小时应关机一段时间，因为： 1.延长光源寿命；2.提高工作速度（软件）； 3.维持负压平衡；4.仪器的清洁维护需要，等。03标准曲线的制备Part Three标准曲线的制备在PT、APTT和Fbg三个检测项目中，APTT报告结

7、果为秒数（仪器实测），不需要制备标准曲线；PT要报告PT%要报告活动度，所以需要制备标准曲线；Fbg报告结果为浓度，所以需要制备标准曲线。制备过程如下：（一）准备消耗品f1、准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量，不足时，需及时添加。（一次性最多可放300个杯子）。同时放置一清洁样本盘备用。f2、准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把每一项的试剂准备好，放到仪器内相应位置（主菜单下选择Set reagent），注意查看试剂的量和有效期。例如：Clean放在RINSE的位置。做标准曲线之前最好更换新的缓冲液和试剂。f3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶标准曲线的制备（二）制备标准曲线（每次

8、制备一项）复溶一支标准品（1ml蒸馏水，室温复溶1525min），放到样本架的第一个位置上。在主菜单下按 SettinSetting 键， 出现Analysis setting键盘，进入分析设置菜单。 按 more 键 按 Param.setting 键出现参数设置界面，并按以下设置。标准曲线的制备PT%PT%： CalcItem CalcItem Units Number Format Curve Fit Units Number Format Curve Fit Calc.Parameter 1 Calc.Parameter 1 PT% PT% % XXX.X Log Line % XXX

9、.X Log Line Calc.Parameter 2 PT R XX.XXCalc.Parameter 2 PT R XX.XX Calc.Parameter 3 PT INR Calc.Parameter 3 PT INR XX.XX ISI Input XX.XX ISI Input Fbg CFbg C： CalcItem CalcItem Units Number Format Curve FitUnits Number Format Curve FitCalc. Parameter 1 Fbg C g/l X.XXX Log Line Calc. Parameter 1 Fbg

10、C g/l X.XXX Log Line OFF Calc. Parameter 2 OFF Calc. Parameter 2 OFF Calc. Parameter 3OFF Calc. Parameter 3 标准曲线的制备定标路线图：main menu Standard Curve Select Tests Analysis Setting Calibrator 移动光标输入标准血浆含量值，仪器将按照倍比稀释方式自动稀释 Enter 返回Main Menu Work List Standard Curve 选择做标准曲线的项目 Return Start完成后：Main Menu Wor

11、k List Standard Curve 按两次Update储存fPT试剂更换批号后需要更改 ISI值fFbg试剂更换批号后需重新定标04质控样本检测Part Four质控样本检测f编辑质控文件：在仪器主菜单上按 QC键，再按下Select Group，此时会出现多个空白文件。选择任一空白文件，点击Group edit,再点击 Input，选择需要进行的质控项目和编号，例如“QC01”（01-20代表不同质控文件）。每一文件可储存三个项目。f执行质控检测：复溶一支质控品，放到样本架相应的位置。在仪器主菜单上按 Work List键，再按下ID No.Entry，在弹出的数字键盘上输入“QC0

12、1”（01-20代表不同质控文件）。选择需做质控的试验项目，按STAR键开始检测。质控完成后，到主菜单，按QC查看质控结果及图形。05常见错误报警提示及处理Part Five常见错误报警提示及处理f1、Insufficient Reagent (试剂不足，“相应试剂位号码”)-加入相应试剂f2、Insufficient Tube （反应杯不足）-加入反应杯f3、Empty Tube Trash Box （清空垃圾箱）-倾倒垃圾箱中的废反应杯f4、Light Shield Open （遮光盖打开）-关闭遮光盖f5、Reagent Probe Crash （试剂针撞针）-检查试剂瓶盖是否去掉，（或

13、调整位置）f6、No Reactive Tube （没有反应杯）-放入反应杯f7、No Sample (没有标本)-在相应位置放入标本f8、Vacuum Pump Error（真空泵错误）-调整负压f9、Waste Bottle is Full（废液瓶满了）-倒空废液瓶当仪器报警时主屏幕左上角会出现“Alarm”，按下SYSMEX，可消除报警06PT测定原理及相关知识Part SixPT测定原理及相关知识f原理：在待检血浆中加入过量的组织凝血活酶(兔脑、人脑、胎盘、肺组织等浸出液)和Ca2+ ，使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。本试验不仅反映凝血酶原水平，也是反映因子、X

14、 和纤维蛋白原在血浆中的水平，故是外源性凝血系统的筛选试验。f试剂：1. 组织凝血活酶液 常用人或兔脑粉浸出液。2. 0.025 mol/ I.氯化钙溶液。PT测定原理及相关知识f凝血酶原时间比值（PTR）的计算： PTR=待检血浆的凝血酶原时间(s)/正常参比血浆的凝血酶原时间(s)f国际敏感度指数(international sensitivity index, lSI) 及计算f1.ISI：由于不同来源、不同制备方法的组织凝血活酶对结果影响很大，造成结果的可比性差，特别影响判断口服抗凝剂的治疗效果。世界卫生组织(WHO) 提出以人脑凝血活酶67/40 批号作为标准品，并以国际敏感度指数(

15、international sensitivity index, lSI) 表示各种制剂与67/40 之间相互关系。67/40 为原始参考品，定lSI 为1. 0 。因此各种制剂必须标以lSI 值。f2.患者INR = PTRISI PT测定原理及相关知识参考区间f1. PT 值 男性10-13.7s，女性10 - 14. 3s，男女平均为(121)s; 待测者的测定值较正常对照值延长超过3 s以上才有临床意义。f2. 凝血酶原时间比值( PTR )0. 82 - 1. 15 s (1. 00士0.05) S。f3. INR 依ISI不同而异。PT测定原理及相关知识注意事项：1.采血后宜在1 h内完成，置4 冰箱保存不成超过4 h，-20下可置2周，-70下可放置6 个月。2. 水浴稳定控制在(37 士1)，过高或过低均会影响结果。3. 抽血要顺利，抗凝要充分，决不可有凝血块，这将影响凝血酶原时间的准确性。4. 市场上供应的组织凝血活酶制剂应注明ISI值，选用lSI 2.0的组织凝血活酶为宜。5. 在红细胞比容(Hct) 55%时，