血培养注意事项

1、会计学1血培养注意事项血培养注意事项感染形势严峻感染形势严峻 感染性疾病并没有像人类曾经预料的那样随着抗感染化疗感染性疾病并没有像人类曾经预料的那样随着抗感染化疗时代的到来而销声匿迹。多种原因造成的时代的到来而销声匿迹。多种原因造成的易感人群增加；易感人群增加； 多重耐药菌多重耐药菌如甲氧西林耐药的金葡菌如甲氧西林耐药的金葡菌（MRSAMRSA）、产）、产ESBLESBL的的肺炎克雷伯菌和大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠杆菌、泛耐药泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌等不断涌现并持续蔓延，不动杆菌等不断涌现并持续蔓延，曲霉菌、念珠菌等曲霉菌、念珠菌等深部深部真菌越来越常见；真菌越

2、来越常见； 新发感染病原新发感染病原如如SARSSARS、禽流感、手足口病、甲型、禽流感、手足口病、甲型H1N1H1N1流感流感等也此起彼伏，感染性疾病仍然是人类关注的热点。等也此起彼伏，感染性疾病仍然是人类关注的热点。临床微生物学的任务临床微生物学的任务WHOWHO对临床微生物实验室对临床微生物实验室提出三项指导性方针提出三项指导性方针 （1 1）临床微生物实验室尽可能把目标集中在）临床微生物实验室尽可能把目标集中在快速诊断快速诊断方面；方面； （2 2）显微镜检查显微镜检查对建立快速的初步诊断具有对建立快速的初步诊断具有很大价值；很大价值； （3 3）实验室人员必须）实验室人员必须主动与临

3、床结合，将实主动与临床结合，将实验室数据转化为临床有用的信息。验室数据转化为临床有用的信息。标本采集和处理的原则标本采集和处理的原则 发现感染应发现感染应及时及时采集微生物标本作病原学检查采集微生物标本作病原学检查 最好是病程最好是病程早期、急性期或症状典型早期、急性期或症状典型时，而且必须时，而且必须在在使用抗生素或其他抗菌药物之前使用抗生素或其他抗菌药物之前采集采集标本采集时应标本采集时应严格无菌操作严格无菌操作，采集的标本应无外源，采集的标本应无外源性污染，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染性污染，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染 采集的标本均应盛于采集的标本均应盛于无菌容器无菌容

4、器内内要收集要收集足够量足够量的标本的标本 标本采集后应标本采集后应立即立即送至细菌室送至细菌室重视无菌部位的标本：血培养重视无菌部位的标本：血培养分析当前血培养存在的问题：报告不及时阳性率低采样时污染培养一次（单部位）作为诊断依据采血量不够（与培养基比例不正确）采样时间不正确血液培养操作规范血液培养操作规范 采集血培养的重要指征采集血培养的重要指征 1. 1. 发热（发热（3838）或低温（）或低温（3636）。）。2 2 寒战。寒战。3 3 白细胞增多（白细胞增多（101010109 9/L/L，特别有，特别有“核左移核左移”未成未成熟的或带状的白细胞增多熟的或带状的白细胞增多) )。4

5、4 粒细胞减少（成熟的多核白细胞粒细胞减少（成熟的多核白细胞1110109 9/L/L）。）。5 5 血小板减少。血小板减少。6 6 皮肤粘膜出血。皮肤粘膜出血。7 7 昏迷。昏迷。8 8 多器官衰竭，血压降低，多器官衰竭，血压降低，CRP CRP 升高及呼吸快，或同升高及呼吸快，或同时具备上述几种体征而临床可疑菌血症应采血培养。时具备上述几种体征而临床可疑菌血症应采血培养。新生儿菌血症，应增加尿液和脑脊液培养。新生儿菌血症，应增加尿液和脑脊液培养。对入院危重感染患者未进行系统性抗菌药物治疗之前，对入院危重感染患者未进行系统性抗菌药物治疗之前，应及时采集血培养。应及时采集血培养。血培养检测消毒

6、程序血培养检测消毒程序 皮肤消毒程序皮肤消毒程序为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂对皮肤进行严格为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。 用用70%70%酒精擦拭静脉穿刺部位待酒精擦拭静脉穿刺部位待30s30s以上。以上。 然后用棉签（然后用棉签（1 12%2%碘酊或碘酊或10%10%碘伏）消毒皮肤，从穿刺点碘伏）消毒皮肤，从穿刺点向外以向外以1.51.52cm2cm直径画圈进行消毒。直径画圈进行消毒。最后用最后用70%70%酒精脱碘。对碘过敏的患者，只能用酒精脱碘。对碘过敏的患者，只能用70%70%酒精酒

7、精消毒，消毒消毒，消毒60s60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。不允许在消毒后按压静脉，除非带有无菌手套。不允许在消毒后按压静脉，除非带有无菌手套。 培养瓶消毒程序培养瓶消毒程序 1 1 用用70%70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用60s60s。2 2 用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒精，然后注入血液。的酒精，然后注入血液。血培养检测采集和运送血培养检测采集和运送 采血量采血量 婴幼儿和儿童，一般静脉采血婴幼儿和儿童，一般静脉采血1 1 5ml5ml，采血量不超过患者总血，采血

8、量不超过患者总血量的量的1 1；成人采血量是；成人采血量是8 8 10ml10ml，2020 30ml30ml最合适，血液和肉最合适，血液和肉汤的比一般为汤的比一般为1 15 5至至1 11010。 血培养的份数和采血时间血培养的份数和采血时间一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单次血培养。一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单次血培养。建议常规的血培养应包括一个需氧血培养瓶和一个厌氧血培建议常规的血培养应包括一个需氧血培养瓶和一个厌氧血培养瓶。养瓶。对间歇性菌血症，用于培养的血液应在估计寒战或体温高峰对间歇性菌血症，用于培养的血液应在估计寒战或体温高峰到来之前到来之前0.50.5 1h1h采

9、集，或于寒战或发烧后采集，或于寒战或发烧后1h1h进行。进行。 血培养检测结果的报告程序血培养检测结果的报告程序 培养培养48h48h后，对阴性血培养结果在最短的时间内发后，对阴性血培养结果在最短的时间内发出初步出初步（中间）（中间）报告。报告。 血培养阳性，立即进行革兰染色。染色结果口头报血培养阳性，立即进行革兰染色。染色结果口头报告告（电话通知）（电话通知）给患者的主治医生。给患者的主治医生。 CLISCLIS推荐的抗生素敏感试验没有血培养直接敏感试推荐的抗生素敏感试验没有血培养直接敏感试验法，但根据革兰染色可以灵活地选择抗生素进行验法，但根据革兰染色可以灵活地选择抗生素进行直接抗生素药敏

10、试验，供临床参考使用。直接抗生素药敏试验，供临床参考使用。 CLSI要求每次采集2-3套标本,每套应包括一个需氧培养瓶,一个厌氧培养瓶。 成年病人不能只采1瓶血培养标本，采血量不足和只做1套血培养所得的结果是很难正确解释的。Cockrill2004年报告:163位病人,血培养仪采血套数及血量1套(20ml)2套(40ml)3套(60ml)检出率65%80%96% 血培养的套数2001年Khanna数据7072份血培养，640份阳性，阳性率为9组别阳性率需氧瓶厌氧瓶均报阳55仅需氧瓶报阳26仅厌氧瓶报阳19Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217

11、-219储从家数据（2000年）组别阳性率需氧瓶厌氧瓶均报阳50份仅需氧瓶报阳7份仅厌氧瓶报阳23份591份血培养，81份阳性，阳性率为13.17中华检验医学杂志，中华检验医学杂志，2000，23：285阴性培养结果分析阴性培养结果分析 抗生素影响抗生素影响 苛养菌苛养菌 特殊病原体特殊病原体 检验技术受限检验技术受限 采样运送不当采样运送不当 非感染性疾病非感染性疾病特别注意特别注意 血培养的关键是防止皮肤寄生菌或环境引起的污染。血培养的关键是防止皮肤寄生菌或环境引起的污染。 感染性心内膜炎，可能由皮肤寄生的微生物引起（例感染性心内膜炎，可能由皮肤寄生的微生物引起（例如：表皮葡萄球菌或棒杆菌

12、属）。如：表皮葡萄球菌或棒杆菌属）。 不同部位采集血样可选择左、右手臂或颈部，避免通不同部位采集血样可选择左、右手臂或颈部，避免通过静脉置管直接采集血样。过静脉置管直接采集血样。 切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。 标本采集量少，儿童少于标本采集量少，儿童少于1ml1ml，成人少于，成人少于3ml3ml，血，血培养份数不够，可明显降低血培养的阳性率。培养份数不够，可明显降低血培养的阳性率。 采血时机不合适，未抓住菌血症时期，或在刚使采血时机不合适，未抓住菌血症时期，或在刚使用抗生素不久，均降低了血培养的阳性率。用抗生素不久，均降低了血培养的阳性率。 采

13、血最好在：体温升高前半小时，使用抗生素前采血最好在：体温升高前半小时，使用抗生素前，或停用抗生素，或停用抗生素24h24h。特别提醒 血培养瓶存放于冰箱，取出后立即采血进行培养或血培养瓶存放于冰箱，取出后立即采血进行培养或血液标本采集后放置于冰箱，过低的温度均抑制细血液标本采集后放置于冰箱，过低的温度均抑制细菌生长。菌生长。 血液标本采集后，放于机外时间过长，细菌生长过血液标本采集后，放于机外时间过长，细菌生长过度已达衰老期，会降低阳性率。度已达衰老期，会降低阳性率。 标本消毒时消毒酒精未完全挥发，会降低阳性率。标本消毒时消毒酒精未完全挥发，会降低阳性率。 所用培养瓶必须仔细检查有无变色或混浊

14、。所用培养瓶必须仔细检查有无变色或混浊。 对两次不同部位血培养生长同一种微生物，不同对两次不同部位血培养生长同一种微生物，不同（类）无菌部位标本培养中生长同一种微生物或（类）无菌部位标本培养中生长同一种微生物或微生物快速生长（微生物快速生长（48h48h内）的情况下，应考虑是真内）的情况下，应考虑是真正的感染。正的感染。 培养瓶应立即送至细菌室，如有特殊情况不能送培养瓶应立即送至细菌室，如有特殊情况不能送检的，应将培养瓶置于室温，切勿放入冰箱。检的，应将培养瓶置于室温，切勿放入冰箱。台湾长庚医院台湾长庚医院BACTEC 9240 13台台WHOWHO对临床微生物实验室对临床微生物实验室提出三项

15、指导性方针提出三项指导性方针 （1 1）临床微生物实验室尽可能把目标集中在）临床微生物实验室尽可能把目标集中在快速诊断快速诊断方面；方面； （2 2）显微镜检查显微镜检查对建立快速的初步诊断具有对建立快速的初步诊断具有很大价值；很大价值； （3 3）实验室人员必须）实验室人员必须主动与临床结合，将实主动与临床结合，将实验室数据转化为临床有用的信息。验室数据转化为临床有用的信息。标本采集和处理的原则标本采集和处理的原则 发现感染应发现感染应及时及时采集微生物标本作病原学检查采集微生物标本作病原学检查 最好是病程最好是病程早期、急性期或症状典型早期、急性期或症状典型时，而且必须时，而且必须在在使用

16、抗生素或其他抗菌药物之前使用抗生素或其他抗菌药物之前采集采集标本采集时应标本采集时应严格无菌操作严格无菌操作，采集的标本应无外源，采集的标本应无外源性污染，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染性污染，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染 采集的标本均应盛于采集的标本均应盛于无菌容器无菌容器内内要收集要收集足够量足够量的标本的标本 标本采集后应标本采集后应立即立即送至细菌室送至细菌室血培养检测消毒程序血培养检测消毒程序 皮肤消毒程序皮肤消毒程序为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂对皮肤进行严格为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。 用用70%70%酒精擦拭静脉穿刺部位待酒精擦拭静脉穿刺部